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崖豆藤属植物种质资源及其红外光谱比较研究
作 者: 罗应怡
导 师: 黄荣韶
学 校: 广西大学
专 业: 植物学
关键词: 崖豆藤属植物 种质资源 红外光谱 比较研究
分类号: Q948
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
崖豆藤属植物种质资源比较丰富,在药材应用方面越来越广泛,但对其种质鉴别的研究较少。在崖豆藤属植物中,美丽崖豆藤,即牛大力,是南方道地药材,近些年市场对其需求量越来越大,野生资源逐渐匮乏,且人工栽培甚少,市场上其它崖豆藤属植物的参杂现象和药材质量等问题随之而来。本研究对收集到的崖豆藤属植物种质资源进行生物学性状比较,开展ISSR分析与评价,并对不同种质的崖豆藤属植物进行红外光谱整体分析与评价。主要研究结果如下:1.不同种崖豆藤属植物的主要相同点有:互生的奇数羽状复叶;没有偶数叶,没有对生的复叶,只有对生的小叶和托叶;小叶都具有一对托叶等。美丽崖豆藤区别于其它种质崖豆藤属植物的叶部特征为叶面、叶背和叶柄的被毛较多,小叶的长、宽、厚及叶柄长在平均数值上较大,叶子的折干率高于其它崖豆藤属植物叶子的折干率;根部特征为主根较长,较大,表皮较粗糙。2.经过改良的CTAB法可以快速提取量多、质好的崖豆藤属植物基因组DNA。使用多态性高、重复性好的9条引物对崖豆藤属植物基因组DNA进行ISSR-PCR扩增,共扩增出119条带,多态性条带总数为107条,多态性条带总百分率为89.9%。3.美丽崖豆藤与广东崖豆藤、网络崖豆藤的遗传距离比较大,遗传相似系数较小;广东崖豆藤与网络崖豆藤的遗传距离也较大,遗传相似系数较小。在ISSR聚类分析图中0.82处作结合线,可以将不同崖豆藤属植物材料划分为6个类群,可将美丽崖豆藤与其它种崖豆藤属植物区别开。4.红外光谱分析表明:不同崖豆藤属植物的根、茎、叶具有很多相同的红外光谱特征,如在3377cm-1,2925cm-1、1634cm-1、1033cm-1、572cm-1等处附近都具有吸收峰,表明都具有醇类或酚类、多糖、蛋白质、脂类、黄酮类、胺类、有机卤化物等成分;同时也具有许多差异之处,如美丽崖豆藤根部在1865cm-1、1009cm-1等处有特征吸收峰,茎部在1660cm-1、1028cm-1等处有特征吸收峰,叶部在1952cm-1、1049cm-1、473cm-1等处有特征吸收峰。
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全文目录
摘要 4-5 ABSTRACT 5-9 1 前言 9-16 1.1 崖豆藤属植物 9-12 1.1.1 广东崖豆藤 9 1.1.2 网络崖豆藤 9 1.1.3 香花崖豆藤 9-10 1.1.4 美丽崖豆藤 10-12 1.2 分子标记技术概述 12-13 1.2.1 ISSR分子标记 13 1.2.2 ISSR分子标记在药材研究中的应用 13 1.3 红外光谱在药材研究中的应用 13-14 1.3.1 红外光谱在中药真伪鉴别方面的应用 13-14 1.3.2 红外光谱在药材化学成分分析方面的应用 14 1.3.3 红外光谱在药材成分半定量分析方面的应用 14 1.3.4 红外光谱在崖豆藤属植物研究中的应用 14 1.4 本研究的目的及意义 14-15 1.5 本研究的技术路线 15-16 2 材料与方法 16-23 2.1 材料 16-18 2.1.1 试验材料来源 16-17 2.1.2 材料和样品处理 17-18 2.2 主要试剂和仪器 18-19 2.2.1 主要试剂 18 2.2.2 主要仪器 18-19 2.3 试验方法 19-23 2.3.1 生物学性状比较 19 2.3.2 提取纯化基因组DNA方法 19-20 2.3.3 ISSR试验分析方法 20-21 2.3.4 ISSR-PCR试验数据记录与处理 21 2.3.5 FTIR红外光谱的测定 21-23 3 结果与分析 23-61 3.1 生物学性状比较 23-28 3.1.1 形态特征比较 23-28 3.1.2 折干率比较 28 3.2 ISSR分子标记结果与分析 28-39 3.2.1 4种方法提取基因组DNA 28-30 3.2.2 改良CTAB法提取崖豆藤属植物基因组DNA 30-31 3.2.3 ISSR-PCR扩增结果 31-35 3.2.4 ISSR多态性分析 35-36 3.2.5 遗传相似系数及遗传距离 36-38 3.2.6 亲缘关系和聚类分析 38-39 3.3 红外光谱分析 39-61 3.3.1 崖豆藤属植物间红外光谱分析 39-49 3.3.2 美丽崖豆藤不同部位红外光谱分析 49-54 3.3.3 网络崖豆藤不同部位红外光谱分析 54-59 3.3.4 广东崖豆藤不同部位红外光谱分析 59-61 4 结论与讨论 61-65 4.1 结论 61-62 4.2 讨论 62-65 4.2.1 关于崖豆藤属植物的生物学性状 62 4.2.2 崖豆藤属植物的基因组DNA提取方法 62-63 4.2.3 ISSR-PCR扩增反应条件的优化 63 4.2.4 崖豆藤属植物的红外光谱特征及鉴别 63-65 5 研究中的问题与展望 65-66 致谢 66-67 参考文献 67-73 附录 73
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中图分类: > 生物科学 > 植物学 > 植物生态学和植物地理学
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