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中药“强肾固本颗粒”对ED大鼠海绵体勃起神经递质CGRP及NOS亚型mRNA蛋白表达水平影响的实验研究

作　者: 李湛民
导　师: 张静生
学　校: 辽宁中医学院
专　业: 中西医结合临床
关键词: 强肾固本颗粒勃起功能障碍(ED) 降钙素基因相关肽(CGRP) 一氧化氮聚合酶(NOS) 实验性勃起功能障碍大鼠
分类号: R285.5
类　型: 博士论文
年　份: 2005年
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内容摘要

1.目的: 研究中药“强肾固本颗粒”对于ED大鼠海绵体勃起神经递质CGRP及NOS亚型mRNA蛋白表达水平的影响,探索中药治疗ED的作用机理。 2.方法: 1.勃起功能障碍(ED)大鼠模型制备方法及分组: 健康雄性Wistar大白鼠120只,体重320±20g。按随机数字将120只大鼠随机分成6组:A组(正常对照组Normal)、B组(去势组Model)、C组(去势再补充雄激素组Hormone)、D组(强肾固本颗粒高剂量组Big herb)、E组(强肾固本颗粒中剂量组Mid herb)、F组(强肾固本颗粒低剂量组Small herb),每组20只。本研究采用去势法建立大鼠ED模型。将B、C、D、E、F等5组共100只大鼠腹腔麻醉,皮肤消毒后阴囊正中切口,切除双侧睾丸,缝合皮肤。术后1周肌注青霉素40万U/Kg抗感染。并随时注意切口情况,对局部感染者进行皮肤消毒处理。 (1)中药组(D、E、F组):去势手术后第8天起灌服中药“强肾固本颗粒”。强肾固本颗粒高、中、低剂量根据人与动物等效剂量换算方法,于造模后第8天起开始分别灌胃给药。各组浓度分别含6g生药/ml、3g生药/ml、1.5g生药/ml,每次2ml,每日1次。连续10周。 (2)西药组(C组):选用临床常规用药——长效十一酸睾酮注射剂,根据人与动物等效剂量换算方法,按相当于人的中等治疗量,于术后第8天起,分别在第1、4、8周肌注十一酸睾酮注射液25mg/Kg体重,共3次。 (3)正常组(A组)及模型对照组(B组)均以0.9%生理盐水灌胃,每次2ml,每日1次,连续10周。 2.检测指标及方法: (1)采用免疫组化法,标志阴茎海绵体组织CGRP阳性神经纤维。分别于实验进行第5、10周,实验室无菌手术取出ED大鼠阴茎海绵体组织,每组各取10只。石蜡切片切成4μm,高压法修复抗原。羊血清封闭非特异性抗原。一抗为兔抗鼠抗体,二抗为羊抗兔抗体,均为多克隆抗体。阴性对照用PBS代替一抗,以光镜下含棕黄色颗粒的神经纤维为CGRP阳性神经纤维。应用北航医学图像高清晰彩色病理分析管理系统200倍光镜下随机每组选取10个视野,分别测定阳性神经纤维面积、阴性神经纤维面积,计算阳性神经纤维面积比例。 (2)免疫组化法测定“强肾固本颗粒”对ED大鼠海绵体组织NOS亚型蛋白表达水平的影响。冷冻组织切片,4℃丙酮固定10min,PBS漂洗3次,每次5min,去除内源性过氧化物酶,然后置入含体积分数3%正常山羊血清的PBS液中封闭,于室温孵育10min,加入

全文目录

1．中文摘要  4-7
2．英文摘要  7-9
3．中英文名词术语对照  9-10
4．前言  10-12
5．实验部分  12-35
  材料和方法  12-17
  结果  17-20
  讨论  20-31
  结论  31-32
  参考文献  32-35
6．致谢  35-36
7．综述  36-59
  (1) 男性勃起功能的生理与病理研究进展  36-46
  (2) 关于勃起神经递质CGRP研究进展  46-48
  (3) 关于NO、NOS的研究进展  48-50
  (4) 中医理论对于ED的认识  50-53
  (5) 展望  53-55
  参考文献  55-59
8．个人简历  59-61
9．附图  61-64

中药“强肾固本颗粒”对ED大鼠海绵体勃起神经递质CGRP及NOS亚型mRNA蛋白表达水平影响的实验研究

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