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蕨菜多糖的提取、分离纯化及结构研究

作　者: 居先艳
导　师: 王奎武
学　校: 浙江工商大学
专　业: 食品科学与工程
关键词: 蕨菜 多糖 响应面 提取 分离纯化 结构分析
分类号: TS255.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要


天然多糖具有抗病毒、抗肿瘤、降血糖、降血脂和提高免疫等功能。蕨菜是可食用蕨类植物的统称,在我国分布广泛,其作为一种药食两用的野生植物在食品、保健品和药品等领域有着很大的应用前景。因此研究蕨菜多糖具有理论意义和实际价值。本文从提取、分离纯化和结构这三方面对蕨菜多糖进行研究,主要结果如下：1、采用单因素实验及响应面分析法得到了蕨菜多糖的最佳提取工艺条件为：提取温度为90℃,提取时间为3.2h,液固比为22：1,提取3次,提取率为14.02%。2、蕨菜粗多糖经脱蛋白、DEAE Sepharose Fast Flow纤维素柱和Sepharose4B凝胶柱层析得到三种均一多糖组分,命名为PLP-1、PLP-2和PLP-3。通过高效液相凝胶渗透色谱法测定PLP-1、PLP-2和PLP-3的分子量,分别为1.35×105Da、6.13×105Da。3、通过红外光谱分析多糖的特征官能团、酸水解分析单糖组成以及主链与支链的单糖分布、高碘酸氧化和Smith降解分析糖苷键的类型再结合甲基化以及核磁(1H,13C)可知PLP-1、PLP-2和PLP-3糖链的结构：PLP-1是由1→3,6、1→4,6、1→4、1→6、1→2和非还原末端残基六种糖苷键链接而成,其主链主要是由半乳糖以1→4糖苷键构成,还含有少量以1→3,6糖苷键链接的甘露糖；支链可能有→2)-β-D-Xy1p-(1→,支链可能的末端残基为α-D-Glcp和α-D-Manp。PLP-2是由1→3,6、1→5、1→6和非还原末端残基四种糖苷键链接而成,其主链主要是由半乳糖以1→6糖苷键构成；支链可能的重复单元为→5)-α-L-Araf-(1→,支链可能的末端残基为α-L-Araf和α-L-Fucp。PLP-3是由1→3,6、1→5、1→6和非还原末端残基四种糖苷键链接而成,其主链主要是由甘露糖以1→6糖苷键构成,还含有少量以1→3,6糖苷键链接的半乳糖；支链可能的重复单元为→6)-α-D-Galp-(1→,支链可能含有→2)-β-D-Xylp-(1→,支链可能的末端残基为α-D-Manp和-L-Fucp。PLP-1的基本结构为：PLP-2的基本结构为：

全文目录


摘要  3-6
ABSTRACT  6-12
第1章 引言  12-24
  1.1 蕨菜简介  12
  1.2 多糖的概述  12-22
    1.2.1 多糖的提取  13-16
    1.2.2 多糖的分离和纯化  16-17
    1.2.3 多糖的纯度验证  17-18
    1.2.4 多糖的分子量测定  18
    1.2.5 多糖的结构鉴定  18-21
    1.2.6 多糖的生物活性  21-22
  1.3 研究背景及意义  22-23
  1.4 研究内容与方法  23-24
第2章 蕨菜多糖的提取工艺  24-40
  2.1 材料与仪器  24-26
    2.1.1 原料  24
    2.1.2 主要试剂  24-25
    2.1.3 主要仪器  25-26
  2.2 实验方法  26-29
    2.2.1 原料的预处理  26
    2.2.2 粗多糖提取的工艺流程  26
    2.2.3. 总糖含量的测定——苯酚硫酸法  26-27
    2.2.4 还原糖含量的测定——3,5-二硝基水杨酸法  27-28
    2.2.5 多糖提取率的计算方法  28
    2.2.6 多糖提取率的单因素实验  28-29
    2.2.7 多糖提取率的响应面实验  29
    2.2.8 数据分析  29
  2.3 实验结果与讨论  29-38
    2.3.1 总糖标准曲线的建立及蕨菜粗多糖中其含量的测定  29-30
    2.3.2 还原糖标准曲线的建立及蕨菜粗多糖中其含量的测定  30-31
    2.3.3 多糖提取率的单因素实验结果分析  31-34
    2.3.4 多糖提取率的响应面实验  34-38
  2.4 本章小结  38-40
第3章 蕨菜多糖的分离纯化  40-52
  3.1 材料与仪器  40-42
    3.1.1 原料  40
    3.1.2 主要试剂  40-41
    3.1.3 主要仪器  41-42
  3.2 实验方法  42-45
    3.2.1 蕨菜粗多糖的分离纯化  42-44
    3.2.2 蕨菜均一多糖的纯度鉴定及其相对分子量的测定  44-45
  3.3 实验结果和讨论  45-51
    3.3.1 蕨菜多糖的分离纯化  45-47
    3.3.2 蕨菜均一多糖的纯度鉴定及其相对分子量的测定  47-51
  3.4 本章小结  51-52
第4章 蕨菜多糖的结构研究  52-84
  4.1 材料与仪器  52-55
    4.1.1 原料  52-53
    4.1.2 主要试剂  53-54
    4.1.3 主要仪器  54-55
  4.2 实验方法  55-58
    4.2.1 蕨菜均一多糖红外光谱分析  55
    4.2.2 蕨菜均一多糖单糖组成分析  55-56
    4.2.3 蕨菜均一多糖的部分酸水解  56
    4.2.4 蕨菜均一多糖的高碘酸氧化以及Smith降解  56-57
    4.2.5 蕨菜均一多糖的甲基化分析  57-58
    4.2.6 蕨菜均一多糖的核磁共振分析  58
  4.3 实验结果与讨论  58-82
    4.3.1 蕨菜均一多糖的红外光谱结果分析  58-59
    4.3.2 蕨菜均一多糖的单糖组成结果分析  59-62
    4.3.3 蕨菜均一多糖的部分酸水解结果分析  62-65
    4.3.4 蕨菜均一多糖的高碘酸氧化和Smith降解结果分析  65-71
    4.3.5 蕨菜均一多糖的甲基化分析结果  71-75
    4.3.6 蕨菜均一多糖的核磁共振分析  75-82
  4.4 本章小结  82-84
第5章 结论与创新  84-86
  5.1 结论  84-85
  5.2 创新点  85-86
参考文献  86-93
附录 研究生期间所发表的论文  93-94
致谢  94-95

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中图分类: > 工业技术 > 轻工业、手工业 > 食品工业 > 水果、蔬菜、坚果加工工业 > 基础科学
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