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IL-8和Eotaxin在哮喘大鼠中的表达及地塞米松干预研究

作　者: 汪浩
导　师: 范晓云
学　校: 安徽医科大学
专　业: 老年医学
关键词: 哮喘 趋化因子 白细胞介素-8 嗜酸性粒细胞趋化因子
分类号: R562.25
类　型: 硕士论文
年　份: 2012年
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内容摘要


目的:研究哮喘大鼠外周血、肺泡灌洗液(BALF)上清液白介素-8(IL-8)、嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)表达水平和肺组织IL-8、Eotaxin mRNA及蛋白表达及地塞米松(DXM)对其影响。方法:30只雄性SD大鼠随机分为3组，每组10只：正常组、哮喘组和DXM干预组。（1）哮喘组：第1天和第8天大鼠腹腔注射1ml OVA1mg和Al(OH)3100mg无菌混悬液致敏。2周后将已致敏大鼠置于自制雾化玻璃箱中，用1%OVA雾化吸入激发，1次/天×30min，哮喘大鼠表现为易激怒、呼吸急促、鼻翼煽动、进食差、大小便失禁等症状，连续7天。（2）DXM干预组于每日激发前半小时予DXM1mg/kg腹腔注射。（3）正常组：致敏与激发均用生理盐水代替。在末次激发后24小时，处死大鼠，收集血清、肺泡灌洗液（BALF）和肺组织。并将肺组织经脱水透明、石蜡包埋等处理后制作成肺标本切片。运用ELISA方法对血清和BALF上清液IL-8、Eotaxin水平进行测定，以及用改良牛氏计数台对BALF沉淀细胞进行计数并将沉淀细胞涂片染色后进行分类计数。观察各组肺组织病理学改变。通过RT-PCR方法测定肺组织IL-8、Eotaxin mRNA表达。运用免疫组织化学方法测定大鼠肺组织标本IL-8、Eotaxin蛋白表达。各组指标数据经统计学方法进行分析比较。结果:1.哮喘组大鼠BALF中白细胞总数，嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞百分比显著高于正常组(P<0.01)；DXM干预组白细胞总数和嗜酸性粒细胞、中性粒细胞、淋巴细胞百分比较哮喘组明显减少(P<0.05)，较正常组白细胞总数、嗜酸性粒百分比明显增加(P<0.01)，但中性粒细胞、淋巴细胞百分比无统计学意义（P>0.05）。2.哮喘组大鼠血清和BALF上清IL-8、Eotaxin水平均显著高于正常组(P<0.01)，DXM干预组IL-8、Eotaxin水平明显低于哮喘组(P<0.05)，DXM干预组IL-8水平明显高于正常组(P<0.05)，Eotaxin水平与正常组无明显差异（P>0.05）。3.哮喘组大鼠肺组织IL-8、Eotaxin mRNA及蛋白的表达水平明显高于正常组(P<0.01)，DXM组IL-8、Eotaxin mRNA及蛋白的表达与哮喘组相比明显减少(P<0.01)，仍明显高于正常组(P<0.05)。结论:趋化因子IL-8和Eotaxin参与了哮喘炎症过程，DXM可通过抑制IL-8和Eotaxin表达来减弱其对炎性细胞中性粒细胞和嗜酸性粒细胞的趋化与激活从而减轻炎症反应，这可能是DXM减轻哮喘炎症反应的作用机制之一。

全文目录


中英文缩略词表  6-8
中文摘要  8-10
Abstract  10-12
1 前言  12-13
2 实验材料  13-17
  2.1 实验动物  13
  2.2 主要设备和仪器  13-15
  2.3 主要试剂  15-17
3 实验方法  17-29
  3.1 实验分组  17
  3.2 动物饲养  17
  3.3 动物模型建立  17
  3.4 标本的留取与保存  17-18
  3.5 肺泡灌洗液细胞计数与分类  18
  3.6 血清和 BALF 上清液 IL-8 水平测定  18-19
  3.7 血清和 BALF 上清液 Eotaxin 水平测定  19-20
  3.8 HE 染色  20-22
  3.9 RT-PCR 检测 IL-8 和 Eotaxin mRNA 表达  22-26
  3.10 采用免疫组化测定肺组织 IL-8 和 Eotaxin 表达  26-29
  3.11 统计分析方法  29
4 结果  29-35
  4.1 BALF 中各种细胞成份的变化  29
  4.2 肺组织病理改变  29-30
  4.3 血清和 BALF 上清中 IL-8、Eotaxin 水平  30-31
  4.4 肺组织 IL-8 和 Eotaxin mRNA 表达  31-32
  4.5 肺组织 IL-8 蛋白表达  32-33
  4.6 肺组织 Eotaxin 蛋白表达  33-35
5 讨论  35-39
6 结论  39
7 研究不足与展望  39
8 参考文献  39-44
附录  44-46
致谢  46-47
综述  47-54
  参考文献  51-54

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 呼吸系及胸部疾病 > 气管和支气管疾病 > 支气管疾病 > 支气管哮喘
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