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粘质沙雷氏杆菌产灵菌红素调控因子的初步研究
作 者: 刘琦
导 师: 田晋红
学 校: 西南大学
专 业: 药物分析学
关键词: 粘质沙雷氏杆菌 灵菌红素 调控
分类号: R917
类 型: 硕士论文
年 份: 2013年
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内容摘要
本课题基于文献报导和实验室的前期实验结果均显示花生培养基能显著增加粘质沙雷氏杆菌产灵菌红素的产量,以1%蛋白胨,3%吐温-80,0.2%KCl作为基础培养基,通过在该培养基中添加不同的单因子进行实验,以细菌数和PG产量为检测指标,目的在于从花生成分中找出某一种单体物质是显著提高PG产量的关键因子,并对能影响粘质沙雷氏杆菌产PG的其它因子(如葡萄糖、氨基酸、无机盐、培养条件)的作用进行研究,再探索它们的调控机制。实验结果如下:1)花生成分中关键因子的探寻及调控机制花生油能促进细菌的生长和PG的合成;而花生油中的游离脂肪酸均起下调作用;三油酸甘油酯是花生培养基中增加PG产量的关键调控因子;其作用①作为优质碳源促使粘质沙雷氏杆菌的大量生长和PG产量的提高。②作为表面活性剂改变细菌细胞膜的通透性,促使PG从胞内释放到胞外。2)葡萄糖的作用0.4%葡萄糖能作为碳源促进粘质沙雷氏杆菌的生长和PG产量的提高,与不添加葡萄糖组相比能缩短初始产PG的发酵周期约12h,添加浓度超过2%时PG的合成完全受到抑制,存在葡萄糖效应。3)金属离子的作用①0.1%NaCl对细菌数和PG的产量起到显著的抑制作用;0.2%KC1能为细菌提供适宜的渗透压促进细菌的生长和PG的合成。②0.1%MgCl2作为PG合成过程中酶的激动剂起上调作用;0.05%CaCl2可完全抑制PG的合成。③Fe2+、Zn2+、Fe3+三种金属离子的加入对菌数均无影响;0.1%Fe2+使PG的产量锐减;0.05%Zn2+完全抑制PG的生成;0.005%Fe3+即使PG的产量下降,但PG的减少幅度与Fe3+浓度基本无关。4)氨基酸的作用1%脯氨酸能作为PG生物合成途径中其中一个吡咯环的前体物质来增加PG的产量:0.5%甘氨酸和0.05%丝氨酸下调作用显著。5)培养条件的作用避光培养有利于细菌的生长也避免了PG长时间光照发生分解来提高了PG产量;最佳pH6.0,最适装液量为50ml(250ml);0.05%CaO2在培养基中能为细菌持续供氧且溶于水后的水解产物Ca(OH)2能改善发酵液pH值,有利于细菌的生长和PG产量的提高。通过本次实验,不仅从花生中找出三油酸甘油酯这种单体是花生培养基促使粘质沙雷氏杆菌大量增产PG的主要因子,并得出其调控机制①作为优质碳源促使细菌大量生长和PG产量的提高②作为表面活性剂改变细菌细胞膜的通透性,促使PG从胞内释放到胞外。结合其它调控因子的影响进行分析,最终得出碳源、表面活性剂和培养基中的溶氧对粘质沙雷氏杆菌产PG的影响较大。
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全文目录
摘要 4-6 ABSTRACT 6-8 第一章 文献综述 8-15 1.1 灵菌红素概述 8 1.2 灵菌红素理化性质 8 1.3 灵菌红素的生物活性 8-11 1.4 灵菌红素合成机理研究 11-13 1.5 灵菌红素的生产现状 13-15 第二章 引言 15-16 2.1 研究意义及目的 15 2.2 研究内容 15 2.3 实验方案 15-16 第三章 花生成分中的调控因子研究 16-27 3.1 材料 16-17 3.2 方法 17-18 3.3 结果分析与讨论 18-26 3.4 本章小结 26-27 第四章 葡萄糖的调控作用 27-32 4.1 材料 27 4.2 方法 27-28 4.3 结果分析与讨论 28-31 4.4 本章小结 31-32 第五章 无机盐的调控作用 32-38 5.1 材料 32 5.2 方法 32-33 5.3 结果分析与讨论 33-37 5.4 本章小结 37-38 第六章 氨基酸的调控作用 38-42 6.1 材料 38 6.2 方法 38-39 6.3 结果分析与讨论 39-41 6.4 本章小结 41-42 第七章 培养条件的调控作用 42-49 7.1 材料 42 7.2 方法 42-43 7.3 结果分析与讨论 43-48 7.4 本章小结 48-49 参考文献 49-53 致谢 53-54 在校期间发表的文章 54
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中图分类: > 医药、卫生 > 药学 > 药物分析
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