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生物除草剂敌散克（Disancu）产业化关键技术的再改进

作　者: 卢玉霞
导　师: 强胜；戴伟民
学　校: 南京农业大学
专　业: 植物学
关键词: 生物除草剂菌株QZ-2000 马唐常压灭菌有机酸微囊剂
分类号: S482.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

敌散克(Disancu)是利用马唐致病型菌株画眉草弯孢霉(Curvularia eragrostidis)QZ-2000发展的生物除草剂,其主要生物活性成分为QZ-2000的分生孢子。前期研究表明QZ-2000对马唐、千金子、稗草等禾本科杂草的致病力强,对玉米、大豆等主要农作物安全,易于工业化生产,且具有自主知识产权。因此,具有开发成商品化生物除草剂的良好前景。本文在前期的研究基础上对QZ-2000分生孢子的大批量生产、敌散克的配方和剂型等关键技术进行了改进,为将来敌散克的产业化和推广应用提供一定的理论基础和技术支持。QZ-2000需要在无菌条件下进行培养及分生孢子生产,用常压灭菌替代高压灭菌,能够降低生物除草剂的大批量的生产对生产设备的要求,从而降低成本。在设计25min到65min间隔10min的处理梯度的试验研究,发现随着灭菌时间的延长对QZ-2000菌落生长大小及生长状况、产孢量、孢子萌发率、孢子致病力均有显著促进作用,在45min以上时,这种效应趋于最大。因此,综合考虑成本和效果,最终确定了常压灭菌45mmin,可进行实际生产。敌散克生物除草剂需要与化学除草剂复配才能发挥良好的除草效果,利用有机酸复配可以替代低量化学除草剂,使产品完全有机化。通过草酸、乙酸与孢子的相容性试验,结果表明8750ppm及其以下浓度的草酸与孢子复配的孢子萌发率为72.86%或更高,8000ppm及其以下浓度的乙酸复配孢子的萌发率达到50%以上。进一步进行了不同有机酸浓度梯度的小杯和盆钵的除草活性试验,结果表明,1000ppm-4000ppm草酸与孢子的复配剂在14天后对马唐的株防效分别在80%和70%以下,但是8000ppm草酸与孢子的复配剂防效在90%和70%以上；1000ppm-4000ppm乙酸与孢子的复配剂在14天后对马唐的株防效分别在72%和70%以下,8000ppm乙酸与孢子的复配剂防效在90%和60%以上。有机酸与孢子复配具有明显增效作用,可用于田间防除试验。继而进行了敌散克与有机酸复配田间控草的试验,结果显示在小区和大田试验中草酸浓度为1000ppm-4000ppm时马唐第四周防效在60%和71%以下,当草酸浓度为8000ppm时,小区和大田试验的8000ppm草酸与孢子的复配剂第四周防效分别在70%和80%以上,复配剂增效明显；乙酸浓度为1000ppm-4000ppm时马唐第四周防效在60%和65%以下,但8000ppm乙酸复配剂防效在65%和70%以上。综合考虑成本、效果等因素最终确定有机酸浓度为8000ppm在田间达到较好的控草效果,有一定的应用价值。前期研制的敌散克油包水剂型实际应用中操作不便利且效果不稳定。利用复合凝聚法制备的微囊剂可克服这些问题。研究了制备QZ-2000微囊剂的方法,确定了助剂添加—搅拌—酸化—冷冻干燥工艺流程,筛选出水油质量比为1：1.67,明胶、阿拉伯树胶浓度为2%,卵磷脂浓度为油质量的10%的助剂配比,微囊剂成型受搅拌和酸化时间影响。微囊剂的孢子萌发率、致病率测定也表明其有利于保持较强致病力。结果表明,在离体叶片实验中,孢子浓度为6x105个/ml及以上时,致病率达93%以上。小杯实验中,孢子浓度为1x106个/ml时孢子对马唐的株防效为82.3%。盆钵实验中,1000ppm-4000ppm有机酸与微囊剂复配株防效和鲜重防效分别为70%和85%以下,而6000ppm-8000ppm的复配剂株防效和鲜重防效分别约为80%和90%以上1000ppm-8000ppm的乙酸复配剂的防效均在60%以下。综上所述,一个合适的配方剂型,可以在一定程度上克服生物除草剂对湿度的依赖性。将有机酸与生物除草剂相结合,则可以提高生物除草剂的控草效果。将生物除草剂制成微囊剂,能够提高药效,提高生物除草剂的稳定性,并延长持效期。

