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海洋真菌绮丽穗霉Spicaria elegans胞外多糖的分离与鉴定

作　者: 张姗姗
导　师: 王长云
学　校: 中国海洋大学
专　业: 药物化学
关键词: 海洋真菌胞外多糖分离纯化结构
分类号: R914
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

海洋微生物是筛选和发现抗肿瘤药物先导化合物的重要资源。分离自青岛胶州湾海泥的真菌绮丽穗霉Spicaria elegans的次级代谢产物显示海虾致死活性,并对tsFT210细胞显示了细胞毒活性。在分析发酵液时发现其中存在大量的胞外多糖成分。本文从中分离纯化得到胞外多糖EPS,并对其进行单糖组成、结构和生物活性的初步研究。发酵液经脱脂脱色、浓缩后进行醇沉,得到胞外多糖粗品,采用超滤膜分离法和凝胶柱层析法进行纯化,得到胞外多糖EPS。采用高效凝胶渗透色谱法(HPGPC)测得EPS的分子量为88 kD。运用TLC, GC,IR, NMR, GC/MS,以及高碘酸氧化、Smith降解分析,对EPS的结构进行了分析鉴定。薄层色谱法和气相色谱法分析表明,EPS是由甘露糖构成的均多糖,即甘露聚糖。红外光谱显示,814cm-1为α-甘露糖特征吸收;1H NMR显示,异头质子信号在偏低场δ5.3,验证了甘露糖为α构型。GC/MS,以及高碘酸氧化、Smith降解分析,显示多糖主链由1→2连接的甘露糖构成,侧链主要由1→4和1→6连接的甘露糖构成,侧链与主链之间以1→6糖苷键和1→3糖苷键连接为主,并含有少量1→4连接。利用肿瘤细胞株MCF7,SF-268和NCI-H460对EPS进行抗肿瘤活性评价。结果表明,EPS对MCF7,SF-268和NCI-H460细胞株均未发现有明显的活性,其它生物活性正在测定中。本文首次从海洋真菌发酵液中分离获得甘露聚糖,为其精细结构和生物活性研究提供了基础资料,对海洋微生物胞外多糖的研究具有参考价值。

海洋真菌绮丽穗霉Spicaria elegans胞外多糖的分离与鉴定

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