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茶多糖铁复合物的制备及其部分药效研究

作　者: 唐敏敏
导　师: 刘昌岭；汪东风
学　校: 中国海洋大学
专　业: 食品科学
关键词: 茶多糖铁复合物生物利用率药代动力学表征
分类号: R96
类　型: 硕士论文
年　份: 2009年
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内容摘要

铁是人体内重要的矿质元素之一,缺铁位于严重影响人类健康危险因素中的第九位。以具有多方面的生理活性多糖为配体的新型三价铁复合物补铁剂具有稳定的高水溶性,能以分子形式完整地吸收且无毒副作用而逐渐成为人们的研究热点。论文第一部分包括粗茶多糖（TPS,多糖含量为27%）的纯化和茶多糖铁复合物（TPS-Fe）的制备。对粗茶多糖醇沉后,利用正交实验优化了聚乙烯吡咯烷酮（PVPP）去除多酚的条件,得到的结果表明,各因素对多酚剩余含量的影响大小依次为PVPP用量（mTPS:mPVPP）、处理次数、处理时间,最佳去除条件为PVPP用量是5:1,处理3次,每次时间为0.5小时,由此得到了多糖含量为67%,多酚含量为0.7%,蛋白含量为6.7%的纯化茶多糖。利用正交实验优化了由纯化茶多糖和三氯化铁制备TPS-Fe的条件。结果发现,各因素对TPS-Fe铁含量的影响大小依次是,反应pH、反应温度、用料比、反应时间。最佳实验条件是pH为8,60℃,用料比为1:2.4（0.5g:1.2g）,反应时间为1³h,在此条件下得到的粗产物铁含量为14.6%。粗产物分别用无水乙醇、无水乙醚洗涤三次后,固体冷冻干燥得铁含量为20.17%的精品TPS-Fe。对此精品TPS-Fe进行定性鉴定,发现其水溶液中没有游离铁离子,且本品的溶出性能测定结果显示其溶出性能良好,在2h内铁全部溶出被抗坏血酸还原。论文第二部分利用血红素再生法以硫酸亚铁（FeSO₄）为阳性对照品研究了TPS-Fe在缺铁性贫血大鼠体内的生物利用率以及不同给药对大鼠组织内铁锰铜锌含量水平的影响。实验结果表明, 21天的补铁期结束时,TPS-Fe和FeSO₄补铁组大鼠的Hb、血红蛋白总铁、血清铁都已经迅速升高,趋于正常水平,甚至高于正常水平。而TPS-Fe补铁组的高剂量（36、48mg/Kg diet）补铁效果较低剂量（12、24mg/Kg diet）好,36 mg/Kg diet剂量组补铁效果和48 mg/Kg diet剂量组的无显著差异。分别以Hb、血红蛋白总铁、血清铁含量为评价指标,以FeSO₄的生物利用率为100%时,TPS-Fe的生物利用率为100¹16%之间,说明TPS-Fe相对FeSO₄是一种较好的补铁剂。通过本实验研究得知,在一定范围内,Hb、血红蛋白总铁、血清铁含量以及全血、肝脏、心脏中的铁含量都是随TPS-Fe给药剂量的增加而增加的;全血锰含量、肝脏Cu/Zn随TPS-Fe给药剂量的增加逐渐减小,全血Cu/Zn、肝脏锰含量、心脏Cu/Zn、心脏锰含量与TPS-Fe给药剂量之间并无显著相关性。论文第三部分利用血药浓度法以市售力蜚能为对照品研究了TPS-Fe在健康新西兰兔体内的药代动力学。研究结果表明,TPS-Fe和力蜚能在体内运转同属于二室开放模型,血清铁在给药后4.0 h达峰,达峰浓度为5.67ug/ml。TPS-Fe在灌胃后8小时相对力蜚能的生物利用率为115.84%,时间无限长时相对力蜚能的生物利用率148.04%。论文第四部分对TPS-Fe的表征进行了研究。紫外可见光谱、红外光谱、X-射线衍射分析结果表明,Fe³⁺和TPS的羟基或氨基有一定的配位。差示量热扫描和热重分析表明,TPS-Fe具有较好的热稳定性。

