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杏丁联合吡柔比星对膀胱癌T24细胞裸鼠移植瘤的化疗作用及机制研究

作　者: 艾衍凯
导　师: 张天禹
学　校: 桂林医学院
专　业: 泌尿外科
关键词: 杏丁 THP Survivin mRNA Caspase-3
分类号: R737.14
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的:探讨杏丁联合吡柔比星(pirarubicin，THP)对膀胱癌T-24细胞裸鼠移植瘤化疗疗效及其对Caspas-3mRNA、SurvivinmRNA表达的影响,进而为杏丁作为临床膀胱癌化疗药物辅助性用药提供一定的理论依据。方法:48只裸鼠右前肢根部背侧皮下接种人膀胱癌T24细胞，随机分为8组，对照组(生理盐水)，杏丁小剂量组(50mg/kg)，杏丁中剂量组(100mg/kg)，杏丁大剂量组(150mg/kg)，吡柔比星小剂量组(7.5mg/kg)，吡柔比星常规剂量组(15mg/kg)，联合用药A组(杏丁大剂量组+吡柔比星小剂量组)，联合用药B组(杏丁大剂量组+吡柔比星常规剂量组)；成瘤后第14d开始,相应各组每1d予杏丁灌胃、3d一次于肿瘤局部注射生理盐水或吡柔比星，每3d测量1次肿瘤大小，绘制移植瘤生长曲线。处理后第21d杀鼠摘取移植瘤,计算肿瘤抑制率,金氏修正公式计算药物联合应用后其相互作用。光镜观察肿瘤组织形态学改变，RT-PCR检测Survivin、caspase-3基因的表达。结果:各用药组平均瘤体积(682.0±36.6、562.4±32.3、496.0±15.6、505.0±35.9、389.3±26.5、375.3±23.5、302.5±15.0) mm3与对照组比较均低于对照组平均瘤体积（857.6±71.8）mm3，差异均有统计学意义（P<0.05）。各用药组平均瘤重（1.08±0.25、0.94±0.17、0.86±0.16、0.78±0.15、0.61±0.13、0.37±0.07、0.50±0.09）g除杏丁小剂量组外其余各组均低于对照组平均瘤重（1.26±0.20）g，差异有统计学意义（P<0.05）。两药相互作用q值计算结果为: A组瘤重抑瘤率q=1.04, B组瘤重抑瘤率q=1.11，表明两药有相加作用。HE染色后结果显示各用药组肿瘤标本内均出现片状坏死灶。移植瘤经杏丁大剂量组分别联合THP各组应用处理后，Survivin mRNA的表达下调(P<0.05)，较单独应用THP效果显著(P<0.05)，Caspase-3mRNA的表达上调(P<0.05)，较单独应用THP效果显著(P<0.05)。结论:杏丁有抑制膀胱癌T24细胞裸鼠移植瘤生长的作用，其联合THP后可增强THP对T24细胞裸鼠移植瘤增殖的抑制作用，结果较单独应用THP显著，达到杏丁联合THP用药的增效减毒目的。其分子机制可能与Survivin表达下调、Caspase-3表达上调有关，具体机制仍不明确，有待进一步研究。

全文目录

中文摘要  4-6
ABSTRACT  6-11
前言  11-15
1 实验器材  15-18
  1.1 实验仪器  15-16
  1.2 实验对象及试剂  16
  1.3 试剂的配制  16-18
2 实验方法  18-26
  2.1 细胞复苏、培养、传代、细胞计数及接种  18-20
  2.2 实验动物分组  20-21
  2.3 裸鼠移植瘤体积、瘤重测定及抑瘤率、药物相互作用的计算  21
  2.4 移植瘤组织光镜观察  21-22
  2.5 逆转录聚合酶链反应  22-25
  2.6 琼脂糖凝胶电泳  25
  2.7 统计学处理  25-26
3 实验结果  26-31
  3.1 各组裸鼠移植瘤生长曲线及抑瘤率结果  26-28
  3.2 移植瘤形态学比较  28
  3.3 移植瘤组织Survivin mRNA及caspase-3 mRNA表达的结果  28-31
4 讨论  31-36
5 结论  36-37
参考文献  37-43
综述  43-57
  参考文献  51-57
攻读硕士学位期间发表的论文  57-58
致谢  58-60
附件  60

杏丁联合吡柔比星对膀胱癌T24细胞裸鼠移植瘤的化疗作用及机制研究

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