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芪蓝颗粒干预大鼠癌变模型的PCNA、EGFR、p27基因表达研究

作　者: 郑晓斌
导　师: 陈作良
学　校: 福建医科大学
专　业: 口腔临床医学
关键词: 4-硝基喹啉-1-氧化物动物模型芪蓝颗粒细胞周期调控蛋白免疫组化
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

目的:通过建立大鼠舌粘膜癌变模型并应用芪蓝颗粒进行干预,观察其阻癌抑癌作用,同时采用免疫组织化学SABC方法研究增殖细胞核抗原(PCNA)、表皮生长因子受体(EGFR)、p27蛋白的表达变化。探讨芪蓝颗粒阻癌抑癌的可能机理。方法:动物建模选用6~7周龄SD大鼠150只,随机分成5组(30只/组),A组为癌变模型组,B组为低剂量干预组,C组为中剂量干预组,D组为高剂量干预组,E组为正常对照组。饮水法给药,分别给予0.002% 4NQO及0.002% 4NQO加低、中、高三种剂量的芪蓝颗粒建立大鼠的癌变模型及药物干预模型。于9周、18周、27周、36周分批处死动物(7只/周),取舌组织做病理切片,采用免疫组织化学SABC法检测PCNA、EGFR、p27蛋白的表达情况,并通过统计软件对实验结果进行统计学分析。结果:1.芪蓝颗粒具有扶正固本及明显的抑癌阻癌的效果:A组大鼠相对于B、C、D组大鼠倦怠嗜睡,皮毛色黄、粗糙无光泽,体重逐渐减轻;在27、36周时,A、B、C、D组癌变程度差异具有统计学意义,A组大鼠的总体癌变率较B、C、D组为高(p<0.05),其中C组的癌变程度最低(p<0.01)。2.从正常口腔粘膜→各级异型增生→鳞癌的病变过程中,PCNA、EGFR蛋白阳性表达呈递增趋势(p<0.05),p27蛋白阳性表达呈递减趋势(p<0.05)。3.异常增生舌组织中A组PCNA和EGFR蛋白表达明显高于中药干预组各组(p< 0.05),A组p27蛋白表达则明显低于中药干预组各组(p< 0.05);舌癌组织中A组PCNA蛋白和p27蛋白阳性表达与中药干预组之间无明显统计学差异(p > 0.05),A组EGFR蛋白表达则明显高于中药干预组各组(p< 0.05)。4.在异常增生组织中PCNA蛋白表达与p27蛋白表达呈负相关(r =-0.786 ,p<0.001),PCNA蛋白表达与EGFR蛋白表达呈正相关(r =0.588 ,p <0.001);在癌变组织中PCNA蛋白表达与P27蛋白表达呈负相关(r =-0.502 ,p <0.05),EGFR蛋白则与细胞增殖活性无关(r =0.252 ,p >0.05)。结论:1、芪蓝颗粒具有扶正固本的功效。2、芪蓝颗粒能明显降低舌黏膜异常增生和癌的发生率,延缓舌癌变进程,对实验性口腔黏膜癌变具有明显的阻癌、抑癌作用。3、PCNA、EGFR及p27的表达与口腔鳞癌的发生发展有关,可作为评估口腔鳞癌细胞增殖状况的标记物。4、异常增生阶段,EGFR可促进细胞的增殖,p27则抑制细胞的增殖,两者相互制约调控参与肿瘤的形成;恶性肿瘤阶段,p27对癌症的进展仍有限制作用。5、芪蓝颗粒阻癌的机制可能是,在异常增生阶段通过下调PCNA和EGFR蛋白的表达,同时上调p27蛋白的表达,从而抑制上皮细胞异常增殖,起到阻断癌变的作用,而在癌组织中通过下调EGFR的表达起到抑制癌症的作用。

全文目录

中文摘要  4-6
英文摘要  6-9
前言  9-10
材料与方法  10-14
  1.实验材料  10-11
  2.实验方法  11-14
结果  14-25
讨论  25-30
结论  30-31
参考文献  31-34
致谢  34-35
综述  35-39

芪蓝颗粒干预大鼠癌变模型的PCNA、EGFR、p27基因表达研究

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