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鹅绒藤单体化合物体外抗肿瘤活性的实验研究

作　者: 李洋
导　师: 王琦; 王妍
学　校: 宁夏医科大学
专　业: 病原生物学
关键词: 鹅绒藤单体化合物 CCK-8法抗肿瘤活性形态学
分类号: R285
类　型: 硕士论文
年　份: 2013年
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内容摘要

目的：研究从鹅绒藤提取分离得到的三种单体化合物对体外培养的肿瘤细胞株增殖的抑制作用及其可能的作用机制。方法：用CellCountingKit-8法(CCK-8)观察，以正常人胃粘膜上皮细胞GES-1作为正常对照，用不同浓度的鹅绒藤提取分离得到的正三十八烷(MonomerCompounds-Ⅱ，MC-Ⅱ)，山奈酚-7-O-α-L-鼠李糖苷(Monomer Compounds-Ⅴ，M C-Ⅴ)，7-O-α-L-鼠李吡喃糖基-山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(M o n o m e rCompounds-Ⅵ， MC-Ⅵ)等单体化和物分别作用于人宫颈癌细胞Hela、小鼠淋巴瘤细胞YAC-1和人胃癌细胞MGC-803等细胞株24、48、72、96h后，观察对这三种肿瘤细胞增殖活性的影响，并选取对三种单体化合物敏感的细胞株，采用Hoechst33342/PI双染荧光染色方法，观察不同浓度单体化合物作用下细胞凋亡的形态变化。结果：①MC-Ⅱ作用Hela细胞48和72h时，各剂量组的OD值有差异，在24、48、72h时对YAC-1细胞增殖有促进作用，在96h时有抑制作用(P<0.05)；MC-Ⅴ和MC-Ⅵ在50、100和200μ g·mL-1浓度下处理Hela和YAC-1细胞48、72和96h后，其OD值均低于对照组(P <0.05)，且浓度越高OD值越低。MC-Ⅴ在各浓度下处理MGC-803细胞24、48、72和96h后，其OD值均明显低于对照组(p<0.05)，MC-Ⅵ各浓度仅在24h对MGC-803细胞有抑制作用（P<0.05）。②MC-Ⅴ在作用Hela、YAC-1和MGC-803等细胞48h后，Hoechst33342/PI染色，荧光显微镜下，可观察到肿瘤细胞在加入不同浓度的单体化合物后，细胞开始萎缩，核开始固缩，随着浓度的提高，染色质凝集成团块状，显示出不断增强的亮蓝色和红光，其中以胃癌MGC-803表现最为明显；72h后的肿瘤细胞核固缩进一步加强，形成明显的圆珠子状结构，细胞边集化严重，呈现不均一的荧光显色结构。③MC-Ⅵ在作用YAC-1细胞48h后，各实验浓度组显示出不断增强的强蓝光和红光，跟单体化合物浓度成正相关，细胞核多凝聚，固缩的染色质发出极强的亮蓝光；72h后，随着单体药物诱导时间的延长，细胞壁破坏严重，裂解细胞增多，细胞核被PI复染成颗粒状深浅不均的强橘红色荧光，典型晚期细胞凋亡形态结构。结论：①体外实验表明，鹅绒藤提取分离得到的单体化合物对正常人胃粘膜GES-1生长抑制不明显，对肿瘤细胞具有明显的生长抑制作用，且对肿瘤细胞具有明显的选择性。②鹅绒藤乙酸乙酯萃取部分分离纯化得到的黄酮苷类MC-Ⅴ和正丁醇萃取部分分离纯化得到的黄酮苷类MC-Ⅵ， MC-Ⅴ对Hela、YAC-1和MGC-803等细胞的增殖均有较强的抑制作用， MC-Ⅵ仅对YAC-1细胞的增殖表现出较强的抑制作用，且呈时间和剂量依赖性。③鹅绒藤乙酸乙酯萃取部分分离纯化得到的烷烃类MC-Ⅱ，没有表现出明显的抗肿瘤活性。

全文目录

摘要  4-6
Abstract  6-11
前言  11-13
第一部分鹅绒藤单体化合物体外对肿瘤细胞增殖活性的影响  13-27
  材料与方法  13-19
  结果  19-25
  讨论  25-27
第二部分鹅绒藤单体化合物对肿瘤细胞凋亡的形态学观察  27-47
  材料与方法  27-32
  结果  32-44
  讨论  44-47
结论  47-48
附图  48-53
参考文献  53-56
综述  56-72
  综述参考文献  65-72
研究生期间发表的论文  72-73
致谢  73-74
个人简介  74

鹅绒藤单体化合物体外抗肿瘤活性的实验研究

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