学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

醛糖还原酶抑制剂在高浓度葡萄糖诱导的人肾小管上皮细胞转分化中的作用

作　者: 王珍珊
导　师: 欧阳冬生
学　校: 中南大学
专　业: 临床药理学
关键词: 转分化高糖醛糖还原酶杜仲木脂素细胞外基质
分类号: R965
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 32次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：研究醛糖还原酶抑制剂依帕司他和杜仲木脂素对高糖诱导的人肾小管上皮细胞(HK-2)转分化及分化后细胞外基质分泌的影响。为其应用于DN肾间质纤维化防治提供理论依据。方法：将HK-2细胞在体外与高糖、高糖+不同浓度依帕司他、高糖+不同浓度杜仲木脂素共同培养48 h后,采用倒置显微镜观察细胞形态的改变；采用real-time PCR法测定反映转分化指标α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和E-钙黏素(E-cadherin)及反映细胞外基质分泌指标胶原蛋白Ⅰ(ColⅠ)和纤连蛋白(FN)的mRNA水平；采用Western blot法检测α-SMA、E-cadherin、Col I、FN蛋白表达。结果：1、高浓度葡萄糖可诱导HK-2细胞形态由鹅卵石铺路石样向梭形长条样转变,醛糖还原酶抑制剂依帕司他和木脂素可明显抑制高浓度葡萄糖诱导的细胞形态改变；2、α-SMA、E-cadherin、FN和Col I mRNA对葡萄糖诱导具有时间浓度依赖性。其中a-SMA在50 mmol/L培育48 h后增加最明显；而FN、Col I的增加则以20mmol/L、48 h最显著。3、分别加入1、10μmol/L依帕司他后α-SMA mRNA分别为：2.01±0.28和0.93±0.37,与对照组(2.38±0.26)相比,表达降低,差异具有统计学意义(P=0.036和P<0.001)；不同浓度木脂素能降低α-SMA mRNA表达(低浓度：2.19±0.33；中浓度：1.93±0.98；高浓度：1.57±0.94),与对照组比较差异没有统计学意义。4、分别加入1umol/L、10umol/L依帕司他后E-cadherin mRNA分别为：2.71±0.86和1.97±0.67,与对照组(0.94±0.42)相比,表达升高,差异有统计学意义(P=0.007和P=0.033)。0.1mg/L、1mg/L、10mg/L木脂素组E-cadherin mRNA分别为：1.77±0.37、2.63±0.41、3.61±1.05,与对照组相比,表达升高,差异有统计学意义(P=0.026、P<0.001和P=0.004)。50mmol/L甘露醇能显著升高α-SMA (2.88±1.30,P=0.016).E-cadherin(2.00±1.29)、Col I(1.62±0.33,P=0.019).FN(2.10±1.11,P=0.036)mRNA表达水平,与对照组相比,差异具有统计学差异。结论：1、葡萄糖可呈剂量及时间依赖性诱导HK-2细胞由上皮细胞表型向肌成纤维细胞表型转化,促进Col I、FN mRNA的表达；2、依帕司他及木脂素能拮抗高糖诱导的HK-2细胞的转分化,依帕司他能下调HK-2细胞α-SMA mRNA的表达,上调E-cadherin mRNA的表达。

全文目录

摘要  4-6
ABSTRACT  6-9
第一章前言  9-14
第二章材料和方法  14-31
  一、主要试剂和药品  14-15
  二、主要仪器  15-16
  三、方法  16-30
  四、统计学处理  30-31
第三章结果  31-45
  一、醛糖还原酶抑制剂对高糖诱导的HK-2细胞形态的影响  31-35
  二、不同浓度高糖对转分化相关基因(α-SMA、E-cadherin)、细胞外基质成分(Col Ⅰ、FN)mRNA表达的影响  35-40
  三、Real-time PCR法检测不同浓度依帕司他、杜仲木脂素对高糖诱导转分化相关基因(α-SMA、E-cadherin)、细胞外基质成分(Col Ⅰ、FN)mRNA表达的影响。  40-43
  四、Western-blot法检测不同浓度依帕司他、杜仲木脂素对高糖诱导转分化相关基因(α-SMA、E-cadherin)、细胞外基质成分(Col Ⅰ、FN)蛋白表达的影响  43-45
第四章讨论  45-49
第五章结论  49-50
第六章参考文献  50-55
综述  55-64
  参考文献  59-64
致谢  64-65
在读硕士期间的研究成果  65

醛糖还原酶抑制剂在高浓度葡萄糖诱导的人肾小管上皮细胞转分化中的作用

内容摘要

全文目录

相似论文