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NF-κB与放射线诱导的人食管癌细胞上皮间质转化之间的关系研究

作　者: 杨晔
导　师: 薛晓英
学　校: 河北医科大学
专　业: 肿瘤学
关键词: 食管癌放射治疗 NF-κB E-cadherin Vimentin 放射抗性
分类号: R735.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2014年
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内容摘要

目的:探讨NF-κB与放射线诱导的人食管癌细胞上皮间质转化之间的关系，为食管癌的临床放疗提供新的靶点及依据。方法:采用直线加速器照射食管癌上皮细胞Eca109，累计剂量60Gy，至Eca109R60，并用克隆形成实验检测其放射抗性。显微镜下观察细胞的形态学变化，同时，应用real-time PCR和免疫细胞化学的方法检测食管癌上皮细胞Eca109和Eca109R60细胞系中NF-κB、E-cadherin和Vimentin基因表达情况。结果：1在显微镜下观察，与食管癌上皮细胞Eca109相比，Eca109R60细胞的形态更加不规则，呈细长的纺锤体形、极性消失，细胞之间的粘附更加疏松。2经过放射线照射之后的食管癌上皮细胞Eca109R60具有放射抗性，其中放射生物学参数SF2为0.94，D0为7.138。3食管癌上皮细胞Eca109和Eca109R60中NF-κB、E-cad和Vim基因mRNA的表达情况及相互之间的关系：与未经照射的食管癌上皮细胞Eca109相比，Eca109R60中E-cad基因mRNA表达明显升高（P=0.003）。而Vim基因mRNA的表达下调（P=0.004）。Eca109细胞中NF-κB基因mRNA的表达比Eca109R60中NF-κB基因mRNA表达减少，两者之间的差异有统计学意义（P=0.004）。相关性分析显示NF-κB与Vim基因mRNA表达之间不具有线性关系（P=0.747），但其在某种程度上存在正相关性。NF-κB与E-cad基因mRNA表达的也不具有直线关系（P=0.061），但其在某种程度上呈负相关。4E-cad、Vim和NF-κB在两株细胞中蛋白水平表达的差异结果如下：免疫细胞化学结果显示上皮细胞标志物E-cad和间质细胞标志物Vim均在两株食管癌上皮细胞的胞浆中表达，其中E-cad更多的表达于胞膜上。显微镜下观察与食管癌上皮细胞Eca109相比，Eca109R60细胞系中E-cad染色的阳性表达程度明显减弱，间质细胞标志物Vim在Eca109R60细胞株中阳性染色程度则明显增强。显微镜下观察，与食管癌上皮细胞Eca109相比，NF-κB p65蛋白在Eca109R60细胞株阳性染色程度明显增强。结论：1经放射线反复照射之后建立的食管癌细胞Eca109R60具有放射抗性。2食管癌放射抗性细胞系Eca109R60发生上皮间质转化，其标志物E-cad表达下调， Vim表达上调。3Eca109R60细胞株中NF-κB表达上调，与E-cad表达在某种程度上成负相关，与Vim表达呈正相关，提示EMT可能与NF-κB信号通路相互作用，最终参与食管癌放射抗性的形成。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-8
前言  8-9
材料与方法  9-15
结果  15-17
附图  17-23
附表  23-27
讨论  27-31
结论  31-32
参考文献  32-35
综述 NF-κB、EMT 及食管癌放射抗性三者之间关系的研究进展  35-43
  参考文献  39-43
致谢  43-44
个人简历  44

NF-κB与放射线诱导的人食管癌细胞上皮间质转化之间的关系研究

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