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一株对硝基酚降解菌Pseudomonas putida LY2的分离与特性研究

作　者: 李宇
导　师: 付鸣佳
学　校: 江西师范大学
专　业: 生物化工
关键词: 对硝基酚臭假单胞菌环糊精生物强化 16S rRNA
分类号: X172
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
下　载: 28次
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内容摘要

对硝基酚是一种环境污染物,在上世纪广泛应用化工和农药等工业生产中,同时它又是农药甲基对硫磷的分解代谢物,其在环境中的广泛分布严重影响了人类的身心健康。生物强化（bioaugmentation）技术是指在生物处理系统中,通过投加具有特定功能的微生物、营养物或基质类似物,达到提高废水处理效果的手段和方法。从河南安阳农药厂土样中筛选得到一株能降解对硝基酚的菌株,命名为LY2,用通用引物扩增得到长为1,501bp部分16S rRNA序列,经BLAST后发现与多株Pseudomonas putida高度同源,说明该菌在分子系统发育分类学上属于恶臭假单胞菌,将其命名为P. putida LY2。在pH为8.0,30oC,150rpm优化培养条件下,在168h内,初始OD₆₀₀为0.1的P. putida LY2能在200mg/L的对硝基酚无机盐培养基中生长,300mg/L对硝基酚中则不能生长。经过不同浓度对硝基酚前期诱导后,发现P. putida LY2降解对硝基酚具有促进作用。当用200mg/L的对硝基酚诱导后,P. putida LY2能在72h内降解高达500mg/L的对硝基酚。同时发现环糊精添加对P. putida LY2降解高浓度对硝基酚有增效作用,环糊精添加量为6g/L时,能在36h内完全降解500mg/L的对硝基酚。

全文目录

摘要  3-4
ABSTRACT  4-7
引言  7-8
1 文献综述  8-22
  1.1 持久性有机污染物  8-9
  1.2 硝基酚  9-10
  1.3 生物强化（BIOAUGMENTATION）  10-12
  1.4 对硝基酚降解微生物  12-15
  1.5 对硝基酚降解途径  15-22
2 材料与方法  22-30
  2.1 实验材料  22-23
    2.1.1 土样来源  22
    2.1.2 药品及试剂  22
    2.1.3 仪器与设备  22-23
  2.2 实验方法  23-25
    2.2.1 培养基配方  23
    2.2.2 其他溶液  23-25
  2.3 实验内容  25-30
    2.3.1 对硝基酚降解菌株的富集和分离  25
    2.3.2 对硝基酚降解菌的鉴定  25-28
    2.3.3 对硝基酚标准曲线的绘制  28
    2.3.4 亚硝酸根离子标准曲线的绘制  28
    2.3.5 优化条件下对硝基酚降解活性  28-29
    2.3.6 不同PNP 浓度前诱导对高浓度对硝基酚降解影响  29
    2.3.7 β-环糊精添加对高浓度对硝基酚降解影响  29-30
3 结果与分析  30-39
  3.1 对硝基酚降解菌筛选结果  30
  3.2 对硝基酚降解菌鉴定结果与分析  30-32
    3.2.1 16S rRNA 基因片段扩增结果  30
    3.2.2 质粒提取结果  30-31
    3.2.3 测序拼接结果  31-32
  3.3 对硝基酚标准曲线的绘制  32-33
  3.4 亚硝酸根标准曲线的绘制  33-34
  3.5 优化条件（温度，PH）下 P. PUTIDA LY2 最大对硝基酚耐受浓度  34
  3.6 不同浓度PNP 前诱导对P. PUTIDA LY2 降解对硝基酚的影响  34-36
  3.7 β-环糊精添加对高浓度对硝基酚降解影响  36-39
4 讨论  39-42
  4.1 PNP 降解菌株的分离和鉴定  39
  4.2 菌株对硝基酚耐受范围的测定分析  39-40
  4.3 低浓度 PNP 前期诱导对 PNP 降解影响  40
  4.4 β-环糊精添加对 PNP 降解影响  40-42
5 结论  42-43
参考文献  43-50
致谢  50-51
在校期间公开发表论文(著)及科研情况  51

一株对硝基酚降解菌Pseudomonas putida LY2的分离与特性研究

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