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重组人干扰素α-1b的纯化工艺研究

作　者: 顾建阳
导　师: 陈霞
学　校: 吉林大学
专　业: 生物工程
关键词: 干扰素α-1b 盐析层析
分类号: R914
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 96次
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内容摘要

干扰素是一种广泛应用于临床治疗的抗病毒剂,具有广谱的抗病毒性。它没有直接杀伤病毒的作用,主要是刺激细胞而产生相应的抗病毒物质。它还可以通过增强免疫细胞的活力来调节机体的免疫功能,从而达到增强自身抵抗病毒的能力。干扰素是一种细胞因子,主要是由单核和淋巴细胞产生,具有较强的免疫调节及抗病毒感染的能力。主要用于治疗伴有HBV-DNA、DNA多聚酶阳性、HBeAg阳性等有病毒复制标志的慢性活动性乙肝病人、伴有HCV抗体阳性和谷丙转氨酶增高,但不伴有肝功能代偿失调的成年急慢性丙肝病人、尖锐湿疣、小儿病毒性肺炎、带状疱疹、上呼吸道感染、多发性骨髓瘤、慢性宫颈炎、宫颈糜烂、毛细胞白血病、非何杰金氏淋巴瘤、慢性白血病以及喉乳头状瘤、蕈样肉芽肿、黑色素瘤、、基底细胞癌膀胱癌等多种病症。从90年代至今,更多的研究人员开始关注可以抗病毒及调节机体免疫能力的药物。干扰素作为一种广谱的抗病毒物质越来越受到人们的关注。干扰素已经变成21世纪抗病毒、治疗癌症最为广泛的药物之一。α型干扰素是迄今为止治疗慢性乙型肝炎的首选抗病毒药物,治疗药物的显效率在20%-30%左右。干扰素代表了治疗慢性肝炎药物发展的方向。它还是治疗丙型肝炎的较为有效的抗病毒药物,它又是临床上应用最广的治疗肿瘤的细胞因子。不仅可以增强机体的免疫功能,还可以调整自身免疫性疾病免疫过渡到接近正常水平。经过临床应用治疗表明,用干扰素治疗的病例,一般无严重副反应,临床上正在不断开发新的适应症以扩大干扰素的使用。

全文目录

摘要  4-7
第1章前言  7-20
  1.1 干扰素的相关研究  7-16
    1.1.1 干扰素的来源和分类  7-10
    1.1.2 生理方面作用及临床中干扰素主要的应用  10-16
    1.1.3 干扰素的作用特点及干扰素的基因工程  16
  1.2 包涵体的形成、复性及蛋白质纯化  16-18
    1.2.1 包涵体的形成及处理方法  16-17
    1.2.2 现常用复性方法  17
    1.2.3 复性后蛋白的纯化  17-18
  1.3 本课题的立题依据  18-19
  1.4 实验设计和观测方法  19-20
第2章原料、设备及方法  20-31
  2.1 原料、设备和溶液  20-25
    2.1.1 原料  20-21
    2.1.2 仪器  21-22
    2.1.3 常用试剂配制  22-25
  2.2 方法  25-31
    2.2.1 菌种及发酵  25-26
    2.2.2 干扰素的初步提取  26
    2.2.3 层析纯化  26-28
    2.2.4 结果的检测  28-31
第3章结果与讨论  31-41
  3.1 初提过程及初制干扰素检测  31
  3.2 层析后蛋白质含量检测  31
  3.3 层析后电泳纯度（SDS-PAGE）检测  31-33
  3.4 层析后HPLC 纯度检测  33-36
  3.5 干扰素活性的检测  36-39
  3.6 蛋白质收获率比较  39-40
  3.7 细菌内毒素  40
  3.8 两种纯化方法比较  40-41
第4章结论  41-42
参考文献  42-44
中文摘要  44-45
Abstract  45-47
作者简介及科研成果  47-48
致谢  48

重组人干扰素α-1b的纯化工艺研究

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