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高活性寡糖筛选及其促进植物生长的生理机制研究

作　者: 张运红
导　师: 吴礼树
学　校: 华中农业大学
专　业: 植物营养学
关键词: 寡糖菜心海藻酸钠寡糖寡聚半乳糖醛酸壳寡糖产量品质养分吸收根系特性光合特性氮代谢激素代谢钙信号
分类号: S482.8
类　型: 博士论文
年　份: 2011年
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内容摘要

施用外源物质调控植物生长发育是农业生产中的一项重要措施。生物活性寡糖作为外源激发子对植物生长及防御反应具有一定的调节功能,但目前研究多关注表观生物效应,对其在植物中信号传导过程及引发的系列生物学效应机制并不十分清楚。另外,不同种类寡糖的化学结构和生理功能也存在有差异,目前作为植物生长调节剂应用开发的并不是很多。鉴于此,本课题采用我国丰富的海藻酸钠及其寡糖、寡聚半乳糖醛酸和壳寡糖为材料,利用现代生物学和化学技术,筛选出高活性寡糖,确定其最佳施用方式；并采用水培试验,研究该寡糖对菜心光合作用、碳氮代谢、养分吸收和信号传导的影响,从而探讨其对植物的促生长生理机制。主要获得以下结论：1.采用土培和水培试验,研究了4种寡糖类物质在菜心上的生物学效应1.1产量和品质：4种寡糖叶片喷施均能一定程度促进菜心增产,改善其品质,其中壳寡糖20 mg/L和海藻酸钠寡糖40 mg/L浓度施用效果最好。海藻酸钠及其寡糖根部处理能提高菜心产量,改善其品质,且在一定浓度范围内(0-50 mg/L),产量和施用浓度间呈二次多项式变化规律；寡聚半乳糖醛酸和壳寡糖根部处理对菜心增产作用不大,高浓度时还有明显的抑制作用。1.2养分吸收：在本试验浓度范围内(0-100 mg/L),海藻酸钠及其寡糖和寡聚半乳糖醛酸低浓度处理均能显著促进菜心对N、P、Ca、Mg、B、Mn、Zn的吸收；低浓度时寡聚半乳糖醛酸对K的吸收也有一定的促进作用；壳寡糖低浓度处理能促进菜心对N、Mg、B、Cu、Zn的吸收,高浓度引起Cu的大量吸收,同时抑制N、P、K、Mg、Mn的吸收及Ca向地上部的转运。1.3根系特性：海藻酸钠及其寡糖处理对菜心根系形态及生理特性均有显著的改善效果；寡聚半乳糖醛酸10 mg/L处理对菜心根系生长也有一定的促进作用；壳寡糖10-200 mg/L处理对菜心根系形态及生理特性则有明显的抑制作用。1.4综合而言,4种寡糖类物质中,海藻酸钠寡糖对菜心生长发育具有相对最佳的促进作用,且以根部施用效果较好。2.