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龙血素B对棕榈酸引起的胰岛β细胞功能损伤的保护作用初探

作　者: 宋英
导　师: 徐勤
学　校: 桂林医学院
专　业: 病理学与病理生理学
关键词: 龙血素B 糖尿病 NIT-1 氧化应激
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：以棕榈酸体外培养胰岛β细胞（NIT-1细胞）模拟体内氧化应激导致的血糖和血脂代谢障碍产生的内环境改变，用龙血素B对棕榈酸造成的NIT-1细胞的损伤进行干预，初步探讨龙血素B对棕榈酸培养环境下NIT-1细胞的抗氧化保护作用及其机制。方法：以小鼠胰岛β细胞系NIT-1细胞作为实验细胞。实验分为空白对照组，5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L的龙血素B对照组，棕榈酸组，5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L的龙血素B干预组。用四甲基偶氮唑盐（MTT）法检测细胞活性，流式细胞术检测细胞内活性氧自由基（ROS）含量和细胞早期凋亡率，RT-PCR技术检测葡萄糖转运受体-2（GLUT-2）编码基因表达水平。结果：和棕榈酸组比较，10μmol/L和20μmol/L的龙血素B可以使NIT-1细胞活性存活率显著上升（p＜0.05）。5μmol/L、10μmol/L和20μmol/L的龙血素B均可显著降低细胞活性氧含量和细胞早期凋亡率（p＜0.05）。20μmol/L的龙血素B可以提高GLUT-2编码基因的表达水平（p＜0.05），5μmol/L和10μmol/L的龙血素B对GLUT-2编码基因的表达水平无明显影响（p＞0.05）。结论：棕榈酸可以使细胞内活性氧自由基（ROS）增多，导致细胞产生氧化应激，使细胞凋亡率增加，抑制NIT-1细胞的增殖，并导致细胞内与糖代谢相关基因GLUT-2的相对表达量降低，从而影响细胞糖代谢。龙血素B可以提高体外棕榈酸培养环境下的NIT-1细胞活性存活率，降低NIT-1细胞内ROS水平，减少游离脂肪酸引起的NIT-1细胞早期凋亡。20μmol/L的龙血素B可显著上调受抑制的GLUT-2编码基因表达，其机制可能是通过降低细胞内ROS含量，降低细胞氧化应激水平，减少游离脂肪酸引起的NIT-1细胞早期凋亡，对NIT-1细胞起保护作用。

全文目录

中文摘要  5-7
ABSTRACT  7-9
英汉缩略词对照表  9-11
前言  11-14
1 材料与方法  14-34
  1.1 实验材料与仪器  14
  1.2 主要实验试剂  14-18
  1.3 主要实验仪器  18-20
  1.4 应用软件  20
  1.5 实验方法  20-34
2 实验结果  34-44
  2.1 NIT-1 小鼠胰岛β细胞瘤培养  34
  2.2 龙血素 B 对棕榈酸诱导的 NIT-1 细胞凋亡的活性影响  34-35
  2.3 龙血素 B 对棕榈酸培养环境中 NIT-1 细胞内活性氧（ROS）含量的影响  35-38
  2.4 龙血素 B 对棕榈酸培养环境中 NIT-1 细胞早期凋亡率的影响  38-41
  2.5 龙血素 B 对棕榈酸培养环境中的 NIT-1 细胞 GLUT-2 基因表达量的影响  41-44
3 讨论  44-48
  3.1 棕榈酸致胰岛β细胞氧化应激损伤细胞模型的建立  44-45
  3.2 龙血素 B 的抗氧化作用对 NIT-1 细胞活性和细胞内活性氧自由基含量的影响  45
  3.3 龙血素 B 的抗氧化作用对 NIT-1 细胞早期凋亡和糖代谢相关基因表达水平的影响  45-46
  3.4 龙血素 B 对 NIT-1 细胞的作用总结和讨论  46-48
4 结论  48-49
参考文献  49-52
综述  52-61
  参考文献  58-61
攻读学位期间发表的学术论文目录  61-62
致谢  62-64
桂林医学院硕士研究生学位论文答辩资格审查表  64

龙血素B对棕榈酸引起的胰岛β细胞功能损伤的保护作用初探

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