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硼替佐米对内皮细胞的细胞毒性效应和细胞迁移的影响

作　者: 薛雷喜
导　师: 阮长耿
学　校: 苏州大学
专　业: 内科学
关键词: 硼替佐米 细胞毒性效应 细胞迁移 VEGF Annexin A2 HIF-1α
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


1.硼替佐米对微血管内皮细胞株HMEC-1的细胞毒性效应和细胞迁移的影响目的观察0、2.5、5.0、10nmol/L硼替佐米对内皮细胞株HMEC-1的细胞毒性效应和细胞迁移的影响。方法细胞计数试剂盒CCK-8检测细胞的相对增殖活力;AnnexinV/PI双标法检测细胞的凋亡率;采用Transwell模型观察细胞迁移率的改变;结果2.5、5.0nmol/L浓度硼替佐米作用12h,对HMEC-1细胞增殖无明显抑制作用,10nmol/L时细胞增殖活力为0.874±0.062(P=0.024,对照组细胞增殖活力设为1.0);24h、48h时,硼替佐米表现了更强的细胞增殖抑制效应,10nmol/L时细胞增殖活力分别为0.635±0.030、0.164±0.009(P<0.0001)。2.5、5.0、10nmol/L浓度硼替佐米分别作用细胞12h时,细胞凋亡率分别为2.0%、1.6%、2.7%,与对照组(3.5%)无明显差异,而10nmol/L浓度硼替佐米作用细胞24h时,细胞凋亡率为18.1%。2.5、5.0、10nmol/L硼替佐米作用12h均明显降低了细胞的迁移率(P<0.05)。结论较高浓度、较长时间的硼替佐米对微血管内皮细胞株HMEC-1表现出一定的细胞毒性效应;同时硼替佐米可有效抑制HMEC-1的迁移,并且其对迁移的抑制作用早于细胞毒性效应的出现。2.硼替佐米抑制微血管内皮细胞株HMEC-1迁移的机制探讨目的观察0、2.5、5.0、10nmol/L硼替佐米作用内皮细胞株HMEC-1 12h后,血管新生相关分子VEGF及Annexin A2表达的变化,以探讨硼替佐米抑制细胞迁移的可能机制;并观察HIF-1α的转录调节活性的变化,分析VEGF表达变化可能的机制。方法实时定量PCR检测Annexin A2、VEGF的基因表达水平,Western印迹法观察Annexin A2在蛋白水平的变化;逆转录PCR(RT-PCR)检测HIF-1α转录调节活性指标CAIX基因表达的水平。结果2.5、5.0、10nmol/L硼替佐米作用内皮细胞株HMEC-1 12h后,均明显抑制了Annexin A2和VEGF基因的表达(P<0.05), Western印迹同样显示Annexin A2在蛋白水平的表达下调,RT-PCR结果表明硼替佐米同样抑制了HIF-1α的转录调节活性的标志基因——CAIX基因的表达。结论硼替佐米可通过下调Annexin A2和VEGF的表达,从而抑制内皮细胞株HMEC-1的迁移;VEGF基因表达的下调,可能与HIF-1α转录调节活性的降低有关。

全文目录


中文摘要  4-6
Abstract  6-9
引言  9-12
第一部分 硼替佐米对微血管内皮细胞株 HMEC-1 的细胞毒性效应和细胞迁移的影响  12-21
  研究对象与方法  12-14
  结果  14-18
  讨论  18-20
  参考文献  20-21
第二部分 硼替佐米抑制微血管内皮细胞株HMEC-1 迁移的机制探讨  21-30
  研究对象与方法  21-23
  结果  23-25
  讨论  25-28
  参考文献  28-30
结论  30-31
综述  31-48
  参考文献  39-48
攻读学位期间公开发表的论文  48-49
致谢  49-50

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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药理学 > 实验药理学
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