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β-actin作为抑郁症患者血浆Western blot内参的初步研究

作　者: 张茹芳
导　师: 谢鹏
学　校: 重庆医科大学
专　业: 生化与分子生物学
关键词: β-actin 内参 Western blot 抑郁症血浆
分类号: R749.4
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要

研究背景抑郁症是常见的精神疾病，以显著而持久的情绪低落为主要临床特征，其终生患病率高达16%，但发病机制尚不明确，缺乏客观有效的诊断标志物。由于血浆是一种取材容易、应用广泛的研究样品，检测血浆特异蛋白的改变越来越广泛应用于临床疾病的诊断。近几年发展起来的差异蛋白质组学技术在研究疾病发病机制、寻找疾病相关标志物、探索并揭示许多未知但具有重要作用的蛋白质方面具有明显的优势。因此，运用血浆差异蛋白组学的方法，寻找抑郁症相关的蛋白分子，有望为抑郁症的早期诊断提供客观标志物。虽然血浆差异蛋白质组学技术在寻找疾病相关标志物方面较传统方法更有优势，但方法本身也有不足和局限性。首要问题是必须对蛋白质组学筛查的差异表达蛋白进行深入验证，以确保结果的可靠性。Western blot是常用的进行差异蛋白验证方法之一。在血浆Western blot实验中，选择合适的内参对Western blot验证结果的准确性尤为重要。β-actin是一种重要的细胞骨架蛋白，广泛分布于细胞浆内，在各组织和细胞中的表达丰富且相对恒定，是组织和细胞样品中常用的内参。然而β-actin是否存在于血浆中？如果存在，其在血浆中的含量如何，能否作为抑郁症患者血浆Western blot的内参？这些问题目前还不清楚。目的探索β-actin是否存在于人的血浆中，并进一步探讨β-actin能否作为抑郁症患者血浆Western blot的内参。方法1.经肘正中静脉采集6例空腹抑郁症患者与6例空腹健康对照者血液5ml（EDTA抗凝），分离血浆保存以备使用。2.运用ELISA方法检测抑郁症患者及健康人的血浆中β-actin含量。3.分析血浆蛋白上样量与Western blot方法检测的β-actin灰度值的线性关系。4.运用Western blot的方法检测β-actin在抑郁症患者和健康人血浆中的表达情况，分析两组间血浆β-actin表达是否存在差异。结果1. β-actin存在于抑郁症患者及健康人血浆中，并且占血浆总蛋白的9.4×10^-8。2.上样量与β-actin灰度值的线性关系非常好（R2=0.974±0.012）。3.抑郁症患者与健康人血浆中β-actin的表达没有统计学差异（P>0.05），且两组β-actin灰度值变异系数很小（CV=9.2±1.2%）。结论1. β-actin存在于人的血浆中，但其含量较组织和细胞中少。2.初步研究证明β-actin可以作为抑郁症患者血浆Western blot的内参。

全文目录

英汉缩略语名词对照  5-6
摘要  6-9
ABSTRACT  9-12
前言  12-13
1 材料和方法  13-25
2 结果  25-28
3 讨论  28-30
参考文献  30-32
全文总结  32-33
文献综述  33-39
  参考文献  37-39
致谢  39-40
攻读硕士期间发表论文  40-41

β-actin作为抑郁症患者血浆Western blot内参的初步研究

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