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肾衰Ⅰ号对单侧输尿管结扎大鼠肾组织中Ang-Ⅱ表达的影响

作　者: 廖友义
导　师: 邵朝弟
学　校: 湖北中医学院
专　业: 中医内科学
关键词: 单侧输尿管结扎肾纤维化血管紧张素Ⅱ 动物,实验
分类号: R285.5
类　型: 硕士论文
年　份: 2008年
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内容摘要

目的:探讨肾衰Ⅰ号水煎液对单侧输尿管结扎大鼠肾组织中Ang-Ⅱ表达的影响及其作用机制。方法:将60只Wistar大鼠随机分为5组,即模型组、肾衰Ⅰ号组、贝那普利组、假手术组和空白组,每组12只。其中模型组、肾衰Ⅰ号组和贝那普利组:用2%戊巴比妥钠按30mg/kg腹腔注射麻醉后将大鼠固定、去毛备皮,打开腹腔结扎左侧输尿管后逐层缝合切口。结扎日起三天内每天肌注青霉素8万单位/只预防感染。其中模型组用生理盐水灌胃10ml/(kg·d),共14天;肾衰Ⅰ号组:每日用肾衰Ⅰ号水煎液灌胃一次,剂量为8g/(kg·d),共14天。贝那普利组:每日灌胃一次,剂量为5mg/(kg·d),共14天。假手术组:同样麻醉后打开腹腔但不结扎输尿管,并逐层缝合切口,肌注青霉素,生理盐水灌胃10ml/(kg·d),共14天。空白组:不作手术,只肌注青霉素3天和生理盐水灌胃10ml/(kg·d),共14天。输尿管结扎后第13天开始各组按随机原则各取10只大鼠分别置于代谢笼中收集24小时尿液,送湖北省中医院同位素室测尿β2-mG含量;第14天将各组大鼠摘眼球,用抗凝管取血,送湖北省中医院检验科测血肌酐含量;将大鼠处死,留取梗阻侧肾脏标本,置于10%中性甲醛固定液中保存,用以作肾组织切片HE染色和肾组织中Ang-Ⅱ表达的检测。肾组织切片HE染色后,每组随机取10张切片,高倍镜下(×200)观察比较各组肾间质纤维化程度。结果采用单盲法评估,按如下方法评分:分为-、+、++、+++4个等级,分别记0、1、2、3分。(-)为小管间质无病变;(+)为轻度,小管间质病变范围＜20%;(++)为中度,病变范围在20%～40%;(+++)为重度,病变范围＞40%。连续观察不重叠的10个高倍视野,综合进行等级评分。肾组织中Ang-Ⅱ表达的检测中免疫组化采用SABC法,每组随机取10张切片,用同济千屏影像工程公司HPIAS2000型图像分析软件分析,每张切片(×400)光镜下随机采集5个不重叠视野,棕黄色(Ang-Ⅱ染色区)为阳性染色区。测量染色区平均光度值。统计学方法使用SPSS11.5统计软件包进行统计分析,计量资料用(?)±S表示。组间比较采用t检验。结果:1.尿β2-mG的测定肾衰Ⅰ号组和贝那普利治疗组尿β2-mG含量较模型组明显降低(P＜0.01),高于假手术组和空白组(P＜0.01);肾衰Ⅰ号和贝那普利治疗组之间尿β2-mG含量无明显差异(P＞0.05)。2.血肌酐测定肾衰Ⅰ号组、贝那普利组与空白组、假手术组之间无统计学差异(P＞0.05);肾衰Ⅰ号组、贝那普利组与模型组之间无统计学差异(P＞0.05)。3.病理观察HE染色显示假手术组和空白组肾小管结构正常;模型组部分肾小管扩张,小管皮质变薄,部分肾小管萎缩,炎性细胞浸润明显;肾衰Ⅰ号组和贝那普利组病变较模型组减轻。肾衰Ⅰ号组与贝那普利组相当。4.肾间质纤维化HE染色记分肾衰Ⅰ号组和贝那普利组记分明显低于模型组(P＜0.01),高于空白组和假手术组(P＜0.01);肾衰Ⅰ号组和贝那普利组之间记分无明显差异(P＞0.05)。5.肾组织中Ang-Ⅱ阳性表达肾衰Ⅰ号组和贝那普利组平均光度值明显低于模型组(P＜0.01),高于假手术组和空白组(P＜0.01);肾衰Ⅰ号组平均光度值低于贝那普利组(P＜0.05)。结论:本研究表明:肾衰Ⅰ号煎剂具有阻缓肾间质纤维化的作用。其作用机制之一可能是阻缓Ang-Ⅱ在肾间质中表达,从而阻缓Ang-Ⅱ在肾纤维化中的作用:①诱导肾间质成纤维细胞的增殖、肥大,②引起ECM积聚,③炎症介质作用,④对致肾纤维化下游因子的促进作用等。

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中文摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
中英文对照缩略词表  10-11
前言  11-12
材料与方法  12-17
  1.实验材料  12
  2.实验方法  12-16
  3.统计学方法  16-17
实验结果  17-21
  1.一般情况  17
  2.尿β2-MG定量  17
  3.血肌酐定量  17-18
  4.肾衰Ⅰ号煎剂对病理的影响  18-19
  5.肾衰Ⅰ号煎剂对肾组织中Ang-Ⅱ表达的影响  19-21
讨论  21-32
  1.正常肾小管、肾间质结构  21
  2.单侧输尿管结扎大鼠肾纤维化模型评价  21-22
  3.中医病机  22-24
  4.肾衰Ⅰ号的组方及治疗作用  24-29
  5.指标选择依据及实验结果分析  29-32
结语  32-33
参考文献  33-34
文献综述  34-40
附图  40-46
致谢  46

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