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高糖对血管内皮细胞凋亡的影响及NO的保护作用

作 者: 杜海平
导 师: 李裕明
学 校: 华中科技大学
专 业: 内科学
关键词: 血管内皮细胞 细胞凋亡 硫氧还蛋白 硫氧还蛋白相互作用蛋白 氧化应激 凋亡信号调节激酶1 一氧化氮
分类号: R587.2
类 型: 硕士论文
年 份: 2011年
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内容摘要


目的:观察一氧化氮对不同糖浓度下培养的人脐静脉内皮细胞凋亡的影响,探讨一氧化氮对糖尿病血管病变的影响和可能机制。方法:根据培养液中葡萄糖浓度不同分为四组:正糖11.1mmol/L组;中糖16.7mmol/L组;高糖22.2mmol/L组和极高糖33.3mmol/L组。人脐静脉血管内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)在上述四组培养液中培养48小时,然后分别在各组中加入(干预组)或不加入(未干预组)一氧化氮供体---硝普钠(Sodium Nitroprusside, SNP),继续培养24小时,应用Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率,应用RT-PCR检测各组细胞硫氧还蛋白相互作用蛋白(Thioredoxin-interacting Protein,Txnip)mRNA的表达。结果:1. Annexin V/PI双染流式细胞仪检测细胞凋亡率为:(1)未干预组:测得细胞凋亡率分别为:中糖组较正糖组增加29.76%((16.57±1.91)%vs(12.77±1.54)%)(p<0.05)。高糖组较正糖组增加56.38%((19.97±1.81)%vs(12.77±1.54)%)(p<0.05)。极高糖组较正糖组增加94.75%((24.87±1.75)%vs(12.77±1.54)%)(p<0.05)。且极高糖组凋亡率高于中糖组,差异有统计学意义(p<0.05);高糖组与中糖组,极高糖组与高糖组比较,其凋亡率增加,但差异均无统计学意义(p>O.05)(2)干预组:测得干预组细胞凋亡率分别为:正糖组:干预组较未干预组下降55.13%((5.73±1.22)%vs(12.77±1.54)%)(p<0.05)。中糖组:干预组较未干预组下降38.26%((10.23±1.48)%vs(16.57±1.91)%)(p<0.05)。高糖组:干预组较未干预组下降32.55%((13.47±1.78)%vs(19.97±1.81)%)(p<0.05)。极高糖组:干预组较未干预组下降52.15%((11.90±1.35)%vs(24.87±1.75)%)(p<0.05)。在各组糖浓度中干预组细胞凋亡率均低于未干预组(p<0.05)。2. RT-PCR检测Txnip mRNA的表达量为:(1)未干预组:测得细胞Txnip mRNA的表达分别为:中糖组较正糖组增加25.00%(0.85±0.006vs0.68±0.009)(p<0.05)。高糖组较正糖组增加30.88%(0.89±0.005vs0.68±0.009)(p<0.05)。极高糖组较正糖组增加35.29%(0.92±0.002vs0.68±0.009)(p<0.05)。且极高糖组Txnip mRNA表达量高于中糖组,差异有统计学意义(p<0.05);高糖组与中糖组,极高糖组与高糖组比较,其Txnip mRNA表达量增加,但差异均无统计学意义(p>O.05)。(2)干预组:测得干预组细胞Txnip mRNA的表达分别为:正糖组:干预组较未干预组下降39.71%(0.41±0.013vs0.68±0.009)(p<0.05)。中糖组:干预组较未干预组下降16.47%(0.71±0.008vs0.85±0.006)(p<0.05)。高糖组:干预组较未干预组下降12.36%(0.78±0.005vs0.89±0.005)(p<0.05)。极高糖组:干预组较未干预组下降10.87%(0.82±0.001vs0.92±0.002)(p<0.05)。在各组糖浓度中干预组细胞Txnip mRNA表达量均低于未干预组(p<0.05)。结论:随着培养液中葡萄糖浓度的增加,HUVECs凋亡率亦增加。其发生的机制可能为高糖环境下氧化应激水平增高,进而激活一系列信号转导途径促进细胞凋亡。NO能阻断氧化应激途径,抑制高糖条件下诱导的血管内皮细胞凋亡。其作用机制可能与NO导致细胞Txnip mRNA的表达减少有关。

全文目录


缩略词  5-6
中文摘要  6-8
英文摘要  8-10
绪论  10-12
实验材料和方法  12-19
实验结果  19-28
讨论  28-33
参考文献  33-38
综述  38-47
  参考文献  43-47
致谢  47

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中图分类: > 医药、卫生 > 内科学 > 内分泌腺疾病及代谢病 > 胰岛疾病 > 糖尿病性昏迷及其他并发症
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