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HCV刺激鼠小胶质细胞后TLR7和细胞因子的表达研究

作　者: 赵莉
导　师: 王振海
学　校: 宁夏医科大学
专　业: 神经病学
关键词: Toll样受体7 丙型肝炎病毒小胶质细胞白介素6 肿瘤坏死因子-α 干扰素-α
分类号: R329
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的研究HCV阳性血清刺激小鼠小胶质细胞BV2(BV2细胞)后,BV2细胞内TLR7的表达变化,及其信号通路介导的细胞因子IL-6、TNF-α和IFN-α的表达变化,探讨TLR7在抗HCV免疫应答中的作用机制和对中枢神经系统可能的免疫发病机制。方法用含20%HCV的阳性血清刺激BV2细胞,在刺激后不同时间点收集细胞及培养上清液,应用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、间接免疫荧光标记的流式细胞术(FCM)及酶联免疫吸附法(ELISA)分别检测TLR7 mRNA、TLR7蛋白及IL-6、TNF-α和IFN-α的表达水平,同时设空白对照组和正常人血清组。多组均数间的比较采用方差分析。结果在BV2细胞中有TLR7 mRNA和TLR7蛋白的表达;HCV刺激BV2细胞后,可诱导TLR7 mRNA和TLR7蛋白表达水平升高,12h、24 h、48 h HCV阳性血清组较空白组及正常人血清组比较差异有统计学意义(P<0.05);我们还观察到TLR7 mRNA和TLR7蛋白随时间延长呈递增趋势,HCV阳性血清组培养上清液中IL-6、TNF-α的表达也呈递增趋势,IL-6在刺激后48 h与正常人血清组及空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),TNF-α在刺激后24 h、48 h时与正常人血清组及空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05),IFN-α在在刺激24 h后表达低水平增高(P<0.05),但持续时间较短。结论HCV阳性血清刺激BV2细胞后,细胞胞体增大,表面的突起变短、增粗;TLR7表达显著升高,TLR7激活后能够启动BV2细胞的固有免疫反应;IL-6和TNF-α变化趋势与TLR7一致,IFN-α在HCV阳性血清刺激后24小时短时间增高;表明TLR7可能在HCV导致的CNS的发病中发挥重要作用。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-11
前言  11-15
材料与方法  15-25
结果  25-33
讨论  33-39
结论  39-40
参考文献  40-45
文献综述  45-56
  综述参考文献  52-56
致谢  56-57
攻读硕士学位期间发表的学术论文  57-58
个人简介  58

HCV刺激鼠小胶质细胞后TLR7和细胞因子的表达研究

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