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多糖类物质的光谱和电化学分析方法的研究

作　者: 丁雅勤
导　师: 孙伟
学　校: 青岛科技大学
专　业: 分析化学
关键词: 分光光度法电化学分析法肝素中性红吖啶橙甲基紫结晶紫吡啰红B亮绿相互作用超分子复合物
分类号: O629.12
类　型: 硕士论文
年　份: 2006年
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内容摘要

糖类物质不仅是自然界中全部生命体的重要组成部分，还是一种重要的信息分子，在生命科学、化学、医学等学科研究中都具有举足轻重的地位。光谱和电化学方法具有仪器价格便宜、实验操作简单、灵敏度高等优点，在生物大分子与有机小分子相互作用的研究中广泛应用。本论文以生物多糖肝素钠为主要研究对象，由于肝素钠本身没有光谱和电化学信号，采用有机小分子染料作为光谱和电化学探针，利用其能与多糖糖苷链上的某些基团发生静电结合非共价键的相互作用生成生物超分子复合物的本质，以及分子识别反应导致溶液的光谱和电化学信号发生变化的现象，将光谱分析和电化学分析同多糖类物质的检测相结合，开展了生物多糖光谱和电化学分析新方法的研究。本论文主要包括以下内容： 1．选择了中性红和吖啶橙为光谱探针，利用分光光度法对肝素钠进行了测定。根据有机小分子自身光谱特性，研究了体系加入肝素钠前后光谱信号的变化。从紫外-可见光谱图可以观察到有机小分子在紫外可见区有最大吸收峰，当体系中加入一定量的肝素钠后，溶液颜色变浅，最大吸收波长处的吸光度降低，表明有机染料与加入的肝素钠发生结合反应，生成了生物超分子复合物。对体系的识别条件进行了优化，考察了常见干扰物质如金属离子和氨基酸等对测定的影响。在最佳条件下，建立了测定肝素钠的工作曲线，并将所建立的方法应用于肝素钠注射液的测定，结果令人满意。用摩尔比法计算了体系的结合比。 2．选择了甲基紫、结晶紫、吡啰红B、亮绿等为电化学探针，用电化学分析法对肝素钠进行了测定。电化学分析法由于灵敏度高、选择性好、适用范围广，成为研究生物大分子结构与功能关系的有效方法，也可以用于多糖类物质的分析。依据肝素的结构特点选择了相应的有机小分子染料如甲基紫、结晶紫、吡啰红B、亮绿等作为电化学探针，以滴汞电极、静汞电极等为工作电极，采用循环伏安法、线性扫描极谱法等电化学手段，根据分子识别前后体系电化学信号的变化，建立了多糖分析的新方法。在一定条件下，有机小分子在汞电极上可以发生电极还原反应，从而出现良好的线性扫描极谱波，当加入肝素钠后，峰电流明显降低，峰电流的降低值

