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高脂血症大鼠主动脉HSP22表达水平及阿托伐他汀干预的影响
作 者: 方海洋
导 师: 吴延庆
学 校: 南昌大学医学院
专 业: 内科学
关键词: 高脂血症 HSP22 TNF-α NF-κB 阿托伐他汀
分类号: R589.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 4次
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内容摘要
目的:建立高脂血症大鼠模型,研究高脂血症大鼠主动脉热休克蛋白22(Heatshock protein22, HSP22)的表达,并观察阿托伐他汀干预的效果。方法:雄性Wistar大鼠(n=30)适应性喂养7天,眼眶后静脉丛采血1ml左右,测定总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、高密度脂蛋白-胆固醇(high density lipoprotein cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白-胆固醇(low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)水平以观察其基础值。随机分为正常对照组(n=10)和高脂模型组(n=20)。正常对照组给予基础饲料,模型组给予高脂饲料并于前3天行维生素D3腹腔注射,续喂养10周,于末次喂饲后采血测定大鼠血脂水平,依据TC水平确定是否建成高脂血症模型。形成高脂模型后,将模型组大鼠随机分为高脂对照组(n=9)和阿托伐他汀干预组(n=9)。正常对照组继续喂饲基础饲料,所有高脂血症大鼠继续喂饲高脂饲料,阿托伐他汀干预组给予阿托伐他汀20mg/kg灌胃,高脂对照组及正常对照组给予等体积生理盐水灌胃,共干预21周。干预结束后,再次采血检测血脂,H.E染色观察主动脉形态学变化,免疫组化检测主动脉血管壁HSP22及炎症因子TNF-α与NF-κB的表达。结果:1.高脂血症大鼠血脂的变化高脂饲料诱导10周后,与正常对照组比较,高脂模型组大鼠血清TC、LDL-C水平均明显升高。升高幅度分别为正常对照组的1.6倍(P<0.05)和1.9倍(P<0.05),而血清TG与HDL-C水平与正常对照组相比则无显著变化,形成了高胆固醇血症。他汀干预结束时,血清TC、LDL-C水平:高脂对照组分别为正常对照组5.2倍(P<0.01)和8.0倍(P<0.01);他汀干预组分别为正常对照组3.6倍(P<0.01)和5.8倍(P<0.01),均显著低于高脂对照组。血清TG水平:与正常对照组相比高脂对照组及他汀干预组均无明显升高(P>0.05)。血清HDL-C水平:他汀干预组为正常对照组的2.1倍(P<0.05);高脂对照组为正常对照组1.9倍(P<0.05)。他汀干预组与高脂对照组相比差异无显著性(P>0.05)。2.大鼠主动脉病理变化正常对照组大鼠胸主动脉和腹主动脉镜下均未见病理改变。高脂对照组大鼠胸主动脉和腹主动脉管腔明显不规则,管壁厚薄不均,内膜部分破坏,中膜层排列紊乱,弹性纤维结构不清,可见明显钙化病变,未见脂质沉积和泡沫细胞聚集,部分可见软骨样细胞增生。他汀干预组大鼠胸主动脉和腹主动脉管腔不明显规则,管壁厚薄不均,内膜、中膜见明显钙化,弹性纤维结构明显不清,部分管壁可见软骨样细胞增生。3.HSP22的表达正常对照组大鼠胸主动脉管壁均未见HSP22阳性表达;高脂对照组大鼠与他汀干预组大鼠胸主动脉管壁可见HSP22阳性表达。他汀干预组光密度平均值明显低于高脂对照组(0.211±0.014vs0.345±0.042,P<0.05)。4.TNF-α与NF-kB的变化正常对照组大鼠胸主动脉中膜和内膜未见TNF-α与NF-κB阳性表达,外膜可见棕黄色着色;高脂对照组与他汀干预组大鼠胸主动脉可见TNF-α与NF-κB阳性着色。他汀干预组TNF-α与NF-κB平均光密度值均明显低于高脂对照组(分别为0.218±0.09vs0.377±0.094,P<0.05;0.200±0.032vs0.363±0.090,P<0.05)。结论:HSP22在高脂血症大鼠主动脉中的表达升高,而阿托伐他汀的干预可降低HSP22表达。
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全文目录
摘要 3-5 ABSTRACT 5-11 第1章 引言 11-13 第2章 材料与方法 13-20 2.1 材料 13-15 2.1.1 实验动物 13 2.1.2 饲料 13 2.1.3 主要试剂与配制 13-14 2.1.4 主要仪器设备 14-15 2.2 方法 15 2.3 指标检测 15-19 2.3.1 血脂测定 15-16 2.3.2 主动脉病理形态学观察 16-18 2.3.3 免疫组化 18-19 2.4 数据处理 19-20 第3章 结果 20-35 3.1 血清脂质变化 20-23 3.1.1 基线值 20 3.1.2 高脂造模期 20 3.1.3 他汀干预期 20-23 3.2 主动脉病理形态学变化 23-27 3.2.1 胸主动脉 HE 染色 23-25 3.2.2 腹主动脉 HE 染色 25-27 3.3 主动脉 HSP22 表达变化 27-30 3.4 主动脉 TNF-α的表达 30-32 3.5 主动脉 NF-κB 的表达 32-35 第4章 讨论 35-40 4.1 血脂代谢异常 35 4.2 高脂环境下主动脉 HSP22 的表达 35-37 4.3 HSP22 与炎症相关因子 TNF-α及 NF-kB 的关系 37-38 4.4 阿托伐他汀干预的影响 38-40 4.4.1 对血脂水平的影响 38 4.4.2 对 HSP22 和炎症相关因子 TNF-α及 NF-kB 表达的影响 38-39 4.4.3 对动脉钙化病变的影响 39-40 第5章 结论与展望 40-41 5.1 结论 40 5.2 本研究的不足及进一步设想 40-41 致谢 41-42 参考文献 42-45 攻读学位期间的研究成果 45-46 综述 46-52 参考文献 50-52
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 代谢病 > 脂肪代谢障碍
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