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脱细胞异种心脏瓣膜/可降解聚合材料构建复合组织工程瓣膜的初步试验研究
作 者: 吴松
导 师: 刘迎龙
学 校: 中国协和医科大学
专 业: 心血管外科
关键词: 脱细胞异种心脏瓣膜 可降解聚合材料 PHBHHx(3—羟基丁酸与3—羟基己酸共聚酯) 复合瓣膜 心血管组织工程
分类号: R318.1
类 型: 博士论文
年 份: 2007年
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内容摘要
脱细胞异种心脏瓣膜/可降解聚合材料构建复合组织工程瓣膜的初步试验研究目的:构建新型复合瓣膜,进行体外生物力学测试和动物体内移植试验,对其进行初步评价,为进一步的试验研究提供依据。方法:新鲜猪主动脉瓣经trypsin/EDTA法脱全部细胞后做为支架,用可降解聚合材料3-羟基丁酸与3-羟基己酸共聚酯(3-hydroxybutyrate-co-3-hydroxyhexanoate,PHBHHx)涂层,构建复合瓣膜(hybrid valve),进行如下试验:(1)采用单轴生物拉伸机对hybrid valve进行体外生物力学测试,以新鲜猪主动脉瓣(fresh valve)和脱细胞未涂层猪主动脉瓣(uncoated valve)做为对照,观察脱细胞和涂层处理对瓣叶生物力学相应指标的影响。(2)以脱细胞羊肺动脉血管片为支架,用PHBHHx涂层,构建复合补片(hybrid patch)并植入New Zealand白兔腹主动脉内(9只),进行小动物血管内生物相容性试验,以脱细胞未涂层羊肺动脉血管片(uncoated patch)做为对照(9只),在体观察涂层材料PHBHHx的细胞相容性、引导性和抗血栓性。(3)体外生物力学测试和小动物血管内相容性试验结果满意后,开始hybrid valve的大动物体内移植试验。方法:在全麻常温非体外循环下,将hybrid valve带瓣管道植入成年小尾寒羊的肺动脉瓣位(4只),以脱细胞未涂层瓣膜(uncoated valve)做为对照(2只)。术后18周将受试动物处死,取出植入瓣膜进行组织学、免疫荧光染色、扫描电镜检查和钙含量测定,对hybrid valve进行初步评价。结果:(1)hybrid valve具有自然瓣膜的形态结构,瓣叶柔软,体外生物力学测试结果表明,瓣膜抗拉强度明显提高,有助于增强耐疲劳性。(2)hybrid patch兔血管内生物相容性研究表明,hybrid patch形态满意,管腔面无血栓,新生内膜增生适度,自体再细胞化完全,全身炎症反应轻微。(3)hybrid valve羊体内移植试验结果显示,hybrid valve瓣膜形态良好,瓣叶柔软,无明显钙化和血栓形成;扫描电镜显示,瓣膜表面光滑;免疫荧光染色检测,证实瓣膜表面新生内膜(neointima)组织中类内皮细胞(endothelial-like cells)呈CD31阳性反应,沿瓣叶表面单层连续排列,瓣膜间质细胞呈现SMA阳性反应;钙含量测定表明,hybrid valve钙含量明显低于uncoated valve(P<0.05)。结论:复合瓣膜(hybrid valve)具有自然瓣膜的三维形态结构,良好的生物力学特性、生物相容性和细胞引导性。它主要通过引导或诱导自身组织再生,进行一定程度的瓣膜间质重建、修复和塑型,已经初步具备组织工程瓣膜的雏形,是一种有前途的心脏瓣膜替代物。
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全文目录
缩略语表 5-6 中文摘要 6-8 英文摘要 8-9 前言 9-12 第一部分 脱细胞猪主动脉瓣的构建 12-20 材料与方法 12-15 结果 15 讨论 15-16 结论 16-17 参考文献 17-20 第二部分 脱细胞猪主动脉瓣/PHBHHx构建复合瓣膜 20-29 材料与方法 20-22 结果 22 讨论 22-26 结论 26 参考文献 26-29 第三部分 复合瓣膜的生物力学检测 29-34 材料与方法 29-30 结果 30 讨论 30-32 结论 32 参考文献 32-34 第四部分 复合材料小动物血管内相容性试验 34-52 材料与方法 34-40 结果 40-41 讨论 41-47 结论 47-48 参考文献 48-52 第五部分 复合瓣膜的大动物体内移植试验 52-76 材料与方法 52-57 结果 57-59 讨论 59-69 结论 69 参考文献 69-76 全文总结 76-77 图片和图表 77-102 综述 102-125 参考文献 116-125 个人简历 125-127 致谢 127-129
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中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 医用一般科学 > 生物医学工程 > 人工脏器与器官
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