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针刺督脉经穴对脑缺血再灌注大鼠缺血半暗带Caspase-3、TNF-α和IL-1β蛋白表达的影响

作　者: 张加英
导　师: 倪光夏
学　校: 南京中医药大学
专　业: 针灸推拿学
关键词: 脑缺血 针刺 督脉经穴 Caspase-3 TNF-α IL-1β
分类号: R245
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要


目的：观察针刺督脉经穴对脑缺血再灌注大鼠缺血半暗带Caspase-3、TNF-α及IL-1β蛋白表达的影响；探讨针刺督脉经穴对缺血再灌注损伤脑组织的保护作用机制。方法：以局灶性脑缺血再灌注大鼠模型为缺血性脑血管病研究对象,以针刺督脉经穴为干预手段,并与传统针刺法(针刺阳明经穴组)进行对照,观察干预治疗前后模型大鼠神经功能评分的变化,同时采用Western blot方法检测各组大鼠在干预治疗前后脑组织中关键凋亡执行蛋白酶Caspase-3及炎症细胞因子TNF-α和IL-1β蛋白表达的变化情况。结果：(1)神经功能评分：针刺督脉穴组与针刺阳明经穴组治疗前后评分均有显著性改善(P<0.05),针刺督脉穴组较针刺阳明经穴组可更显著的改善大鼠缺损的神经功能(P<0.05)。(2)Caspase-3、TNF-α和IL-1β的蛋白表达：假手术组大鼠Caspase-3、TNF-α和IL-1p在脑组织呈基础水平表达；模型组Caspase-3、TNF-α和IL-1β较正常组显著增加(P<0.01),呈高水平表达；针刺督脉经穴和针刺阳明经穴组与模型组比较均显著降低(P<0.01或P<0.05),但仍高于假手术组和正常组,但针刺督脉经穴组较针刺阳明经穴组有更显著的效果(P<0.05)。结论：针刺督脉经穴能够更显著的改善脑缺血再灌注后大鼠的神经功能损伤；且较针刺阳明经穴组可更显著的降低脑缺血再灌注大鼠脑组织Caspase-3、TNF-α和IL-1β蛋白的表达,从而达到拮抗缺血性脑损伤的作用,说明针刺督脉经穴拮抗脑缺血再灌注损伤脑组织的神经元凋亡机制可能与其更显著的抑制脑内Caspase-3的蛋白表达有关,而抑制炎症反应的机制可能与其抑制TNF-α和IL-1β蛋白的过度表达有关。

全文目录


目录  5-7
摘要  7-8
Abstract  8-9
前言  9-10
第一部分 理论研究  10-24
  1. 中医对中风的认识  10-12
    1.1 中风病名的沿革  10
    1.2 对中风病因病机的研究  10-12
    1.3 中风的治疗原则  12
  2. 现代医学对缺血性脑血管病的认识  12-19
    2.1 病因和发病机理  12-13
    2.2 对梗死区周围缺血半暗带的认识  13-16
    2.3 现代医学对缺血性脑血管病的治疗  16-19
      2.3.1 溶栓治疗  16-17
      2.3.2 抗凝治疗  17
      2.3.3 降纤治疗  17-18
      2.3.4 抗血小板聚集治疗  18
      2.3.5 神经保护治疗  18-19
      2.3.6 手术及介入治疗  19
      2.3.7 预防性治疗  19
  3. 针灸治疗中风的历史沿革及机制  19-24
    3.1 针灸治疗中风的历史沿革  19-20
    3.2 针灸治疗缺血性脑血管病的现代机制  20-24
      3.2.1 抑制兴奋性氨基酸毒性  20-21
      3.2.2 降低钙离子超载  21
      3.2.3 抑制炎症反应  21-22
      3.2.4 抑制自由基反应  22
      3.2.5 抑制细胞凋亡  22-23
      3.2.6 对神经生化物质的影响  23-24
第二部分 实验研究  24-34
  1. 实验材料  24-25
    1.1 实验动物  24
    1.2 实验试剂  24
    1.3 实验仪器  24-25
  2. 实验方法  25-30
    2.1 动物分组  25
    2.2 大鼠大脑中动脉缺血再灌注模型制备方法  25
    2.3 神经行为学评分  25
    2.4 干预方法  25-26
    2.5 标本处理  26
    2.6 脑组织Caspase-3、TNF-α、IL-1β蛋白含量的检测  26
    2.7 Western blot实验方法  26-30
      2.7.1 组织总蛋白提取及蛋白定量  26-27
      2.7.2 电泳、电转膜及抗体孵育  27-30
    2.8 统计学处理  30
  3. 实验结果  30-34
    3.1 各组大鼠神经行为学评分  30-31
    3.2 Western bot结果  31-34
第三部分 讨论  34-39
  1. 动物模型的选择  34
  2. 针刺方案的选择  34-36
  3. 针刺对神经行为学评分的影响  36
  4. Caspase-3与脑缺血再灌注损伤的关系  36-37
  5. TNF-α及IL-1β与脑缺血再灌注损伤的关系  37-38
  6. 针刺对Caspase-3及TNF-α、IL-1β蛋白表达的影响  38
  7. 不足与展望  38-39
结论  39-40
参考文献  40-46
附录  46-48
攻读硕士学位期间取得的学术成果  48-49
致谢  49

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中图分类: > 医药、卫生 > 中国医学 > 中医临床学 > 针灸学、针灸疗法
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