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油菜菌核病生防菌筛选及其防病促生作用研究

作　者: 赵邑尘
导　师: 薛泉宏
学　校: 西北农林科技大学
专　业: 微生物学
关键词: 放线菌生物防治油菜病害核盘菌芸苔链格孢菌
分类号: S435.654
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

本试验旨在从土壤中分离筛选对油菜菌核菌、黑斑病病菌等病原菌有良好拮抗性的生防菌,探求入选菌对油菜的促生作用及对诱导抗性的影响。1.通过对供试255株放线菌进行系统的筛选,最终获得拮抗活性高的7、28、45、55、63、80号菌株,其无菌发酵滤液对核盘菌的抑制率分别为80.33%、85.25%、83.61%、85.25%、83.61%、81.97%,对芸苔链格孢菌的孢子萌发抑制率均达到60%以上。经16S rDNA序列分析,55号菌与弗氏链霉菌( S. fradiae)和玫瑰黄链霉菌(S. roseoflavus)的16S rDNA全序列相似性为100%;7号菌与球孢链霉菌(S. globisporus)的16S rDNA全序列相似性为100%,即7号菌株属于链霉菌属球孢链霉菌(S. globisporus),55号菌株属于链霉菌属玫瑰黄链霉菌或弗氏链霉菌。2.青海高寒地区油菜田土壤中放线菌总量、拮抗性放线菌比例及对不同病原菌的抗性与土壤所处海拔高度有一定关系;从青海油菜田土壤分离所得放线菌中对芸苔链格孢菌、核盘菌及胡萝卜软腐欧文氏菌有拮抗性的放线菌分别占供试放线菌的59.3%,26.4%及13.2%,拮抗芸苔链格孢菌的放线菌比例最高;青海不同海拔高度油菜种植区的土壤微生态环境对3种油菜土传病害的潜在抗性不同。3.接种供试放线菌对油菜茎叶和根系生长有明显的促进作用。与对地上部分的促生效果相比,供试放线菌对油菜根系生长的促进作用更为明显。供试放线菌和核盘菌混接时对油菜促生作用优于放线菌单接及放线菌+芸苔链格孢菌混接的处理。其中7号菌表现最优;在单接生防菌、生防菌和核盘菌混接及生防菌和芸苔链格孢菌混接时的油菜鲜重的最大增率分别为59.92%、69.16%及60.46%。放线菌接种量与油菜促生作用之间存在规律性的关系。对大多数供试放线菌而言,随接种量增加,促生效应增强。其余供试放线菌呈相反趋势或不规律波动。4. 7、28、63号生防菌接种后,均能提高油菜叶片PPO活性及根系活力。①单接生防菌时,28号菌作用下的PPO酶活最高,最大增率为56.35 %,7号菌作用下的根系活力最高,最大增率为25.2 %。②生防菌与核盘菌混接时,63号菌作用下的PPO酶活最高,最大增率为23.06 %,28号菌作用下的根系活力最高,最大增率为13.35%。③生防菌与芸苔链格孢菌混接时,63号菌作用下的PPO酶活最高,最大增率为54.72 %,28号菌作用下的根系活力最高,最大增率为24.02%。④单接生防菌对油菜叶片PPO活性和根系活力提高优于生防菌与病原菌混接。

全文目录

摘要  4-5
ABSTRACT  5-10
第一章文献综述  10-19
  1.1 油菜菌核病病害概述  10-13
    1.1.1 油菜菌核病症状  11
    1.1.2 油菜菌核病病原菌  11-12
    1.1.3 油菜菌核病的致病机理  12
    1.1.4 油菜菌核病的传播途径  12-13
  1.2 油菜菌核病防治进展  13-15
    1.2.1 选育抗病品种防治油菜菌核病  13
    1.2.2 改善栽培技术防治油菜菌核病  13
    1.2.3 利用化学农药防治油菜菌核病  13-14
    1.2.4 利用微生物防治油菜菌核病  14-15
  1.3 放线菌防治植物病害的作用机制  15-16
    1.3.1 产生抗菌物质  15-16
    1.3.2 诱导抗性  16
    1.3.3 提高植物的抗逆能力  16
  1.4 存在问题  16
  1.5 本论文研究目的及技术方案  16-19
    1.5.1 研究目的  16-17
    1.5.2 研究思路  17-18
    1.5.3 技术路线  18-19
第二章青海高寒地区油菜地土壤中放线菌组成  19-26
  2.1 材料与方法  19-21
    2.1.1 材料  19-20
    2.1.2 方法  20-21
  2.2 结果与分析  21-25
    2.2.1 油菜田土壤放线菌生态分布的影响因素  21-22
    2.2.2 油菜田土壤拮抗性放线菌的生态分布  22-23
    2.2.3 油菜田拮抗性放线菌的抗性特征  23-25
  2.3 结论  25
  2.4 讨论  25-26
第三章生防放线菌筛选  26-34
  3.1 材料与方法  26-27
    3.1.1 材料  26
    3.1.2 方法  26-27
  3.2 结果与分析  27-32
    3.2.1 皿内拮抗性筛选  27-31
    3.2.3 发酵滤液对孢子萌发的影响  31-32
    3.2.4 生防菌对核盘菌和芸苔链格孢的菌丝的作用  32
  3.3 结论  32-33
  3.4 讨论  33-34
第四章生防放线菌的促生作用  34-44
  4.1 材料与方法  34-35
  4.2 结果与分析  35-43
    4.2.1 生防菌剂单独接种对盆栽油菜的促生作用  35-37
    4.2.2 生防菌剂与核盘菌混接对盆栽油菜的促生作用  37-39
    4.2.3 生防菌剂与芸苔链格孢菌混接对盆栽油菜的促生作用  39-41
    4.2.4 生防菌剂单接及与病原菌混接对盆栽油菜的促生作用影响差异  41-43
  4.3 结论  43
  4.4 讨论  43-44
第五章生防放线菌接种对油菜叶片保护性酶活性及根系活力的影响  44-57
  5.1 材料与方法  44-46
  5.2 结果与分析  46-55
    5.2.1 生防菌剂在盆栽条件下对油菜叶片PPO 活性的影响  46-50
    5.2.2 生防菌剂在盆栽条件下对油菜根系活力的影响  50-55
  5.3 结论  55
  5.4 讨论  55-57
第六章 2 株高效拮抗放线菌的16S RDNA 全序列分析及系统发育研究  57-63
  6.1 材料与方法  57-59
  6.2 结果与分析  59-61
  6.3 结论  61
  6.4 讨论  61-63
参考文献  63-70
附录  70-73
致谢  73-74
作者简介  74

油菜菌核病生防菌筛选及其防病促生作用研究

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