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大鼠正畸移动牙的对颌牙牙周鲁菲尼神经末梢及相关蛋白表达改变的实验研究

作　者: 鹿蕾
导　师: 王美青；刘晓东
学　校: 第四军医大学
专　业: 口腔基础医学
关键词: 牙周鲁菲尼神经末梢正畸牙移动咬合雪旺细胞 NT-3
分类号: R783.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

咀嚼系统是由咀嚼肌、颞下颌关节和咬合在神经系统的调控下组成的功能整体,任何一个部分发生异常都会导致其他部分的改建甚至功能紊乱。牙周膜内的力感受器——牙周鲁菲尼神经末梢负责感受咬合力等力刺激,并通过传入神经将力刺激信号传入中枢神经系统,协调咀嚼运动。本研究以雌性Sprague-Dawley(SD)大鼠为研究对象,以正畸皮圈的膨胀力推左侧上颌和右侧下颌第三磨牙向远中移动,形成上下颌磨牙尖窝不吻合的咬合接触,针对该正畸牙移动大鼠模型中正畸移动牙的对颌牙牙周鲁菲尼神经末梢的显微、超微结构变化,雪旺细胞标记物S-100蛋白表达变化,神经营养素-3(Neurotrophin-3,NT-3)表达的变化进行研究。第一部分:24只8周龄雌性SD大鼠的磨牙,随机分为正畸移动牙对颌牙组、正畸移动牙组和空白对照组,其中正畸移动牙对颌牙组(即右侧上颌第三磨牙)为实验组,正畸移动牙组(左侧上颌第三磨牙)为正畸移动牙对颌牙组在同一只动物的阳性对照组。实施正畸牙移动后3天、14天和28天(n=4),取双侧上颌后牙牙列做苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色,显微镜下观察左侧上颌第三磨牙和右侧上颌第三磨牙牙周组织显微结构的改变。大鼠上颌第三磨牙共有3个根,依次为近颊根,近舌根和远中根,为统一标准,取较为粗长的远中根观察。结果显示,空白对照组双侧上颌第三磨牙远中根的近、远中侧牙周膜腔宽度均匀,牙周膜未见明显的压缩和拉伸;正畸牙移动后第3天,正畸移动牙(左侧上颌第三磨牙)近中牙周膜腔明显变窄,远中牙周膜腔明显变宽,近中牙周膜被压缩,远中牙周膜被拉伸,表明正畸移动牙的根尖部向近中移动;正畸牙移动后第14天,正畸移动牙对颌牙(右侧上颌第三磨牙)的近中牙周膜腔轻度窄于远中牙周膜腔,近中牙周组织被轻度压缩,远中牙周组织被轻度拉伸,表明正畸移动牙对颌牙的根尖部也存在轻度的近中移动;正畸牙移动后第28天,正畸移动牙和正畸移动牙对颌牙的牙周膜宽度恢复均匀。结论:正畸牙移动会造成其对颌牙的牙周组织改建,但该改建出现的时间、程度较正畸移动牙发生晚、轻,恢复快。第二部分:64只8周龄雌性SD大鼠,分为两批,第一批16只用于电镜观察,第二批48只用于显微观察,各批随机分为正畸移动牙对颌牙组、正畸移动牙组(阳性对照)和空白对照组。第一批空白对照组于适应性饲养3天后,正畸移动牙对颌牙组和正畸移动牙组于正畸牙移动后第3天、14天、28天(n=4),取双侧上颌第三磨牙远中根的根尖1/3处牙周组织做电镜观察。第二批于正畸牙移动后第1天、3天、7天、14天、21天和28天(n=4),取双侧上颌后牙牙列做牙周鲁菲尼神经末梢标记物蛋白基因产物9.5(protein gene product 9.5, PGP 9.5)的免疫荧光染色观察。