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重组人表皮生长因子对体外培养人角质形成细胞增殖的影响

作　者: 赵阳
导　师: 郭文平
学　校: 新疆医科大学
专　业: 烧伤整形学
关键词: 组织工程重组人表皮生长因子角质形成细胞增殖影响
分类号: R644
类　型: 硕士论文
年　份: 2005年
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内容摘要

目的:掌握角质形成细胞培养的技术,了解细胞的生长特性;表皮生长因子在不同浓度条件下对角质形成细胞的增殖影响,以及表皮生长因子对角质形成细胞有无异常分化的作用。方法:用体外角质形成细胞的原代培养技术,用7组不同浓度的表皮生长因子干预体外培养的细胞,噻唑兰(MTT)法检测细胞的活性;选择最适浓度表皮生长因子干预的角质形成细胞用流式细胞仪检测DNA倍体情况。结果:原代培养的角质形成细胞膜片在12天左右形成,可见清晰的细胞间隙;选择进入对数生长期的细胞在rhEGF浓度为0.01μg/L～100μg/L时和对照组相比P<0.05,具有统计学差异,OD值为0.330±0.014～0.400±0.018,提示此浓度下对角质形成细胞有增殖作用,0.1—1μg/L下增殖最强;在500μg/L和0.001μg/L下与对照组相比P>0.05,无统计学差异,OD值为0.251±0.025提示无明显增殖作用;流式细胞仪检测在1μg/L下无细胞倍体异常的情况,在G1+S期,提示为二倍体。结论:表皮生长因子浓度为0.01μg/L—100μg/L时,提示该浓度下促角质形成细胞增长明显,在促增殖范围内无致细胞染色体异常分化的作用,细胞多数为G1+S期,提示此条件下角质形成细胞具有很强的增生能力。根据细胞培养显微观察rhEGF在500μg/L时,对角质形成细胞有明显的抑制作用,0.001μg/L为最低有效浓度。rhEGF对细胞生长周期无影响。

全文目录

摘要  3-4
Abstract  4-5
前言  5-7
材料与方法  7-10
  1 FAD培养液的配置  7-8
  2 角质形成细胞的分离、提取  8
  3 角质形成细胞的培养  8
  4 无血清培养基的细胞培养  8
  5 角质形成细胞的鉴定  8-9
  6 MTT法测定EGF对角质形成细胞的影响  9
  7 流式细胞仪检测角质形成细胞倍体  9-10
结果  10-17
讨论  17-18
小结  18-19
致谢  19-20
参考文献  20-24
综述  24-34
攻读硕士学位期间发表的学术论文  34

重组人表皮生长因子对体外培养人角质形成细胞增殖的影响

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