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P-选择素在血管紧张素Ⅱ诱导的高血压致血管重构中的作用及机制
作 者: 孙旭
导 师: 肖传实
学 校: 山西医科大学
专 业: 心血管内科
关键词: P-选择素 血管紧张素Ⅱ TGF-β1 Smads 血管重构
分类号: R544.1
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
下 载: 4次
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内容摘要
目的:探讨P-选择素在血管紧张素Ⅱ诱导的小鼠高血压模型致血管重构中的作用及可能的机制。方法:(1)模型采用C57BL/6品系P-选择素基因敲除(P-selectin-/-,KO)小鼠,利用血管紧张素Ⅱ微量泵灌注(angiotensinⅡinfusion)建立高血压模型。(2)分组随机分为4组:WT+PBS(|阴性对照组)、P-selectin-/-+PBS空白对照组)、WT+AngⅡ(阳性对照组)、P-selectin-/-+AngⅡ(实验组)。(3)方法用ELISA试剂盒法检测各组小鼠血浆中肿瘤坏死因子α(TNF-a),转化生长因子β1(TGF-β1)的含量;HE染色法测定各组小鼠胸主动脉中膜厚度(midia thickness, MT)、管腔内径(luminal diameter, LD)及MT/LD; Masson染色法观察血管胶原含量变化;实时荧光定量PCR法检测血管组织中TGF β1、 Smad3、Smad7基因的表达水平,用免疫组织化学染色法观察TGF-β1、Smad2/3Smad7蛋白在血管组织的表达。结果:(1)与WT+PBS组比较,WT+AngⅡ组小鼠血浆中TNF-a、TGF-β1的含量显著升高(其中TNF-a升高98%,P<0.001;TGF-β1升高221%,P<0.001);与P-selectin-/-+AngⅡ组比较,WT+Ang组小鼠血浆中TNF-a、TGF-β1的含量升高亦明显,(其中TNF-a升高92%,P<0.001;TGF-β1升高212%,P<0.001);与P-selectin-/-+PBS组比较,P-selectin-/-+AngⅡ组小鼠血浆中TNF-a、TGF-β1的含量升高(其中TNF-a升高35%,P<0.01;TGF-β1升高28%,P<0.05),但不如前两者升高显著。(2)与WT+PBS组比较,WT+AngⅡ组小鼠胸主动脉MT、MT/LD的值明显升高(其中MT值升高56%,P<0.001;MT/LD的值升高50%,P<0.001);与P-selectin-/-+AngⅡ组比较,WT+Ang Ⅱ组小鼠胸主动脉MT> MT/LD的值亦明显升高(其中MT值升高69%,P<0.001; MT/LD的值升高59%,P<0.001)。(3)与WT+PBS组比较,WT+AngⅡ组小鼠胸主动脉胶原含量升高98%(P<0.001);与P-selectin-/-+AngⅡ组比较,WT+AngⅡ组小鼠胸主动脉胶原含量升高94%(P<0.001)。(4)与WT+PBS组比较,WT+AngⅡ组小鼠胸主动脉TGF-(Smad3基因的表达显著升高(其中TGF-β1的表达升高97%,P<0.001;Smad3的表达升高79%,P<0.001);与P-selectin-/-+AngⅡ组比较,WT+AngⅡ组小鼠胸主动脉TGF-β1、Smad3基因的表达升高亦明显,(其TGF-β1的表达升高114%,P<0.001;Smad3的表达升高93%,P<0.001);与P-selectin-/-+PBS组比较,WT+PBS组小鼠胸主动脉TGF-β1、Smad3基因的表达升高(其中TGF-β1的表达升高19%,P<0.01:Smad3的表达升高25%,P<0.01),但不如前两者升高显著;与WT+PBS组比较, WT+AngⅡ组Smad7基因的表达水平降低98%(P<0.05);与P-selectin-/-+Ang ⅡII组比较,WT+AngⅡ组Smad7基因的表达水平降低78%(P<0.05);与P-selectin-/-+PBS组比较,P-selectin-/-+AngII组Smad7基因的表达水平降低45%(P<0.05)。(5)各组小鼠胸主动脉TGF-β1、Smad3、Smad7蛋白的表达水平与其基因的表达水平基本一致。结论:(1)P-选择索与AngⅡ协同素促进血浆中炎症因子TNF-α以及TGF-β1的表达。(2) AngⅡ通过P-选择素的致炎作用加重血管形态学的变化。(3)P-selectin通过上调TGF-β1、Smad3mRNA和蛋白的表达水平,加强TGF-β1、Smads信号通路的正反馈路径促进血管的重构,AngⅡ发挥协同作用。(4)Smad7在P-选择素致血管重构中可能不起作用,而在AngⅡ致血管重构中发挥一定的作用。
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全文目录
缩略语表 5-6 中文摘要 6-9 Abstract 9-12 前言 12-13 材料与方法 13-22 1. 实验材料 13-16 2. 实验方法 16-22 结果 22-26 讨论 26-29 结论 29-30 参考文献 30-33 附图 33-45 综述 45-53 参考文献 50-53 个人简介 53-55 致谢 55
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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 心脏、血管(循环系)疾病 > 血压异常 > 高血压
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