学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

锶对hMSCs增殖、分化的影响及含锶脱钙骨对hMSCs的作用

作　者: 王伟
导　师: 赵建华
学　校: 第三军医大学
专　业: 外科学
关键词: 锶 间质干细胞 骨髓细胞 细胞增殖 细胞分化 组织工程 脱钙骨基质 Ⅰ型胶原
分类号: R329
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 20次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载
 

内容摘要


目的:观察锶(Sr)对人骨髓间充质干细胞(human bone marrow derived mesenchymal stem cells , hMSCs)增殖与成骨分化的影响并探索其最佳作用浓度;制备不同含锶量的脱钙骨基质(decalcified bone matrix,DBM),并与hMSCs复合,成骨诱导培养后观察hMSCs在不同含锶量的脱钙骨中的成骨效果。方法:1、抽取健康成年志愿者骨髓6ml,体外分离、培养原代hMSCs,流式细胞术鉴定细胞表型。取第4代细胞进行实验,共分为5组,A组为空白对照,培养液中仅加入骨诱导剂(地塞米松10-8mol/L、抗坏血酸50μg/ml、β-甘油磷酸钠10mmol/Lol/L),B、C、D、E组培养液在加入骨诱导剂后分别加入3.75×10-3、3.75×10-2、3.75×10-1、3.75mmol/L的氯化锶(SrCl2)。定期测定各组hMSCs的增殖情况(MTT法)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性(酶标法)和骨钙素(OCN)含量(放免法),并观察细胞茜素红钙结节染色情况,分析各组钙结节数量及面积。2、收集临床髋关节置换术后废弃的股骨头(外伤致股骨颈骨折,股骨头无缺血性坏死),切成5mm×5mm×5mm的骨块,以改良Urist法制作脱钙骨基质(DBM)。将Ⅰ型胶原溶液分别与不同浓度的SrCl2溶液混合,使锶-胶原溶液中锶的终浓度分别为:0、3.75×10-3、3.75×10-2、3.75×10-1、3.75mmol/L,分别标记为A’、B’、C’、D’、E’组。将制备的DBM浸入锶-胶原混合溶液中1 h,取出后以真空吸附法使锶-胶原混合物充分吸附于材料表面,将材料取出,环氧乙烷灭菌备用。将培养的第4代hMSCs与各组含锶的DBM复合培养,定期测定各组hMSCs的殖增情况(MTT法)、碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性(酶标法)和骨钙素(OCN)含量(放免法)。结果:l、随培养时间增加,各组细胞增殖和成骨分化均明显提高,有显著差异(P<0.01);同时间点比较中,第7天的细胞增殖实验、第7、14天的ALP检测、第14、21天的OCN检测以及第21天的钙结节数量、面积定量检测,B~E组均优于A组并有显著差异(P<0.05)。第7天的MTT检测及第14天的ALP检测,D组均值最高,与A、B、C组有显著差异( P< 0.05),与E组无显著差异( P >0.05);第21天的OCN检测以及钙结节数量、面积定量检测,D组均值最高,与其他4组均有显著性差异( P<0.05)。2、hMSCs与各组含锶DBM复合培养后,随培养时间增加,各组细胞增殖程度明显提高,有显著差异(P<0.01);同时间点比较中,MTT:第1、4、7天各组间均无显著性差异( P >0.05);ALP:第7、14天各有显著性差异(P<0.01),含锶组活性强于空白组,含锶组间差异不明显( P >0.05);OCN:第7、14、21天,无显著性差异( P >0.05);补充实验证实,不复合细胞的DBM含有不同含量OCN。结论:1、锶可促进hMSCs的增殖及成骨分化,其最佳作用浓度为3.75×10-1mmol/L。2、所制作的含锶DBM具有良好的生物相容性,hMSCs与含锶DBM复合培养后能够增殖并成骨分化,含锶组成骨分化优于空白组。因所制作的DBM生物学性状差异较大,不能进一步证明各组间增殖及成骨分化的差异。

全文目录


英文缩写词  4-6
英文摘要  6-9
中文摘要  9-11
论文正文 锶对hMSCs 增殖、分化的影响及含锶脱钙骨对hMSCs 的作用  11-46
  前言  11-13
  第一部分 锶对人骨髓间充质干细胞增殖和成骨分化的影响研究  13-22
    材料与方法  13-16
    结果  16-20
    讨论  20-22
  第二部分 复合锶的DBM 的制作及其对hMSCs 的作用  22-31
    材料与方法  22-25
    结果  25-27
    讨论  27-31
  全文结论  31-32
  致谢  32-33
  照片  33-42
  参考文献  42-46
文献综述 锶对骨生成的影响及其应用研究进展  46-53
  参考文献  51-53
攻读学位期间发表的论文  53

相似论文

  1. 猪前脂肪细胞分化过程中抵抗素基因表达水平及其影响因素,R587.1
  2. Pin1在骨肉瘤细胞中的表达及对细胞周期的影响,R738.1
  3. 酸溶液对壳聚糖/羟基磷灰石复合材料的结构与性能的影响研究,R318.08
  4. 兔骨髓间充质干细胞分离培养及定向分化的研究,R329
  5. 组织工程化类金刚石涂层瓣膜构建及其体内植入的初步研究,R654.2
  6. Toll样受体4信号通路在脂多糖促进肺癌细胞增殖中的机制探讨,R734.2
  7. hnRNP A2/B1及p21WAF1蛋白在非小细胞肺癌中表达及意义,R734.2
  8. 半胱胺制剂对新生犊牛早期断奶成功率和免疫功能的影响,S823.5
  9. 脑源性神经营养因子对骨髓间质干细胞移植治疗大鼠脑出血的影响,R743.34
  10. SHH-N信号通路及其靶基因N-myc对神经干细胞增殖的影响,R329
  11. 兔脂肪来源干细胞分离培养及富血小板血浆对其增殖的影响,R329
  12. 人皮肤成纤维细胞搅拌培养和保存的初步研究,R329
  13. 骨髓间充质干细胞血肿周边移植对大鼠脑出血的治疗作用及相关机制的探究,R743.34
  14. 大鼠再生肝脏细胞周期的研究,Q253
  15. 不同免疫方式对雏鸡免疫器官发育、细胞增殖及凋亡相关基因表达的影响,S858.31
  16. 蟾蜍灵对血管内皮细胞EAhy926增殖和诱导凋亡的研究,R285
  17. 人参皂苷Rg1对优化培养的人脐血MSCs增殖、分泌功能与ERK、p38信号分子的影响,R285.5
  18. 兔脂肪干细胞与骨髓间充质干细胞成软骨能力的比较,R329
  19. ROCK表达下调对PDGF介导的血管平滑肌细胞迁移、增殖的调控,R363
  20. As2O3对体外培养成骨细胞增殖与凋亡和BMP-2基因表达的影响,R363
  21. 成纤维细胞与明胶海绵支架三维共培养的实验研究,R329

中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体形态学 > 人体组织学
© 2012 www.xueweilunwen.com