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姜黄素衍生物FM0818抗氧化及抗炎活性研究

作　者: 许晨霞
导　师: 林菁；许建华
学　校: 福建医科大学
专　业: 药理学
关键词: 姜黄素衍生物 抗氧化 LPS RAW 264.7 脓毒症 抗炎
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


目的脓毒症(sepsis)是指由感染引起的全身性炎症反应综合征(Systemic inflammatory response syndrome,SIRS),其发病机制复杂,对机体组织器官损伤大、治疗难,已成为世界性攻关难题。姜黄素为姜黄的主要活性成分,具抗氧化、抗炎等药理作用,能减少各种炎症介质的合成和分泌。本实验室合成了一系列姜黄素衍生物,包括FM0818。本文实验建立了巨噬细胞体外炎症模型和小鼠体内脓毒症模型。旨在观察姜黄素衍生物FM0818对巨噬细胞炎症因子的影响及其对脓毒症模型小鼠的治疗作用,并探讨其作用机制。方法1.采用DPPH自由基体系、Fenton反应体系、及模拟机体中黄嘌呤与黄嘌呤氧化酶反应系统测定FM0818抗氧化活性;2.用脂多糖(LPS)刺激RAW 264.7细胞,ELISA法测定TNF-α、IL-6水平的变化,硝酸还原酶法测定NO的变化;3.小鼠尾静脉注射大肠埃希氏菌建立脓毒血症模型,考察FM0818对小鼠肝组织中MDA、SOD及血清中TNF-α、IL-6及NO水平的影响,观察小鼠的活动状态及生存率;4.通过Western blotting的方法,观察NF-κB蛋白含量变化,荧光法测定FM0818对细胞分泌ROS的影响。结果1.姜黄素衍生物FM0818对DPPH、超氧阴离子、羟基自由基具有较强的清除力且呈浓度依赖性;2.FM0818显著抑制LPS诱导RAW 264.7细胞的TNF-α、IL-6和NO表达和释放;3. FM0818降低脓毒血症小鼠肝组织中MDA、及血清中TNF-α、IL-6和NO的含量升高SOD的含量,改善小鼠的状态,提高大肠埃希菌感染小鼠的生存率,与抗生素联用组显著提高小鼠的生存率。4. FM0818显著抑制LPS诱导RAW 264.7细胞NF-κB的核转移作用及ROS的产生。结论采用细菌攻击建立了操作方便、重复性好的模型,FM0818对脓毒症小鼠具有保护作用,其保护作用可能与下列因素有关:1 FM0818可能通过对自由基的清除减轻了脓毒症中应激反应产生的自由基损害;2 FM0818可能通过抑制炎症反应细胞的活化,减轻TNF-α,和IL-6等炎症介质释放导致的全身性炎症反应;3 FM0818可能通过阻断LPS活化的NF-κB途径,抑制ROS产生从而起到保护作用。

全文目录


中文摘要  5-7
英文摘要  7-9
英文缩略词表  9-10
前言  10-13
第一部分 姜黄素衍生物FM0818 体外抗氧化及抗炎能力测定  13-22
  一 材料与方法  13-17
    1. 细胞株  13
    2. 主要试剂与溶液配制  13-14
    3. 仪器  14
    4. 实验方法  14-16
    5. 统计方法  16-17
  二 结果  17-19
    1. FM0818 对DPPH 自由基清除能力测定  17
    2. FM0818 对羟基自由基清除能力测定  17-18
    3. FM0818 对超氧阴离子清除能力测定  18
    4. FM0818 对RAW 264.7 细胞活力的影响  18-19
    5. FM0818 对LPS 诱导 RAW 264.7 细胞释放炎因子和NO 的影响  19
  三 讨论  19-21
  四 小结  21-22
第二部分 FM0818 对脓毒症小鼠的保护作用  22-32
  一 材料与方法  22-25
    1. 材料  22
    2. 方法  22-25
    3. 统计方法  25
  二 结果  25-30
    1. FM0818 对细菌脓毒症模型小鼠肝脏MDA、SOD 的影响  25-26
    2. FM0818 对细菌脓毒症小鼠血清TNF-α、IL-6 和NO 的影响  26-28
    3. FM0818 对脓毒症模型小鼠的生存率的影响  28-30
  三 讨论  30-31
  四 小结  31-32
第三部分 FM0818 抗炎作用机制的探讨  32-38
  一 材料与方法  32-35
    1. 材料  32-33
    2. 方法  33-34
    3. 统计方法  34-35
  二 结果  35-36
    1. 不同浓度FM0818 对LPS 刺激的NF-κB 通路的影响  35
    2. FM0818 对LPS 诱导RAW 264.7 细胞释放ROS 的影响  35-36
  三 讨论  36-37
  四 小结  37-38
结论  38-39
致谢  39-40
参考文献  40-44
综述  44-49

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中药学 > 中药药理学 > 中药实验药理
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