全文目录

中文摘要  3-5
英文摘要  5-12
第一章文献综述  12-32
  1.1 生物多糖的分类、结构、功能和研究意义  12-18
    1.1.1 生物多糖的分类  12-13
    1.1.2 生物多糖的结构与功能  13-16
    1.1.3 生物多糖的研究意义  16-18
  1.2 生物多糖的分析方法研究进展  18-25
    1.2.1 分子光谱法  19-25
      1.2.1.1 分光光度法  19-20
      1.2.1.2 荧光分析法  20-21
      1.2.1.3 光散射分析法  21-22
      1.2.1.4 圆二色性法  22
      1.2.1.5 电泳法  22-23
      1.2.1.6 质谱法  23
      1.2.1.7 高效液相色谱法  23
      1.2.1.8 生物传感器法  23-24
      1.2.1.9 电化学分析法  24-25
  1.3 糖类物质的研究展望  25-26
  参考文献  26-32
第二章中性红分光光度法测定肝素的含量  32-41
  2.1 实验部分  33-34
    2.1.1 仪器与试剂  34
    2.1.2 实验方法  34
  2.2 结果与讨论  34-40
    2.2.1 紫外-可见吸收光谱图  34-35
    2.2.2 最佳实验条件的选择  35-36
      2.2.2.1 酸度的影响  35-36
      2.2.2.2 NR浓度的影响  36
      2.2.2.3 反应时间、温度和体系的稳定性  36
    2.2.3 共存物质的影响  36-37
    2.2.4 离子强度的影响  37
    2.2.5 标准曲线及检测限  37-38
    2.2.6 样品分析  38
    2.2.7 摩尔比法求解最大结合数  38-40
  英文摘要  40-41
第三章吖啶橙与肝素钠相互作用的分光光度法研究  41-48
  3.1 实验部分  41-42
    3.1.1 仪器与试剂  42
    3.1.2 实验方法  42
  3.2 结果与讨论  42-47
    3.2.1 紫外-可见光谱曲线  42-43
    3.2.2 反应条件优化  43-44
      3.2.2.1 pH的影响及缓冲溶液的用量  43
      3.2.2.2 AO浓度的影响  43-44
      3.2.2.3 反应时间和稳定性  44
    3.2.3 共存物质的影响  44
    3.2.4 离子强度的影响  44-45
    3.2.5 工作曲线和检测限  45
    3.2.6 样品分析及回收率  45-46
    3.2.7 最大结合数的求解  46-47
  英文摘要  47-48
第四章甲基紫与肝素钠结合反应的电化学研究及其分析应用  48-60
  4.1 实验部分  49-50
    4.1.1 仪器与试剂  49
    4.1.2 实验方法  49-50
  4.2 结果与讨论  50-59
    4.2.1 紫外-可见光谱图  50
    4.2.2 线性扫描极谱曲线  50-51
    4.2.3 实验条件的优化  51-52
      4.2.3.1 溶液酸度的选择  51
      4.2.3.2 MV浓度的影响  51
      4.2.3.3 反应时间、温度以及溶液稳定性的影响  51-52
      4.2.3.4 仪器条件的选择  52
    4.2.4 电化学行为的研究  52-54
    4.2.5 结合比及结合常数求解  54-55
    4.2.6 干扰物质的影响  55-56
    4.2.7 离子强度的影响  56-57
    4.2.8 工作曲线、精密度和检测限  57
    4.2.9 样品分析  57-59
  英文摘要  59-60
第五章结晶紫线性扫描伏安法测定肝素钠的研究  60-69
  5.1 实验部分  61
    5.1.1 仪器与试剂  61
    5.1.2 实验方法  61
  5.2 结果与讨论  61-68
    5.2.1 紫外-可见吸收光谱图  61-62
    5.2.2 循环伏安图  62-63
    5.2.3 结合比和结合常数的求解  63-64
    5.2.4 实验条件的选择  64-65
      5.2.4.1 缓冲溶液及酸度的影响  64
      5.2.4.2 CV用量的影响  64-65
      5.2.4.3 反应时间、温度和稳定性  65
      5.2.4.4 仪器条件的选择  65
    5.2.5 离子强度的影响  65-66
    5.2.6 干扰物质的影响  66
    5.2.7 工作曲线、精密度和检测限  66
    5.2.8 样品分析  66-68
  英文摘要  68-69
第六章吡啰红B极谱猝灭分析法测定肝素钠的研究  69-80
  6.1 实验部分  70
    6.1.1 仪器与试剂  70
    6.1.2 实验方法  70
  6.2 结果与讨论  70-79
    6.2.1 紫外-可见吸收光谱图  70-71
    6.2.2 线性扫描二阶导数极谱图  71
    6.2.3 实验条件的选择  71-73
      6.2.3.1 不同缓冲溶液及其酸度的影响  71-72
      6.2.3.2 B-R缓冲溶液用量的选择  72
      6.2.3.3 PB用量的影响  72-73
      6.2.3.4 仪器条件的选择  73
      6.2.3.5 反应时间、温度和稳定性  73
    6.2.4 NaCl和乙醇对测定的影响  73-74
    6.2.5 表面活性剂的影响  74
    6.2.6 共存物质的影响  74
    6.2.7 工作曲线、精密度和检测限  74-75
    6.2.8 样品分析  75
    6.2.9 电化学行为的研究  75-77
    6.2.10 结合比及结合常数的求解  77-79
  英文摘要  79-80
第七章亮绿极谱猝灭分析法测定肝素钠的研究  80-93
  7.1 实验部分  81
    7.1.1 仪器与试剂  81
    7.1.2 实验方法  81
  7.2 结果与讨论  81-92
    7.2.1 紫外-可见吸收光谱图  81-82
    7.2.2 线性扫描二阶导数极谱图  82-83
    7.2.3 实验条件的选择  83-84
      7.2.3.1 酸度的影响  83
      7.2.3.2 B-R缓冲溶液浓度的选择  83
      7.2.3.3 LG用量的影响  83-84
      7.2.3.4 仪器条件的选择  84
      7.2.3.5 反应时间、温度和稳定性  84
    7.2.4 离子强度和乙醇对测定的影响  84-85
    7.2.5 干扰物质的影响  85
    7.2.6 表面活性剂的影响  85-86
    7.2.7 工作曲线、精密度和检测限  86
    7.2.8 样品的测定和回收率实验  86-87
    7.2.9 结合比与结合常数的求解  87-90
    7.2.10 肝素加入前后LG电化学参数的比较  90-92
  英文摘要  92-93
参考文献  93-97
结论  97-98
致谢  98-99
攻读硕士学位期间已发表的相关学术论文题录  99-101
独创性声明  101
关于论文使用授权的说明  101

多糖类物质的光谱和电化学分析方法的研究

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