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灵芪胶囊对人源性直结肠癌lovo细胞荷瘤裸鼠HGF/SF-met信号转导通路的影响

作　者: 王国胜
导　师: 苏云明
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 中西医结合基础
关键词: 结直肠癌 抗肿瘤作用 灵芪胶囊 HGF/SF-met信号转导通路
分类号: R735.3
类　型: 博士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的：(1)观察灵芪胶囊对人源性结、直肠癌的抑制作用；(2)观察灵芪胶囊对lovo细胞荷瘤裸鼠生命状态和免疫器官的影响。(3)探讨灵芪胶囊抑制结直结肠癌相关的肿瘤细胞信号转导通路,即HGF/c-met通路,并诱导肿瘤细胞的凋亡作用及机制。方法：体内试验：取60只裸鼠,分6组,每组10只,分别为灵芪胶囊高、中、低剂量组,阳性对照组(给予5-FU)、模型组、空白对照组。于裸鼠右侧腋部皮下接种结、直肠癌肿瘤细胞,接种后24h给药,观察裸鼠的生命体征；21天后,称取裸鼠体重,麻醉,摘眼球取血,离心,取血清以备用；取肿瘤组织并称重,计算抑瘤率：取脾脏,计算免疫指数；并取瘤块在固定液中进行固定,在透射电镜下观察肿瘤细胞的生长情况；流式细胞术观察肿瘤细胞的凋亡情况。应用Western-Blot法和RT-PCR法检测信号转导通路HGF/SF-c-met上的关键位置HGF、c-met及PTK的mRNA及蛋白含量,以评价灵芪胶囊对该通路的影响方式结果：灵芪胶囊对人源性lovo细胞荷瘤裸鼠具有一定的抑制作用,而且对荷瘤裸鼠的生命状态及免疫系统影响较小。透射电镜表明灵芪胶囊对lovo细胞形态学有一定的影响,流式细胞仪检测说明灵芪胶囊能够诱导肿瘤细胞发生凋亡,其中灵芪胶囊高剂量组凋亡率最高,为34.76%,与对照组比较差异具有显著性意义。应用Real-time PCR及Western blot技术和激光共聚焦显微镜针对肿瘤凋亡相关的HGF/SF-met通路进行研究,结果表明,灵芪胶囊诱导肿瘤细胞发生凋亡的作用与该通路相关,能够抑制直结肠癌中HGF与c-met的联合表达,从而抑制HGF/SF-met通路诱导肿瘤细胞的凋亡结论：灵芪胶囊对人源性直结肠癌lovo细胞荷瘤裸鼠具有一定的肿瘤生长具有一定的抑制作用,能够诱导lovo细胞凋亡发生。其作用机制可能与HGF/SF-met信号转导通路有关,通过抑制HGF/SF-met信号转导通路上的关键位置HGF、PTK、c-met,从而抑制HGF/SF-met信号转导通路,达到抑制直结肠癌的作用。为今后临床上抗肿瘤提供了新的思路和理论依据。

全文目录


缩略语表  4-5
中文摘要  5-6
Abstract  6-8
前言  8-10
文献综述  10-27
  1. 传统医学对结直肠癌的认识  10-12
    1.1 古代医学家对结直肠癌的认识  10-11
    1.2 古代对结直肠癌病因机制的认识  11-12
  2. 现代医学对结直肠癌的研究现状  12-22
    2.1 结直肠癌的流行病学研究  12-13
    2.2 现代医学对结直肠癌的研究  13-14
    2.3 结直肠癌的现代化治疗  14-15
    2.4 结直肠癌手术治疗的方法  15-21
    2.5 结直肠癌的中药治疗  21-22
  3. 中药的分子作用机制  22-27
    3.1 诱导结直肠癌细胞的凋亡  22-23
    3.2 HGF/SF-c-met信号通路能诱导细胞迁移  23-24
    3.3 结直肠癌的细胞周期的抑制  24
    3.4 结直肠癌相关基因表达的影响因素  24-25
    3.5 调节人体的免疫功能  25
    3.6 抑制结直肠癌新生血管生成  25-27
实验研究  27-60
  实验一 灵芪胶囊体内肿瘤的抑制作用  27-34
  实验二 流式细胞术检测结直肠癌lovo细胞凋亡率  34-36
  实验三 灵芪胶囊对lovo细胞荷瘤裸鼠肿瘤组织的形态学研究  36-40
  实验四 检测结直肠癌相关mRNA表达的影响  40-50
  实验五 检测结直肠癌相关蛋白表达的影响  50-60
讨论  60-68
结论  68-69
致谢  69-70
参考文献  70-75
附图  75-79
个人简历  79

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 消化系肿瘤 > 肠肿瘤
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