全文目录

摘要  5-7
Abstract  7-12
1 前言  12-19
  1.1 缺铁性贫血及其研究现状  12-17
    1.1.1 铁的营养研究现状  12-14
    1.1.2 缺铁性贫血的形成及危害  14-16
    1.1.3 治疗和改善缺铁性贫血的研究现状  16-17
  1.2 多糖铁的研究进展  17
  1.3 本研究的目的、内容和意义  17-19
2 茶多糖铁复合物的制备  19-31
  2.1 材料与方法  19-25
    2.1.1 材料与试剂  19
    2.1.2 仪器  19-20
    2.1.3 茶多糖的分离纯化方法  20-22
      2.1.3.1 蒽酮硫酸法测量糖含量  20-21
      2.1.3.2 用酒石酸亚铁法测量多酚含量  21
      2.1.3.3 考马斯亮蓝测量蛋白含量  21-22
    2.1.4 TPS-Fe 的制备  22-24
      2.1.4.1 样品铁含量的测定  23-24
    2.1.5 TPS-Fe 的定性鉴定试验  24
    2.1.6 TPS-Fe 的溶出性能测定  24-25
  2.2 结果与讨论  25-30
    2.2.1 茶多糖的分离纯化  25-26
    2.2.2 TPS-Fe 的制备  26-27
    2.2.3 TPS-Fe 定性鉴定  27
    2.2.4 TPS-Fe 的溶出性能测定  27-30
  2.3 小结  30-31
3 茶多糖铁复合物在缺铁性贫血大鼠体内的铁生物利用率研究  31-44
  3.1 材料与方法  31-35
    3.1.1 实验动物  31
    3.1.2 实验日粮  31-32
    3.1.3 动物实验方案  32-33
    3.1.4 样品的采集和处理  33-34
    3.1.5 测定指标和方法  34
      3.1.5.1 Hb 含量的测定  34
      3.1.5.2 血清铁含量测定  34
      3.1.5.3 组织铁、铜、锌及锰含量  34
    3.1.6 数据处理  34-35
  3.2 结果与讨论  35-43
    3.2.1 不同给药对大鼠增重的影响  35
    3.2.2 日粮铁源和铁水平对Hb、血红蛋白总铁、血清铁含量的影响  35-38
      3.2.2.1 不同给药对Hb 含量的影响  35-36
      3.2.2.2 不同给药对血红蛋白总铁含量的影响  36-37
      3.2.2.3 不同给药对血清铁含量的影响  37-38
    3.2.3 不同给药对全血、肝脏、心脏中的铁、铜、锌、锰水平的影响  38-43
      3.2.3.1 不同给药对全血中铁、铜、锌、锰水平的影响  39-40
      3.2.3.2 不同给药对肝脏中铁、铜、锌、锰水平的影响  40-42
      3.2.3.3 不同给药对心脏中铁、铜、锌、锰水平的影响  42-43
  3.3 小结  43-44
4 茶多糖铁复合物的药代动力学研究  44-48
  4.1 材料和方法  44
    4.1.1 实验试剂  44
    4.1.2 实验动物  44
    4.1.3 实验方案和血药浓度测定  44
    4.1.4 数据处理  44
  4.2 结果与讨论  44-47
    4.2.1 新西兰兔单次灌胃给药血药浓度－时间数据  44-45
    4.2.2 TPS-Fe 在新西兰兔体内的药代动力学参数  45-47
  4.3 小结  47-48
5 茶多糖铁复合物的表征研究  48-55
  5.1 测定仪器和方法  48-50
    5.1.1 测定仪器  48
    5.1.2 测定方法  48-50
      5.1.2.1 紫外可见光谱  48
      5.1.2.2 红外光谱  48-49
      5.1.2.3 X-射线衍射  49
      5.1.2.4 热分析  49-50
  5.2 结果分析  50-54
    5.2.1 TPS、FeCl_3、TPS-Fe 的紫外光谱分析  50
    5.2.2 红外光谱分析  50-51
    5.2.3 TPS、FeCl_3、TPS-Fe 的X-射线衍射分析  51-52
    5.2.4 TPS-Fe 的热分析  52-54
  5.3 小结  54-55
参考文献  55-60
致谢  60-61
个人简历  61-62
发表的学术论文  62

茶多糖铁复合物的制备及其部分药效研究

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