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调肝方药对愤怒和郁怒情绪模型大鼠不同脑区5-HTR2C表达水平的影响

作　者: 崔维刚
导　师: 薛玲
学　校: 山东中医药大学
专　业: 中药学
关键词: 5羟色胺2C受体 愤怒 郁怒 下丘脑 海马 调肝方药
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 28次
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内容摘要


目的:观察愤怒、郁怒情绪模型大鼠不同脑区中5羟色胺2C受体(5-HTR2C) mRNA和蛋白表达变化及调肝方药(经前平颗粒和经前舒颗粒)对其表达水平的调节作用,探讨愤怒、郁怒的发病机理,并探究调肝方药对大鼠愤怒、郁怒情绪的干预作用。方法:采用居住入侵加社会隔离的方法复制愤怒、郁怒情绪反应大鼠模型,以旷场实验和攻击行为测试评价模型,并应用调肝方药经前平、经前舒颗粒进行药物干预。造模后,将各组大鼠断头处死,分离顶区皮质、额区皮质、下丘脑和海马四个脑区。采用PCR基因扩增技术和蛋白印迹技术(Western blot)分别检测大鼠顶区皮质、额区皮质、下丘脑和海马脑区5-HTR2C mRNA和蛋白表达水平。结果:与正常组大鼠相比,愤怒情绪模型组大鼠5-HTR2C mRNA和蛋白表达水平在额区皮质、海马脑区均极显著性增高(P<0.01),在下丘脑脑区极显著性降低(P<0.01)。与愤怒模型组相比,经前平给药组大鼠5-HTR2C mRNA和蛋白表达水平在顶区皮质、额区皮质、海马脑区均极显著性降低(P<0.01),在下丘脑脑区极显著性增高(P<0.01)。与正常组大鼠相比,郁怒情绪模型组大鼠5-HTR2C mRNA和蛋白表达水平在下丘脑脑区极显著性降低(P<0.01),在海马脑区极显著性升高(P<0.01),在额区皮质脑区无显著性改变。与郁怒模型组相比,经前舒给药组大鼠5-HTR2C mRNA和蛋白表达水平在海马脑区极显著性降低(P<0.01),在额区皮质脑区无显著性改变。结论:大鼠不同脑区的5-HTR2C可能与大鼠愤怒、郁怒情绪密切相关,5-HTR2C表达变化可能是诱发大鼠愤怒、郁怒情绪的重要原因之一。调肝方药对愤怒、郁怒情绪大鼠不同脑区5-HTR2C有明显的调节作用,提示调肝方药对大鼠不同脑区5-HTR2C的调节作用可能是其干预大鼠愤怒、郁怒情绪的作用机制之一。

全文目录


提要  3-4
Abstract  4-9
引言  9-11
材料与方法  11-27
  1 实验材料  11-17
    1.1 实验动物  11
    1.2 实验试剂和药物  11-12
      1.2.1 RT-PCR 试剂  11
      1.2.2 Western blot试剂  11-12
      1.2.3 实验药物  12
    1.3 实验仪器  12
      1.3.1 RT-PCR 仪器  12
      1.3.2 Western blot仪器  12
    1.4 实验溶液  12-17
      1.4.1 存储液配制  12-13
      1.4.2 使用液的配制  13-17
  2 实验步骤及方法  17-27
    2.1 动物模型制备  17-19
      2.1.1 实验动物筛选  17
      2.1.2 实验动物饲养  17-18
      2.1.3 实验动物分组及给药方法  18
      2.1.4 居住-入侵实验  18-19
      2.1.5 造模结果评价及脑组织取材  19
    2.2 5-HTR2C mRNA表达水平的检测  19-22
      2.2.1 大鼠脑组织总RNA 的提取  19-20
      2.2.2 RNA 反转录  20
      2.2.3 PCR 扩增  20-21
      2.2.4 琼脂糖凝胶电泳  21-22
      2.2.5 检测分析  22
      2.2.6 数据处理  22
    2.3 5-HTR2C蛋白表达水平的检测  22-27
      2.3.1 蛋白的提取  22
      2.3.2 样品蛋白含量的测定  22-24
      2.3.3 Western blot法检测5-HTR2C蛋白的表达  24-26
      2.3.4 数据处理  26-27
结果  27-37
  1 大鼠造模结果  27-28
    1.1 攻击行为得分  27-28
      1.1.1 混合攻击行为得分  27
      1.1.2 攻击行为潜伏期  27-28
    1.2 旷场实验得分  28
  2 愤怒情绪模型大鼠不同脑区5-HTR2C mRNA表达水平检测结果  28-30
    2.1 大鼠顶区皮质、额区皮质5-HTR2C mRNA表达及经前平干预  28-29
    2.2 大鼠下丘脑、海马5-HTR2C mRNA表达及经前平干预  29-30
  3 愤怒情绪模型大鼠不同脑区5-HTR2C蛋白表达水平检测结果  30-32
    3.1 大鼠顶区皮质、额区皮质5-HTR2C蛋白表达及经前平干预  30-31
    3.2 大鼠下丘脑、海马5-HTR2C蛋白表达及经前平干预  31-32
  4 郁怒情绪模型大鼠不同脑区5-HTR2C mRNA表达水平检测结果  32-34
    4.1 大鼠顶区皮质、额区皮质5-HTR2C mRNA表达及经前舒干预  32-33
    4.2 大鼠下丘脑、海马5-HTR2C mRNA表达及经前舒干预  33-34
  5 郁怒情绪模型大鼠不同脑区5-HTR2C蛋白表达水平检测结果  34-37
    5.1 大鼠顶区皮质、额区皮质5-HTR2C蛋白表达及经前舒干预  34-35
    5.2 大鼠下丘脑、海马5-HTR2C蛋白表达及经前舒干预  35-37
讨论  37-45
  1 怒与肝脏的关系  37-38
    1.1 中医对怒与肝脏的认识  37
    1.2 现代医学对怒的认识  37-38
  2 不同脑区与愤怒、郁怒情绪的相关性  38-40
    2.1 大脑皮层与情绪的相关性  38-39
    2.2 下丘脑与情绪的相关性  39-40
    2.3 海马与情绪的相关性  40
  3 5-HTR2C 与愤怒、郁怒情绪的关系  40-42
    3.1 5-HTR2C  40
    3.2 5-HTR2C 与愤怒、郁怒情绪相关性  40-42
  4 调肝方药与愤怒、郁怒情绪的关系  42-44
    4.1 经前平颗粒与愤怒情绪的关系  42-43
    4.2 经前舒颗粒与郁怒情绪的关系  43-44
  5 问题与展望  44-45
结语  45-46
参考文献  46-50
综述  50-62
  参考文献  58-62
附录  62
缩写词表  62-63
致谢  63-64
论文著作  64-70
详细摘要  70-74

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