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应用巢式PCR检测低剂量UVA对人类面部皮肤的损伤

作　者: 张军林
导　师: 刘立刚
学　校: 暨南大学
专　业: 外科学
关键词: 巢式聚合酶链式反应长波紫外线光老化成纤维细胞线粒体DNA普通缺失突变率
分类号: R450
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

目的探讨低剂量长波紫外线是否会对人类面部皮肤造成损伤，为指导人们日常生活中有效预防皮肤光老化提供理论依据。方法选取2005年7月至2006年1月共14例行“眼袋祛除术”的健康患者作为研究对象。术后立刻将切除的右侧皮肤标本置于辐射强度为1mw／cm~2的紫外线灯下行低温照射1小时，左侧皮肤标本置于同样条件下并以锡箔纸遮盖。酶消化法去除表皮后用DNA试剂盒提取真皮层中总的DNA，进行巢式PCR反应。得到两次PCR产物图像后，使用配套软件将所得到的图像进行数据转换并最终得出线粒体DNA普通缺失突变率。将得到的数据用SPSS10.0软件进行统计学分析。结果实验组的线粒体DNA普通缺失突变率(0.285±0.193)较对照组(0.098±0.175)为高，且t=4.793，P＜0.05，差异有统计学意义。正常皮肤成纤维细胞中线粒体DNA普通缺失突变率与年龄无正的直线关系。结论单次低剂量UVA照射可对人类面部皮肤造成损伤，加速皮肤衰老，应引起人们足够的重视并进行有效防护。巢式PCR方法作为一种半定量检测方法有其简便有效之处，但存在精确度不够等问题，有待进一步改进。

全文目录

摘要  5-6
Abstract  6-7
缩略词表  7-8
引言  8-12
  1 皮肤衰老的分类  8
  2 成纤维细胞在皮肤光老化中的角色  8
  3 紫外线的分类及特点  8-9
  4 UVA与光老化的关系  9
  5 UVA对成纤维细胞的损伤机理  9
  6 线粒体DNA概述  9-10
  7 线粒体DNA的突变  10-11
  8 普通缺失突变的机理  11
  9 普通缺失与光老化的关系  11
  10 巢式PCR方法原理  11-12
实验仪器及试剂  12-14
  主要仪器  12-13
  主要试剂  13-14
材料与方法  14-20
  1 实验前的准备  14
  2 提取皮肤标本  14
  3 提取标本中的成纤维细胞  14-15
  4 提取成纤维细胞DNA  15-16
  5 运用巢式PCR方法检测线粒体DNA突变  16-18
  6 PCR产物的琼脂糖凝胶电泳及图像分析  18-19
  7 SPSS软件统计分析  19-20
结果  20-23
讨论  23-29
  1 区分UVA和UVB的必要性  23
  2 研究低剂量UVA的现实指导意义  23
  3 取材的独特之处  23-24
  4 总结文献发现皮肤成纤维细胞中mtDNA普通缺失突变有以下特点  24
  5 巢式PCR反应体会  24-25
  6 实验结果解释  25-26
  7 UVA防护指标的选择  26
  8 UVA防护要点  26-29
结论  29-30
参考文献  30-33
附表附图  33-44
致谢  44-45
硕士期间发表的论文  45-61

应用巢式PCR检测低剂量UVA对人类面部皮肤的损伤

内容摘要

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