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玉米幼苗根系在碳酸钠胁迫下的差异蛋白质组学分析

作 者: 蔡金挺
导 师: 郝东云;麻彤辉
学 校: 东北师范大学
专 业: 遗传学
关键词: 玉米 盐碱胁迫 蛋白质组学
分类号: S513
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
下 载: 59次
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内容摘要


提高作物耐盐性、有效利用盐碱地资源是关乎农业发展的重要课题之一。与氯化钠盐胁迫相比,内陆盐碱的碳酸盐胁迫对植物伤害更加严重且机理不清。因此研究植物对碳酸钠胁迫的应答机制,对于全面揭示植物耐盐性的遗传基础具有重要的意义。本实验以玉米幼苗根系为实验材料,利用二维电泳( two-dimensional electrophoresis, 2-DE)、质谱技术(mass spectrometry, MS)对三叶期的玉米幼苗根系在25mM Na2CO3胁迫条件下的差异表达蛋白质组进行了研究。以水处理为空白对照,研究了5h、24h和72h三个时间点的根系蛋白质二维电泳图谱的变化,并对差异表达的蛋白点进行质谱分析。2-DE图谱分析结果表明:25mM Na2CO3胁迫条件下,凝胶银染后经检测,共发现了蛋白质丰度差异变化在2倍以上的点1291个,其中表达上调205个,表达下调1086个,用MALDI-TOF-TOF MS鉴定了12个蛋白点,有11个蛋白点得到有效地鉴定。对所鉴定的蛋白质根据MATDB数据库的分类方法进行了功能分类,发现这些蛋白质的功能涉及代谢、转录、细胞周期、信号转导、细胞防御和抗性或与环境互作等方面,说明植物盐胁迫响应是涉及多个信号和代谢途径的复杂过程。综上实验数据,对植物细胞盐胁迫应答代谢调节网络进行了讨论,以期丰富植物盐胁迫下代谢分子网络的构建,研究抗逆蛋白的功能,为进一步揭示植物逆境适应的分子机理提供参考。

全文目录


摘要  4-5
英文摘要  5-8
第一章 引言  8-16
  1.1 植物盐胁迫响应机制的研究进展  9-14
    1.1.1 小分子渗透调节剂的作用  9
    1.1.2 热激蛋白  9-10
    1.1.3 脱落酸  10
    1.1.4 钙  10-11
    1.1.5 活性氧  11
    1.1.6 蛋白激酶  11-12
    1.1.7 RLK  12
    1.1.8 转录因子  12
    1.1.9 盐胁迫对光合作用的影响  12-13
    1.1.10 蛋白质降解与盐胁迫  13
    1.1.11 糖醇类与盐胁迫  13-14
    1.1.13 离子在植物耐盐性分子机制中的作用  14
  1.2 蛋白质组学及其在盐胁迫研究中的应用  14-15
  1.3 本研究的目的和意义  15-16
第二章 材料与方法  16-24
  2.1 实验材料  16-19
    2.1.1 植物材料  16
    2.1.2 主要药品及试剂  16-19
    2.1.3 主要仪器  19
  2.2 实验方法  19-24
    2.2.1 玉米幼苗培养和处理  19
    2.2.2 根系蛋白质组学研究  19-24
第三章 实验结果  24-34
  3.1 玉米幼苗胁迫条件的确立  24
  3.2 经提取后蛋白质样品浓度测定与 SDS-PAGE 验证  24-26
    3.2.1 Bradford 法测定蛋白浓度  24-26
    3.2.2 SDS-PAGE 验证  26
  3.3 二维电泳结果  26-31
  3.4 差异表达的蛋白质质谱鉴定结果  31-33
  3.5 鉴定蛋白的功能分类分析  33-34
第四章 实验讨论  34-41
  4.1 玉米幼苗稳定快速生长水培体系的建立  34-35
  4.2 玉米幼苗根系蛋白 2-DE 技术平台的建立  35-36
    4.2.1 蛋白质制备方法  35-36
    4.2.2 IPG 胶条种类的选择  36
    4.2.3 银染染色方法的应用  36
  4.3 玉米幼苗根系蛋白质组的动态变化  36-37
  4.4 凝胶图谱上蛋白点数与蛋白质浓度的关系  37
  4.5 Na2CO_3胁迫条件下差异表达蛋白与植物抗逆性的关系  37-40
    4.5.1 代谢相关蛋白  37-38
    4.5.2 转录/细胞周期/信号转导相关蛋白  38-39
    4.5.3 其它蛋白质的表达变化  39-40
  4.6 根系蛋白含量、蛋白种类变化原因以及根系可能的抗盐机制  40-41
结论  41-42
参考文献  42-46
附录  46-56
致谢  56

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中图分类: > 农业科学 > 农作物 > 禾谷类作物 > 玉米(玉蜀黍)
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