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食管鳞癌分泌型血清蛋白标志物的分离和鉴定

作　者: 张立勇
导　师: 赵晓航；吴旻
学　校: 中国协和医科大学
专　业: 细胞生物学
关键词: 食管鳞癌丛集素血清肿瘤标志物 2-DE MALDI-TOF-MS SELDI 标志蛋白谱型
分类号: R735.1
类　型: 博士论文
年　份: 2003年
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内容摘要

食管鳞癌是一种发病率和死亡率较高的疾病。目前尚无特异蛋白标志物的相关报道。识别和鉴定食管癌相关的标志蛋白，尤其是那些存在于各种体液中的分泌型的肿瘤相关蛋白／肽等，不仅有助于食管癌的早期诊断，而且有助于阐明肿瘤发生发展的机制。应用2-DE比较分析了5例食管鳞癌术前／术后配对血清和12对食管鳞癌术前／正常配对血清的蛋白表达谱，发现一组差异表达的蛋白质，其中之一经MALDI-TOF-MS鉴定为丛集素(clusterin)，它在食管鳞癌血清和组织中低表达。RT-PCR和Western blot证实了这一发现。 Clusterin在食管癌细胞系EC0156、EC0132和正常成人食管鳞状上皮中不表达，仅在某些正常鳞状上皮的角化部分表达。Clusterin定位于食管上皮下固有层中的疏松结缔组织中，如食管腺细胞胞浆、导管腺上皮胞膜和胞浆，以及反应性增生的淋巴滤泡中的淋巴细胞胞膜、胞浆等部位。在食管鳞癌细胞中不表达，仅部分出现于糖原丰富的鳞状上皮即分化成熟的癌细胞里。 RT-PCR显示，clusterin在多种胎儿组织中表达。胎儿组织微阵列的免疫组化显示，clusterin在食管上皮、贲门腺上皮、胃粘膜细胞、肝细胞、脾脏淋巴细胞、肌细胞中表达；在胎脑和胰腺中不表达。在clusterin和GFP共转染的人食管鳞癌细胞系中，clusterin定位于EC0156细胞的胞膜和胞浆。 Clusterin是一种新发现的分泌型的食管鳞癌血清候选标志蛋白。Clusterin在血浆中的丢失与食管鳞癌的发生发展密切相关。2-DE／MS技术是快速认识肿瘤异常表达蛋白质组的有效手段。

全文目录

中文摘要  4-5
英文摘要  5-9
文献综述  9-37
前言  37-39
第一部分食管鳞癌血清2-DE／MS的差异蛋白质组学研究  39-95
  材料与方法  39-55
  结果  55-81
  讨论  81-94
  结论  94-95
第二部分食管鳞癌血清标志蛋白SELDI质谱模型的建立  95-118
  材料与方法  95-99
  结果  99-110
  讨论  110-117
  结论  117-118
参考文献  118-127
缩略语  127-128
致谢  128-129
简历  129-132
附件  132-183

食管鳞癌分泌型血清蛋白标志物的分离和鉴定

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