采用水培试验,研究了海藻酸钠寡糖对植物光合碳代谢的调节及其作用机制2.1光合特性：海藻酸钠寡糖可提高菜心叶片的Pn、WUE和CE；并可通过增加LSP,降低LCP,扩大其光强可利用范围,从而促进光能的捕获和转化以及CO2的同化。2.2类囊体膜组成：海藻酸钠寡糖可增加菜心叶片类囊体膜色素及其蛋白复合体含量,并提高类囊体膜不饱和脂肪酸所占的比例,以维持膜的稳定性和流动性。同时诱导PSⅡ相关蛋白的表达；还可显著提高菜心叶绿体Mg2+-ATPase与Ca2+-ATPase活性,从而加快光合磷酸化进程。2.3类囊体膜功能：海藻酸钠寡糖处理前期促进类囊体膜对红光的吸收,后期降低对蓝光的吸收；PSⅡ荧光发射强度和希尔反应活力也有提高；海藻酸钠寡糖还可提高菜心叶片Fo、Fm、Fv、ETR和NPQ,从而促进光能的吸收和光合电子传递。2.4碳代谢：海藻酸钠寡糖可通过提高SS和SPS活性,促进菜心碳水化合物积累；并可通过诱导AI和NI活性,改变内部糖组成,从而提高其甜度。3.采用水培试验,研究了海藻酸钠寡糖对植物氮代谢的调节及其作用机制3.1正常钙水平下,海藻酸钠寡糖处理可显著提高菜心NR活性,使NH4+-N含量增加,N03--N含量降低；同时对GS、GDH和EP活性也有显著的促进作用。未施钙或低钙水平下,海藻酸钠寡糖对NR和GS的诱导作用均显著降低。说明海藻酸钠寡糖可加快植物氮代谢进程,且该效应与钙水平有关。3.2在培养液中添加钙代谢抑制剂EGTA、Vp、RR和CPZ后,海藻酸钠寡糖对菜心氨代谢的正相调节作用受到明显抑制,NR和GS活性及全氮和蛋白氮含量均有不同程度的降低,产量也有下降,表明Ca2+/CaM信号系统参与海藻酸钠寡糖对植物氮代谢的调节。3.3海藻酸钠寡糖主要通过诱导胞外Ca2+的进入,使[Ca2+]cyt浓度增加,激活植物生长相关的反应,同时胞内Ca2+库的释放也有一定的贡献；且其与钙形成的糖-钙复合物可能由于分子量过大的原因而不能通过质膜,最终在细胞壁间累积。4.采用水培试验,研究了海藻酸钠寡糖对植物内源激素代谢的影响海藻酸钠寡糖可促进菜心体内GA3的合成和运输,并能促进IAA向地下部和zR向地上部的运输,对ABA合成及其运输无显著影响,这导致叶片中ZR/ABA、ZR/GA、ZR/IAA和GA3/IAA比值的增加,从而有利于加快细胞的分裂或伸长,促进菜心植株生长。综上所述,海藻酸钠寡糖促进植物生长的可能生理机制为：被植物吸收后,在质外体空间内与Ca2+结合,形成糖-钙复合物,打破植物体内的钙稳态平衡,使[Ca2+]cyt增加,从而激活与生长发育相关的酶类,促进叶绿体对光能的吸收和转化,加快碳氮代谢进程；此外,还通过调控内源激素的水平及其平衡来加快植物细胞的分裂和伸长,促进根系的生长和养分吸收,最终表现为产量的增加和品质的改善。