全文目录

摘要  7-9
ABSTRACT  9-12
前言  12-14
第一章文献综述  14-28
  摘要  14
  ABSTRACT  14
  1 生物除草剂  14-24
    1.1 生物除草剂的优点  14-15
    1.2 已经商品化的生物除草剂  15-16
    1.3 生物除草剂的剂型的研究  16-19
    1.4 生物除草剂的配方的研究  19-24
  2 有关弯孢霉属真菌的研究  24-28
第二章常压灭菌大批量生产弯孢霉菌株QZ-2000的分生孢子的研究  28-36
  摘要  28
  ABSTRACT  28-29
  1 材料和方法  29-31
    1.1 供试材料  29
    1.2 仪器  29
    1.3 基质的常压灭菌  29
    1.4 分生孢子粉的获取  29-30
    1.5 不同常压灭菌时间产孢量的测定  30
    1.6 孢子萌发率的检测  30
    1.7 孢子致病力的检测  30-31
    1.8 数据统计与分析  31
  2 结果与分析  31-35
    2.1 不同常压灭菌时间对画眉草弯孢霉菌株QZ-2000的菌丝生长的影响  31-32
    2.2 不同常压灭菌时间QZ-2000产孢量的测定  32-33
    2.3 不同常压灭菌时间对QZ-2000孢子萌发率的影响  33
    2.4 不同常压灭菌时间对QZ-2000分生孢子致病性的影响  33-35
  3 讨论  35-36
第三章有机酸与画眉草弯孢霉QZ-2000孢子复配的研究  36-56
  摘要  36
  ABSTRACT  36-37
  1 材料与方法  37-40
    1.1 供试材料与试剂  37-38
    1.2 有机酸的初筛  38
    1.3 有机酸的进一步筛选  38
    1.4 有机酸对QZ-2000孢子萌发率的测定  38
    1.5 有机酸对QZ-2000孢子致病性的测定  38-39
    1.6 病情指数防效分级  39
    1.7 数据统计与分析  39-40
  2 结果与分析  40-54
    2.1 有机酸对分生孢子萌发的影响  40
    2.2 有机酸对分生孢子致病性的影响  40-43
    2.3 有机酸复配的进一步筛选  43-54
  3 讨论  54-56
第四章有机酸与画眉草弯孢霉菌QZ-2000孢子复配的田间控草技术研究  56-70
  摘要  56
  ABSTRACT  56
  1 材料与方法  56-58
    1.1 供试材料  56-57
    1.2 防除马唐的田间实验  57-58
  2 结果与分析  58-67
    2.1 2012年7月份小区实验结果  58-60
    2.2 2012年9月份小区实验  60-62
    2.3 2012年6月到9月份大田试验  62-67
  3 讨论  67-70
第五章画眉草弯孢霉菌QZ-2000新剂型微囊剂的研究  70-84
  摘要  70
  ABSTRACT  70-71
  1 材料与方法  71-74
    1.1 试剂与材料  71
    1.2 仪器  71-72
    1.3 复合凝聚法制作微囊剂的操作步骤  72
    1.4 微囊剂包封率的测定  72
    1.5 复合凝聚法制备QZ-2000微囊剂的条件的研究  72-73
    1.6 微囊剂的粒径测量方法  73
    1.7 画眉草弯孢霉菌QZ-2000微囊剂分散悬浮性能的测定  73
    1.8 微囊剂润湿性能的测定  73
    1.9 QZ-2000微囊剂致病力的测定  73-74
    1.10 QZ-2000微囊剂小杯实验  74
    1.11 数据统计与分析  74
  2 结果与分析  74-81
    2.1 复合凝聚法制备QZ-2000微囊剂的条件的研究  74-77
    2.2 画眉草弯孢霉菌QZ-2000微囊剂分散悬浮率性能的测定  77
    2.3 画眉草弯孢霉菌QZ-2000微囊剂润湿时间的测定  77-78
    2.4 微囊剂萌发率的测定  78
    2.5 QZ-2000微囊剂致病力的测定  78-81
  3 讨论  81-84
全文讨论  84-86
参考文献  86-94
致谢  94

生物除草剂敌散克（Disancu）产业化关键技术的再改进

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