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基因转染β肾上腺素受体激酶抑制剂对哮喘小鼠β受体信号转导调节的研究

作　者: 吴艳
导　师: 黄茂
学　校: 南京医科大学
专　业: 呼吸内科
关键词: 哮喘基因转染 β受体 cAMP βARKct Gβγ β受体激动剂
分类号: R562.25
类　型: 硕士论文
年　份: 2003年
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内容摘要

目的 β肾上腺素受体激酶（βARK₁）磷酸化激活态β受体，是长期应用β受体激动剂导致β受体下调的最主要的原因之一。我们构建在肺部表达βARK₁抑制剂（βARKct）的表达质粒，并通过基因转染的方式来研究βARKct对哮喘小鼠和长期应用β₂受体激动剂小鼠肺部β受体信号转导的调节。方法 1．取正常小鼠的脑组织作为模板，经RT-PCR取得目的基因，构建以pcDNA3.1为载体的表达质粒。 2．建立哮喘动物模型和长期应用β受体激动剂的哮喘动物模型。 3．质粒DNA经脂质体的包裹，通过尾静脉注射和气管内滴入的转染途径进行基因转染。 4．Western-blot检测基因的表达。放免法检测小鼠肺部的β受体和cAMP的水平。结果 1．经不同途径转染构建的表达质粒在肺部都有目的基因的表达，但表达的量不同。 2．哮喘小鼠，应用β受体激动剂的哮喘小鼠肺部β受体和cAMP水平都有下降，下降的程度不同。 3．pcDNA-βARKct转染小鼠肺部β受体的数目和cAMP水平都有上调。结论 1．构建含有目的基因βARK₁抑制剂的质粒在肺部有表达，表达的量与转染途径和DNA的量相关。南京医科大学硕士学位论文 2．基因转染pARKct基因对哮喘小鼠及长期应用p受体激动剂后的哮喘小鼠肺部p受体和CAMP的下降都有抑制作用，但p ARKd在两者中的作用机理不同。

基因转染β肾上腺素受体激酶抑制剂对哮喘小鼠β受体信号转导调节的研究

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