最近越来越多的研究发现了众多的非编码RNA,并且其功能也被逐渐鉴定出来。目前研究非编码RNA已经是当前生命科学研究的前沿热点,这些小分子RNA在基因表达调控中扮演着重要的角色,几乎存在于所有的高等真核生物中,缺乏明确的开放阅读框,不编码蛋白质。本实验室在前期工作中通过抑制消减杂交实验发现一个类似mRNA的非编码基因,暂时命名为Z38,该基因在乳腺癌中高表达,目前还没有关于该基因的功能报道。为了在体内研究Z38的生物学功能,本研究构建了加终止密码子Z38的真核表达载体,转染HBL100细胞将其注射裸鼠,结果表明5只裸鼠有3只有肿瘤长成,而对照组有5只裸鼠只有1只长肿瘤,且瘤生成时期较晚和生长速度较慢。同时,构建了一个由MMTV启动子驱动表达Z38的真核表达载体,通过显微注射的方法建立了该基因的转基因小鼠。用PCR的方法鉴定了4只Z38的转基因小鼠,且该4只小鼠都发生了乳腺肿瘤,HE染色后证明是乳腺腺癌。提取这些转基因小鼠乳腺肿瘤组织的RNA,用PCR的方法证明了Z38在肿瘤组织的高表达。本研究成功构建了非编码基因Z38的转基因小鼠,Z38在转基因小鼠乳腺肿瘤组织中高表达,该转基因小鼠的建立为Z38的功能研究提供了良好的动物模型。
|