全文目录

摘要  7-9
ABSTRACT  9-13
缩略词表  13-16
第一章文献综述  16-41
  1.1 植物生理活性物质研究进展  16-21
    1.1.1 植物生理活性物质的定义及其特点  16
    1.1.2 植物生理活性物质的开发现状  16-17
    1.1.3 植物生理活性物质的种类及生物活性  17-20
    1.1.4 植物生理活性物质产业存在的问题及未来发展趋势  20-21
  1.2 寡糖的生物学效应及其应用研究进展  21-41
    1.2.1 寡糖的定义及其分类  21
    1.2.2 寡糖的来源  21-24
    1.2.3 寡糖的制备及其分析方法  24-28
    1.2.4 寡糖的生物效应  28-35
    1.2.5 寡糖的应用  35-38
    1.2.6 寡糖的开发现状及市场前景  38-41
第二章研究背景、意义、内容和技术路线  41-44
  2.1 研究背景与意义  41-42
  2.2 研究内容  42-44
第三章几种寡糖类物质生物学活性鉴定  44-70
  3.1 几种寡糖类物质对菜心产量和品质的影响  44-56
    3.1.1 前言  44
    3.1.2 材料与方法  44-47
    3.1.3 结果与分析  47-55
    3.1.4 讨论  55-56
  3.2 几种寡糖类物质对菜心矿质养分吸收的影响  56-62
    3.2.1 前言  56-57
    3.2.2 材料与方法  57
    3.2.3 结果与分析  57-61
    3.2.4 讨论  61-62
  3.3 几种寡糖类物质对菜心根系形态及生理特性的影响  62-68
    3.3.1 前言  63
    3.3.2 材料与方法  63-64
    3.3.3 结果与分析  64-68
    3.3.4 讨论  68
  3.4 结论  68-70
第四章海藻酸钠寡糖对植物光合碳代谢的调节及其作用机制  70-97
  4.1 海藻酸钠寡糖对菜心叶片光合特性的影响  70-74
    4.1.1 前言  70
    4.1.2 材料与方法  70-71
    4.1.3 结果与分析  71-73
    4.1.4 讨论  73-74
  4.2 海藻酸钠寡糖对菜心叶片类囊体膜组成的影响  74-84
    4.2.1 前言  74-75
    4.2.2 材料与方法  75-78
    4.2.3 结果与分析  78-82
    4.2.4 讨论  82-84
  4.3 海藻酸钠寡糖对菜心叶片类囊体功能的影响  84-92
    4.3.1 前言  84-85
    4.3.2 材料与方法  85-86
    4.3.3 结果与分析  86-91
    4.3.4 讨论  91-92
  4.4 海藻酸钠寡糖对菜心碳代谢的影响  92-96
    4.4.1 前言  92-93
    4.4.2 材料与方法  93
    4.4.3 结果与分析  93-95
    4.4.4 讨论  95-96
  4.5 结论  96-97
第五章海藻酸钠寡糖对植物氮代谢的调节及其作用机制  97-126
  5.1 海藻酸钠寡糖对菜心氮代谢关键酶活性及相关产物含量的影响  97-105
    5.1.1 前言  97-98
    5.1.2 材料与方法  98
    5.1.3 结果与分析  98-103
    5.1.4 讨论  103-105
  5.2 Ca~(2+)/CaM信号系统在海藻酸钠寡糖调节氮代谢中的作用  105-114
    5.2.1 前言  105
    5.2.2 材料与方法  105-106
    5.2.3 结果与分析  106-113
    5.2.4 讨论  113-114
  5.3 海藻酸钠寡糖对菜心叶片钙亚细胞分布的影响  114-125
    5.3.1 前言  114-115
    5.3.2 材料与方法  115
    5.3.3 结果与分析  115-123
    5.3.4 讨论  123-125
  5.4 结论  125-126
第六章海藻酸钠寡糖对植物内源激素代谢的调节  126-133
  6.1 前言  126-127
  6.2 材料与方法  127
    6.2.1 试验材料与设计  127
    6.2.2 激素含量的测定  127
    6.2.3 统计分析  127
  6.3 结果与分析  127-129
    6.3.1 海藻酸钠寡糖对菜心内源激素含量的影响  127-128
    6.3.2 海藻酸钠寡糖对菜心叶片中激素间比值的影响  128-129
  6.4 讨论  129-132
    6.4.1 海藻酸钠寡糖通过改变内源激素水平及其分布调控植物生长发育  129-130
    6.4.2 海藻酸钠寡糖通过打破激素间的稳态平衡传递其促生长信  130-131
    6.4.3 海藻酸钠寡糖引发植物体内钙信号和激素信号间的偶联效应  131-132
  6.5 结论  132-133
第七章讨论与结论  133-143
  7.1 讨论  133-138
    7.1.1 不同寡糖类物质引发植物生物学效应的差异  133-134
    7.1.2 海藻酸钠寡糖促进植物生长的可能生理机制  134-138
  7.2 主要结论  138-140
  7.3 本文的创新之处  140-141
  7.4 存在问题与展望  141-143
参考文献  143-171
致谢  171-172
攻读博士期间已经发表和待发表论文  172

高活性寡糖筛选及其促进植物生长的生理机制研究

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