在空白对照组,牙周鲁菲尼神经末梢具有较为正常的超微结构,即线粒体、微丝、微管和神经基底膜的结构较典型,免疫荧光显示PGP 9.5阳性信号主要分布在牙周膜腔的牙槽骨侧;在正畸移动牙组,牙周鲁菲尼神经末梢的超微结构出现暂时性的线粒体减少和肿胀、空泡状结构、无定形电子致密物、微丝微管排列紊乱、神经基底膜排列紊乱等损伤样改变,这些改变于正畸牙移动后第3天最为明显,免疫荧光显示PGP 9.5阳性信号出现在牙周膜中间带和牙根侧,PGP 9.5阳性面积百分比较对照组暂时性的减少,最低值出现在实验第3天;在正畸移动牙对颌牙组,正畸牙移动后第3天,牙周鲁菲尼神经末梢出现暂时性的线粒体离心式排列,正畸牙移动后第14天,牙周鲁菲尼神经末梢出现线粒体减少、微丝微管稀疏和排列紊乱和神经基底膜结构异常,免疫荧光显示PGP 9.5阳性信号也出现在牙周膜中间带和牙根侧,PGP 9.5阳性面积百分比较对照组暂时性的减少,最低值出现在实验第14天;至实验第28天,正畸移动牙及其对颌牙的超微结构和PGP 9.5阳性面积百分比的变化基本恢复。结论:正畸牙移动可造成其对颌牙牙周鲁菲尼神经末梢的超微结构、数量和分布暂时性的改变,但与正畸移动牙相比,其变化程度轻、恢复快。第三部分:48只8周龄雌性SD大鼠,随机分为正畸移动牙对颌牙组、正畸移动牙组(阳性对照)和空白对照组,实施正畸牙移动后1天、3天、7天、14天、21天和28天后,取双侧上颌后牙牙列做雪旺细胞标记物S-100以及神经营养因子NT-3的免疫荧光染色及共定位观察,发现正畸移动牙组S-100阳性面积百分比、NT-3的相对光密度均较空白对照组暂时性的增多、广泛表达于牙周膜腔,最高值出现在实验第3天;正畸移动牙对颌牙S-100阳性面积百分比和NT-3相对光密度较空白对照组也暂时性的增多、广泛共表达,但其最高值出现在实验第14天。正畸移动牙和正畸移动牙对颌牙S-100阳性面积百分比和NT-3相对光密度均于第28天时恢复至基线水平。结论:正畸牙移动会造成其对颌牙雪旺细胞结构及NT-3表达的暂时性增多,但其改变较正畸移动牙发生晚且恢复快。通过以上的研究,可得到下列结论:移动牙的正畸操作,可使被移动牙的对颌牙出现同被移动牙相似的牙周膜腔改变,同时伴有相似的牙周鲁菲尼神经末梢的改建、其标记物蛋白基因产物9.5表达变化,以及牙周雪旺细胞标志物S-100和NT-3表达的变化。与正畸移动所致上、下颌牙尖窝不吻合咬合接触相关的咬合力作用,是这种牙周组织、力感受器鲁菲尼神经末梢以及雪旺细胞改建的内在机制。

全文目录

缩略语表  5-7
中文摘要  7-11
英文摘要  11-16
前言  16-17
文献回顾  17-31
  1 牙周鲁菲尼神经末梢的概念和特征  17-22
  2 牙周鲁菲尼神经末梢的发育和再生  22-25
  3 牙周鲁菲尼神经末梢的影响因素  25-31
实验一大鼠正畸移动牙的对颌牙牙周组织显微结构变化特点  31-37
  1 材料与方法  31-34
  2 结果  34-35
  3 讨论  35-36
  4 结论  36-37
实验二大鼠正畸移动牙的对颌牙牙周鲁菲尼神经末梢显微和超微结构变化特点  37-45
  1 材料与方法  37-40
  2 结果  40-42
  3 讨论  42-44
  4 结论  44-45
实验三大鼠正畸移动牙的对颌牙牙周S-100 和NT-3 表达的改变特征  45-51
  1 材料与方法  45-46
  2 结果  46-48
  3 讨论  48-50
  4 结论  50-51
全文总结  51-52
参考文献  52-63
附录  63-70
个人简历和研究成果  70-71
致谢  71

大鼠正畸移动牙的对颌牙牙周鲁菲尼神经末梢及相关蛋白表达改变的实验研究

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