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杜仲抗皮肤光老化的作用及机理研究

作　者: 徐艳明
导　师: 李永吉
学　校: 黑龙江中医药大学
专　业: 药剂学
关键词: 杜仲光老化模型 HaCaT细胞 ESF-1细胞
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

目的：筛选杜仲抗皮肤光老化的有效部位；对有效部位抗皮肤光老化的药效学和作用机理进行研究。方法：采用大孔吸附树脂柱将杜仲提取物分离成两个部位：水洗脱(WE)和醇洗脱部位(EE),采用UVA及UVB辐照的HaCaT和ESF-1细胞光老化模型,以细胞形态、细胞活性、LDH.SOD活力、MDA含量为指标,筛选杜仲抗皮肤光老化的有效部位；将该部位采用内服和外用两种方式作用于光老化模型小鼠,观察组织形态学、SOD活力及MDA含量的变化；将该部位作用于UVA辐照的ESF-1细胞光老化模型,应用酶联免疫法(ELISA法)检测细胞培养液中MMP-1.MMP-3.TIMP-1.Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)、弹性蛋白(Ela)的含量结果：WE对HaCaT及ESF-1细胞光老化模型均无显著影响。EE能够显著提高UVA、UVB光老化HaCaT及ESF-1细胞活性,降低培养液中LDH活力及MDA含量、提高SOD活力。EE内服后能够改善小鼠皮肤组织老化现象,提高小鼠血浆中SOD活力、降低MDA含量,但仍可见小鼠表皮和角质层增厚,真皮层纤维组织断裂、破碎,卷曲扭结等现象。外用后,能够改善小鼠皮肤组织老化现象,提高小鼠血浆中SOD活力、降低MDA含量。组织受损程度明显减轻,较接近正常组织,真皮层可见较完整的纤维组织,少见断裂、破碎,未出现卷曲扭结。EE在250μg·mL-1时能抑制UVA照射ESF-1细胞MMP-1及弹性蛋白的异常分泌,促进胶原蛋白的合成,但对TIMP-1及MMP-3的分泌无影响。结论：EE对UV致HaCaT.ESF-1细胞光老化均有保护作用,确定EE为抗皮肤光老化的有效部位。EE具有抗皮肤光老化的药理作用,且外用优于内服。推测其机制与能清除氧自由基、提高氧化酶活性、保护细胞膜结构,抑制基质金属蛋白酶及弹性蛋白的异常分泌,促进胶原蛋白合成有关。本研究切实深化了杜仲抗皮肤光老化的基础研究,为杜仲应用于预防和延缓皮肤光老化提供理论依据。

全文目录

英汉缩略语对照表  4-5
摘要  5-6
ABSTRACT  6-8
前言  8-9
第1章文献综述  9-21
  1.1 杜仲的研究现状  9-14
    1.1.1 杜仲的化学成分研究  9-11
    1.1.2 杜仲的药理活性研究  11-14
  1.2 皮肤光老化的研究现状  14-18
    1.2.1 日光中紫外线的种类及其在光老化形成中的作用  14-15
    1.2.2 皮肤光老化与皮肤细胞  15
    1.2.3 皮肤光老化与皮肤细胞活性  15-16
    1.2.4 皮肤光老化与细胞代谢  16-18
  1.3 中药抗皮肤光老化的研究现状  18-20
  1.4 立题依据及研究意义  20-21
第2章杜仲抗皮肤光老化有效部位的初步筛选  21-39
  2.1 杜仲抗UV致HaCaT细胞光老化有效部位的筛选  21-31
    2.1.1 材料及仪器  21-22
    2.1.2 实验方法  22-24
    2.1.3 实验结果  24-29
    2.1.4 小结  29-31
  2.2 杜仲抗UV致ESF-1细胞光老化有效部位的筛选  31-39
    2.2.1 材料及仪器  31
    2.2.2 实验方法  31-33
    2.2.3 实验结果  33-37
    2.2.4 小结  37-39
第3章有效部位抗小鼠皮肤光老化的药效学研究  39-46
  3.1 材料及仪器  39
  3.2 实验方法  39-40
  3.3 实验结果  40-44
  3.4 小结  44-46
第4章有效部位抗皮肤光老化的作用机理研究  46-53
  4.1 材料及仪器  46
  4.2 实验方法  46-50
  4.3 实验结果  50-51
  4.4 小结  51-53
第5章综合结论  53-56
  1 确定了杜仲抗皮肤光老的有效部位  53
  2 在整体动物实验水平进一步验证有效部位抗皮肤光老化作用  53-54
  3 探讨了有效部位抗皮肤光老化的作用机理  54-56
致谢  56-57
参考文献  57-62
个人简历  62

杜仲抗皮肤光老化的作用及机理研究

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