学位论文 > 优秀研究生学位论文题录展示

兔脂肪干细胞与骨髓间充质干细胞成软骨能力的比较

作　者: 赵俊延
导　师: 安荣泽
学　校: 遵义医学院
专　业: 骨外科学
关键词: 间充质干细胞组织工程骨髓脂肪组织成软骨分化
分类号: R329
类　型: 硕士论文
年　份: 2011年
下　载: 14次
引　用: 0次
阅　读: 论文下载

内容摘要

目的：比较兔脂肪来源和骨髓来源的两种间充质干细胞的成软骨能力。方法：选取六月龄新西兰大白兔,取腹部脂肪,分离培养ADSCs并进行传代。取兔双侧股骨,采用全骨髓培养法分离培养BMSCs并进行传代。使用倒置显微镜观察两种间充质干细胞的形态及生长增殖情况。比较两种细胞的原代及2、3代的传代时间。绘制3代ADSCs和BMSCs的生长曲线,测定两种细胞的倍增时间并进行比较。选取两种间充质干细胞的3代细胞进行成软骨诱导,实验分为四组：ADSCs成软骨诱导组(A1),ADSCs一般DMEM培养基培养组(A2),BMSCs成软骨诱导组(B1), BMSCs一般DMEM培养基培养组(B2)。其中A1、B1为实验组,A2、B2为对照组。倒置显微镜下观察各组细胞形态及生长增殖情况。培养14天后,实验组行甲苯胺蓝染色和Ⅱ型胶原免疫组化染色,对照组行Ⅱ型胶原免疫组化染色。Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色灰度值评分法比较实验组中A1、B1的成软骨能力。结果：BMSCs原代细胞呈聚集样生长,而ADSCs原代细胞呈单个、散在生长。自第二代开始,BMSCs的生长方式与ADSCs一致,以单个、散在方式生长。单层培养时,这两种间充质干细胞增殖迅速且稳定,形态上均为成纤维细胞样,呈梭形,没有观察到明显的形态学差异。原代ADSCs传代时间为6天,第2代、第3代的ADSCs传代时间为3天。原代BMSCs传代时间为10天,第2代、第3代的BMSCs传代时间为5天。原代ADSCs传代时间较原代BMSCs快4天,而第2代、第3代的ADSCs传代时间较同代BMSCs快2天。生长曲线示ADSCs增殖速度要快于BMSCs, ADSCs倍增时间为26h,BMSCs为36h。实验组加入成软骨诱导液后,细胞的增殖缓慢,细胞的形态由长梭形逐渐变成了多角形,或者圆形。而对照组细胞的形态无变化,皆为梭形。成软骨诱导14天后,实验组A1和B1甲苯胺蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化染色皆为阳性表达。而对照组Ⅱ型胶原免疫组化染色阴性表达。Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色灰度值评分示,B1组表达Ⅱ型胶原水平高于A1组(p<0.05)。结论：单层培养时,ADSCs与BMSCs形态上均为成纤维细胞样,呈梭形,两者之间没有明显的形态学差异。ADSCs与BMSCs增殖皆迅速且稳定,但是ADSCs的生长增殖速度更快。单层培养时,特定条件下,ADSCs与BMSCs均能向软骨细胞转化。两者成软骨分化时,BMSCs比ADSCs有更高的潜能。

全文目录

英文缩略词对照表 4-6中文摘要 6-8Abstract 8-10前言 10-12材料与方法 12-20结果 20-26讨论 26-32结论 32-33参考文献 33-37综述 37-46 参考文献 43-46致谢 46-47作者简历 47

相似论文

中图分类: > 医药、卫生 > 基础医学 > 人体形态学 > 人体组织学
© 2012 www.xueweilunwen.com