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沙棘中α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选

作　者: 郭凤霞
导　师: 曾阳
学　校: 青海师范大学
专　业: 植物学
关键词: α-葡萄糖苷酶抑制剂中国沙棘小鼠耐糖量糖尿病动物模型
分类号: S793.6
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要

实验选用中国沙棘(Hippophae rham noides L. subsp. chinensis Rousi)枝叶为研究材料,利用酶-抑制剂筛选模型、对沙棘中的活性部位进行AGI筛选,选择高活性的AGI部位,进行体外酶学动力学研究、体内小鼠耐糖量模型和糖尿病小鼠模型实验研究,探索高活性的AGI部位对血糖的影响及其作用机理。现将主要的研究内容和结果详细介绍如下:1.依次用极性不同的溶剂乙酸乙酯、甲醇、蒸馏水从沙棘粗粉中提取,得到三个不同提取部位;用乙醇回流热水浸法提取,Sevage法除蛋白,得到沙棘粗多糖。乙酸乙酯、甲醇、蒸馏水和沙棘粗多糖提取得率分别为1.52%、1.71%、2.41%和2.79%。2.利用AGI的筛选模型,分别对四个不同提取部位进行AGI活性筛选。结果:乙酸乙酯、甲醇、蒸馏水和沙棘粗多糖抑制活性分别为20.34%、13.43%、71.28%和90.43%。3.选择高活性的沙棘粗多糖提取部位,采用硫酸-苯酚法测得沙棘粗多糖的含糖量为28.52%。并对沙棘粗多糖进行理化性质和体外酶学动力学研究,结果:沙棘粗多糖浓度在0.0098 mg/mL-0.625mg/mL之间时,酶的抑制率随着浓度的增大而升高,IC50为0.01912mg/mL,浓度为0.625mg/mL时抑制率达92.52%,且与酶结合迅速,酸碱范围广,热稳定性好,沙棘粗多糖是一种高活性的竞争可逆性AGI,抑制常数Ki = 5.26mg/mL。4.采用小鼠耐糖量模型,以沙棘粗多糖为实验药物,观察沙棘粗多糖对蔗糖、葡萄糖、麦芽糖、淀粉负荷剂量后的正常小鼠血糖影响,结果:与对照组比较,淀粉组血糖值降低较为明显(P<0.01),蔗糖组次之(P<0.05)。表明沙棘粗多糖能够提高正常小鼠的耐糖量;通过抑制肠道内的AG而发挥作用,体内降血糖作用与阿卡波糖相似。5.用四氧嘧啶糖尿病小鼠动物模型,观察沙棘粗多糖对高血糖小鼠的影响,结果:与模型组比较,给药2周和4周后,沙棘粗多糖高剂量组对高血糖小鼠降糖作用明显(P<0.01,P<0.05),降糖率分别为31.72%和45.70%,沙棘粗多糖低剂量组降糖作用次之(P<0.05,P<0.05),降糖率分别为28.02%和39.38%。表明沙棘粗多糖对四氧嘧啶致高血糖小鼠具有良好的降血糖作用,且作用强度与剂量呈相关性。6.用链脲佐菌素糖尿病小鼠动物模型,观察沙棘粗多糖对高血糖小鼠的影响,结果:与模型组比较,给药2周和4周后,沙棘粗多糖高剂量组对高血糖小鼠降糖作用明显(P<0.01,P<0.01),降糖率分别为33.14%和43.78%,沙棘粗多糖低剂量组降糖作用次之(P<0.05,P<0.05),降糖率分别为27.07%和36.43%。表明沙棘粗多糖对链脲佐菌素致高血糖小鼠具有良好的降血糖作用,且作用强度与剂量呈相关性。

沙棘中α-葡萄糖苷酶抑制剂的筛选

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