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肝细胞生长因子对肝细胞癌侵袭和转移的影响

作　者: 王庆军
导　师: 孙抒
学　校: 延边大学
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: HGF 肝细胞癌 EMT PI3K E-cadherin N-cadherin Vimentin MMPs
分类号: R735.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
下　载: 55次
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内容摘要

目的:研究肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)对肝细胞癌SMMC-7721的上皮-间叶转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的作用,并对其机制进行探讨。方法:应用传代细胞培养技术培养SMMC-7721细胞株,采用HGF最佳浓度处理该细胞株,通过Transwell实验、划痕实验、Wester blot技术研究HGF对肝癌细胞SMMC-7721 EMT的作用;同时,采用PI3K抑制物LY294002 10μmol/L预处理SMMC-7721细胞株,再加入相同浓度的HGF处理该细胞,然后与未经LY294002预处理的HGF作用细胞进行对比研究,探讨PI3K对于HGF作用机制的影响。结果:(1)划痕实验和Transwell实验显示HGF处理的细胞侵袭和转移能力与未处理细胞相比明显增强,Wester blot结果显示HGF处理的细胞的N-cadherin、MMP-2、MMP-9、Vimentin表达增加,E-cadherin表达减少;(2)LY294002预处理后,细胞不再受HGF的影响,细胞的形态没有明显变化,Transwell实验和划痕实验结果与未经处理的SMMC-7721相同;Wester blot结果显示:细胞的N-cadherin、MMP-2、MMP-9、Vimentin、E-cadherin的表达变化不明显。结论:1.HGF能够促进SMMC-7721的上皮间叶转化、增强其侵袭和转移能力、降低细胞的黏附能力,这种作用是通过PI3K实现的;2.HGF与受体c-Met结合激活了PI3K,继而引起一系列的细胞内信号传导,促进肝细胞癌SMMC-7721的上皮间叶转化;3.HGF/c-Met系统参与了肝癌的形成,并且在肝癌细胞的侵袭和转移的过程中起重要作用;4.HGF可作为肝细胞癌治疗的一个重要靶点。

全文目录

中文摘要  5-6
英文摘要  6-8
缩写词表  8-9
目录  9-10
第一章前言  10-13
第二章材料与方法  13-17
  2.1 实验材料  13-14
    2.1.1 主要试剂及细胞株  13
    2.1.2 主要仪器及软件  13-14
  2.2 实验方法  14-16
    2.2.1 细胞培养与镜下观察  14
    2.2.2 研究HGF对SMMC-7721作用的最佳浓度  14-15
    2.2.3 HGF对SMMC-7721的侵袭和转移能力影响的观察  15-16
  2.3 统计学分析  16-17
第三章结果  17-22
  3.1 SMMC-7721复苏后原代和传代后形态学  17-18
  3.2 探讨HGF处理SMMC-7721的最佳浓度  18-19
  3.3 HGF对SMMC-7721的侵袭和转移能力影响的观察  19-22
    3.3.1 划痕实验结果  19
    3.3.2 Transwell实验  19-20
    3.3.3 Western blot结果  20-22
第四章讨论  22-26
  4.1 HGF能够促进SMMC-7721的侵袭和转移  22-23
  4.2 HGF对SMMC-7721的上皮-间叶转化的机制探讨  23-26
第五章结论  26-27
参考文献  27-30
致谢  30-31
文献综述  31-40
  参考文献  38-40

肝细胞生长因子对肝细胞癌侵袭和转移的影响

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