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两株高效溶赤潮异弯藻放线菌的分离、鉴定及溶藻活性物质的初步研究
作 者: 于风娟
导 师: 吴刚
学 校: 华中师范大学
专 业: 微生物学
关键词: 赤潮异弯藻 溶藻放线菌 链霉菌 溶藻物质
分类号: X173
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要
赤潮已经成为世界上公认的海洋灾害之一,严重破坏了海洋生态系统,制约了经济的发展,影响了海洋的可持续发展,因而受到了广泛的关注。目前对于赤潮的防治,基本上是以预防为主,而赤潮的治理方法目前还只是在探索阶段。除了传统的物理化学方法之外,溶赤潮藻微生物的研究也逐渐受到重视。本文针对从武汉周边土壤中分离得到两株具有强溶藻能力的放线菌,编号为B-10和G-11。研究了B-10和G-11对赤潮异弯藻(Heterosigma akashiwo)、锥状斯克里普藻(Scrippsiella trochoidea)、微小原甲藻(Prorocentrum minimum)、金藻(Golden algae)的溶藻效果及溶藻方式,通过形态学特征、培养特征、生理生化反应、16SrDNA序列分析、鉴定,结果表明:2株放线菌对赤潮异湾藻和锥状斯克里普藻都有较好的溶藻效果,对微小原甲藻和金藻的生长也有抑制作用,且在传代5次后能够保持稳定的溶藻效果,按1%的体积比接种5d后B-10和G-11对异湾藻的去除率分别为90%和99.44%。通过溶藻方式研究,发现2株菌都是通过释放胞外代谢物溶藻,且胞外代谢产物对温度敏感,当温度达到100℃时会使2种溶藻物质失活。经形态学特征、生理生化鉴定及16S rDNA序列分析结果,可初步判断,B-10菌株属于链霉菌属的细黄链霉菌(Streptomyces microflavus)类群,菌株G-11属于链霉菌属的变异链霉菌(Streptomyces variabilis)类群。为了探索G-11溶藻活性物质的结构与性质,采用了透析、乙醇沉淀、有机溶剂萃取等测试方法对其基本理化性质进行研究。结果表明放线菌B-11溶藻活性物质可能是分子量大于3.5KD的一种或多种亲酯性物质。
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全文目录
摘要 4-5 Abstract 5-8 第一章 文献综述 8-13 1. 赤潮的定义 8 2. 赤潮的危害 8-10 3. 赤潮的预防对策 10 4. 赤潮的物理、化学治理方法 10 5. 赤潮的微生物治理 10-12 5.1 利用真菌抑制微藻的生长 10-11 5.2 利用病毒抑制微藻的生长 11 5.3 利用细菌抑制微藻的生长 11-12 5.4 放线菌溶藻 12 6. 本文研究的目的和意义 12-13 第二章 溶藻放线菌的筛选及鉴定 13-25 1. 材料与方法 13-15 1.1 材料 13 1.2 方法 13-15 2. 结果与分析 15-23 2.1 异弯藻生长曲线的测定 15-16 2.2 溶藻放线菌的筛选结果 16-17 2.3 溶藻活性稳定性测试 17-19 2.4 溶藻放线菌对其他赤潮藻的溶藻效果 19 2.5 溶藻放线菌的形态观察 19-20 2.6 溶藻放线菌的生理生化测试 20-21 2.7 溶藻放线菌溶藻方式的探究 21-22 2.8 溶藻放线菌的分子鉴定 22-23 3. 讨论 23-25 第三章 放线菌溶藻活性物质的初步研究 25-32 1. 材料与方法 25-26 1.1 材料 25 1.2 方法 25-26 2. 结果与分析 26-30 2.1 放线菌G-11的醇沉实验 26-27 2.2 放线菌G-11酶处理实验 27-28 2.3 放线菌G-11的有机溶剂萃取实验 28-29 2.4 放线菌G-11的透析实验 29-30 3. 讨论 30-31 4. 结论 31-32 参考文献 32-36 在读期间已发表的论文 36-37 致谢 37
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中图分类: > 环境科学、安全科学 > 环境科学基础理论 > 环境生物学 > 环境植物学
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