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脂质体介导CK13基因对鼻咽癌放疗敏感性影响的动物实验研究

作　者: 刘敬
导　师: 余宏
学　校:
专　业: 耳鼻喉科
关键词: CK13基因鼻咽癌放疗敏感性动物研究
分类号: R739.63
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
下　载: 25次
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内容摘要

目的：本文观察CK13基因对人鼻咽癌动物模型放射敏感性的影响。本课题是在前期研究基础上,利用HNE1细胞株和转染了目的基因的HNEl细胞株在Nu-Nu裸鼠腋下分别建立荷瘤动物模型,即NPC动物模型组和含目的基因的动物模型组,并在NPC动物模型组瘤体部位直接注射多价阳离子脂质体包裹表达CK13基因的质粒,对照组分别注射空载体质粒和磷酸盐缓冲液,然后所有组均给予2Gy直线加速器的局部肿瘤放射治疗(简称放疗),4天后重复肿瘤局部注射和放疗。观察肿瘤治疗前后大小变化,计算抑瘤率。最后处死小鼠,分离肿瘤组织。采用免疫组织学染色和RT-PCR的方法检测肿瘤组织CK13表达情况,HE染色比较各组移植瘤组织坏死程度。Western blotting进行CK13蛋白定量分析。探讨CK13基因与鼻咽癌放射敏感性的关系,以CK13基因为靶点进行相关研究,可为临床提高鼻咽癌放疗敏感性提供新的思路。方法：1.NPC动物模型及含目的基因NPC动物模型的建立。2.NPC动物模型局部注射质粒。3.放疗,并测量放疗前后肿瘤大小。4.处死小鼠,取标本做病检、免疫组化、RT-PCR、及Western Blotting。5.结果进行统计学分析。结果：在转染CK13基因的NPC动物模型组和注射有CK13基因的治疗组中CK13表达水平明显升高,CK13基因联合放疗治疗组肿瘤生长明显受限制。在第9天处死小鼠时,实验组(A1、A2、B1、B2组)的抑瘤率分别为44.6%,47.1%,45.9%,49.5%、空载体组(C1、C2组)抑瘤率为0,0.05%,各个实验组分别与空载体组比较,差异均有统计学差异(p<0.05),各个实验组间相比较,差异无统计学意义(p>0.05)。免疫组化检查实验组CK13阳性表达率较空载体组和对照组高,且差异有统计学意义。RT-PCR检测CK13基因显示：实验组CK13mRNA表达水平较空载体和对照组高。Western blotting示：实验组均可见明显CK13蛋白条带,而空载体组和对照组未见明显条带。结论：CK13基因可提高NPC对放射治疗的敏感性；CK13基因可能成为肿瘤治疗一个新的靶基因,为鼻咽癌的基因治疗提供一个新的途径。

全文目录

主要英文缩写  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
前言  10-13
一、材料与方法  13-26
二、实验结果  26-34
三、讨论  34-37
结论  37-38
参考文献  38-41
综述  41-49
  参考文献  46-49
攻读学位期间发表的文章情况  49-50
致谢  50

脂质体介导CK13基因对鼻咽癌放疗敏感性影响的动物实验研究

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