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气态和液态甲醛对大鼠骨髓细胞遗传毒性的研究

作　者: 王昆
导　师: 杨旭
学　校: 华中师范大学
专　业: 生物化学与分子生物学
关键词: 甲醛 白血病 遗传毒性 骨髓细胞 DNA-蛋白质交联 单细胞凝胶电泳 KCl-SDS测量法
分类号: R114
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


甲醛是一种遗传毒物,流行病学研究表明甲醛可能具有诱导白血病的作用,然而甲醛诱导白血病的机制目前还不清楚.以不同浓度液态和气态甲醛对大鼠骨髓细胞进行染毒,采用KCl-SDS法检测了骨髓细胞DNA-蛋白质交联程度,并采用单细胞凝胶电泳技术(彗星实验)检测了骨髓细胞DNA链断裂程度.研究结果表明：与对照组相比,低浓度甲醛(液态甲醛浓度为：5μmol·L-1和25μmol·L-1;气态甲醛浓度为：0.5mg·m-3和1.0mg·m-3)可以引起DNA断裂水平显著增高(p<0.01)；而高浓度甲醛(液态甲醛浓度为：125μmol·L-1和625μmol·L-1;气态甲醛浓度为：3.0mg·m-3)则可以引起DNA-蛋白质交联水平显著增高(p<0.01；p<0.05)研究结果提示：甲醛染毒可以导致大鼠骨髓细胞DNA的损伤,提示甲醛诱导白血病具有高度的可能性.

全文目录


摘要  4-5
Abstract  5-8
1. 综述  8-14
  1.1 甲醛与人类日常生活  8
  1.2 甲醛在生物体内的主要代谢途径  8-9
  1.3 甲醛的遗传毒性  9-11
  1.4 甲醛与DNA-蛋白质交联(DNA-protein crosslinks,DPC)  11-13
    1.4.1 甲醛导致的DPC  11
    1.4.2 DPC与KCl-SDS沉淀法  11-12
    1.4.3 甲醛与单细胞凝胶电泳(single cell gel electrophoresis assay,SCGE)  12-13
  1.5 甲醛可能导致白血病  13-14
2. 材料与方法  14-19
  2.1 实验动物  14
  2.2 主要化学试剂  14
  2.3 主要实验仪器  14
  2.4 主要实验溶液的配制  14-15
    2.4.1 PBS缓冲液的配制  14-15
    2.4.2 KCl-SDS实验相关试剂  15
  2.5 实验步骤  15-19
    2.5.1 骨髓细胞悬液制备及液态气态染毒处理  15
    2.5.2 大鼠气态染毒处理  15-16
    2.5.3 KCl-SDS沉淀法测定甲醛致大鼠骨髓细胞DPC效应  16-17
    2.5.4 彗星实验对骨髓细胞DNA断裂和DPC的检测  17-18
    2.5.5 试验数据的统计分析  18-19
3. 结果  19-24
  3.1 DNA浓度标准曲线  19
  3.2 液态甲醛致大鼠骨髓细胞DPC效应  19-20
  3.2 气态甲醛致大鼠骨髓细胞DPC效应  20-21
  3.3 不同浓度液态甲醛致大鼠骨髓细胞DPC和DNA损伤的检测  21-23
  3.4 不同浓度气态甲醛致大鼠骨髓细胞DPC和DNA损伤的检测  23-24
4. 讨论  24-28
  4.1 DPC的生化特性与形成机理  24
  4.2 单细胞凝胶电泳实验(SCGE)  24-25
  4.3 甲醛致大鼠骨髓细胞DNA损伤和DPC形成的机制  25-26
  4.4 骨髓细胞的功能和白血病  26
  4.5 甲醛与白血病  26-28
5. 结论  28-29
参考文献  29-32
研究生在读期间已发表的科研论文  32-33
致谢  33-34
附:己发表论文一篇  34-44

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中图分类: > 医药、卫生 > 预防医学、卫生学 > 卫生基础科学 > 卫生毒理
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