学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

Akt介导氯沙坦对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤保护作用

作　者: 刘文东
导　师: 李悦山
学　校: 广州医学院
专　业: 药理学
关键词: 过氧化损伤氯沙坦心肌细胞过氧化氢 PI3K-Akt Caspase3/7
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 19次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的:探讨氯沙坦对H2O2诱导乳鼠心肌细胞损伤的保护作用及其与PI3K/AKT信号通路活化的关系。方法:原代培养SD新生大鼠心肌细胞,以H2O2建立心肌细胞损伤模型。实验分组:(A)正常对照组;(B)H2O2损伤组:培养基中加入H2O2终浓度为100μmol/L;(C)氯沙坦低剂量组:培养基中先加入终浓度为1μmol/L氯沙坦孵育30min,再加入相同的H2O2损伤;(D)氯沙坦中剂量组:先加入终浓度为3μmol/L氯沙坦孵育30min,再加入相同的H2O2损伤;(E)氯沙坦高剂量组:先加入终浓度为10μmol/L氯沙坦孵育30min,再加入相同的H2O2损伤;(F)LY294002干预组:先加入终浓度为10μmol/L氯沙坦和50μmol/L的LY294002孵育30min,再加入相同的H2O2损伤。不同药物处理后,观察各组的心肌细胞形态变化、MTT细胞存活率、测定培养上清乳酸脱氢酶(LDH)活性、丙二醛(MDA)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性、细胞浆内caspase3/7活性以及Western Blotting检测P-Akt(Ser473)蛋白的表达。结果:1.细胞形态:H2O2损伤组和LY294002干预组心肌细胞均停止自发搏动,细胞间连接减少,细胞伪足收缩,细胞胞体变圆、肿胀甚至悬浮。氯沙坦各剂量组均能够逆转H2O2引起的这些改变。2. MTT细胞存活率:与正常组相比,H2O2损伤组和LY294002干预组的心肌细胞存活率显著降低P<0.01),与损伤组和LY294002干预组相比,氯沙坦各剂量组均能显著提高细胞存活率(P<0.01),但各剂量组间并没有差别。3. LDH活性:与H2O2损伤组和LY294002干预组相比,氯沙坦各剂量组均能够显著降低LDH活性(P<0.01)。H2O2损伤组和LY294002干预组这两组间并无差别。氯沙坦终浓度为10μmol/L时,LDH活性最低,且与正常组无差别。4. MDA含量:与正常组相比,H2O2损伤组和LY294002干预组MDA含量明显升高(P<0.01)。与H2O2损伤组相比,氯沙坦各剂量组显著降低MDA含量(P<0.01),但与LY294002干预组无差别。与LY294002干预组相比,氯沙坦中剂量组和高剂量组MDA含量明显有差异(P<0.01),但低剂量组无差别。MDA含量随氯沙坦的浓度上升而有下降趋势,但各剂量组间无差别。5. SOD活性:与H2O2损伤组和LY294002干预组相比,氯沙坦各剂量组SOD活性均显著升高(P<0.01)。H2O2损伤组和LY294002干预组相比并无差别。氯沙坦各剂量组间SOD活性无差别。氯沙坦高剂量组与正常组无差别。6. Caspase3/7活性: H2O2损伤组和LY294002干预组的Caspase3/7活性均明显高于其余各组(P<0.01),但这两组间并无差别。Caspase3/7活性明显与氯沙坦浓度有依赖关系(P<0.01),其活性随浓度的减少而增加。7.蛋白P-Akt表达:氯沙坦处理后,各剂量组的p-Akt蛋白表达明显增强,且有剂量依赖关系。表明氯沙坦可以通过Akt抑制H2O2诱导的细胞损伤。结论:1. H2O2对心肌细胞产生损伤作用后,心肌细胞培养上清LDH活性、MDA含量和Caspase3/7活性上升,SOD减少,细胞生存率显著下降。2.氯沙坦剂量依赖性减少损伤心肌细胞培养上清的LDH活性、MDA含量和Caspase3/7活性,提高SOD活性,从而提高细胞生存率。3. PI3K/Akt信号通路介导了氯沙坦对H2O2所致心肌细胞损伤的保护作用。

全文目录

英文缩略词  3-5
中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
前言  9-12
材料和方法  12-21
  1. 材料  12-15
  2. 方法  15-20
  3. 统计分析  20-21
结果  21-28
讨论  28-30
全文小结  30-31
参考文献  31-35
综述  35-42
  参考文献  39-42
致谢  42

Akt介导氯沙坦对H_2O_2诱导乳鼠心肌细胞损伤保护作用

内容摘要

全文目录

相似论文