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姜黄素与bcr/abl反义核酸联合应用对慢粒白血病K562细胞株的抗肿瘤作用

作　者: 张昆仲
导　师: 许建华
学　校: 福建医科大学
专　业: 药理学
关键词: 姜黄素 反义核酸 慢性粒细胞白血病 bcr/abl P210bcr/abl蛋白 凋亡 信号转导通路
分类号: R733.7
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
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内容摘要


目的 研究姜黄素(Cur)与bcr/abl反义核酸联合应用对慢性粒细胞白血病(CML)K562细胞株的抗肿瘤作用,探讨Cur抗CML的作用特点与机制。方法 以表达P210 bcr/abl 蛋白阳性的K562细胞株为实验模型,用经全硫代修饰的bcr/abl序列的反义核酸(ASODN)封闭K562细胞bcr/abl mRNA,观察在K562细胞bcr/abl基因被阻断的情况下,Cur诱导K562细胞凋亡、抑制细胞增殖的强度与单独Cur比较有何不同。用AO/EB荧光染色法检测凋亡率;用MTT法检测细胞增殖抑制率;用Western blot法检测Cur对K562细胞P210 bcr/abl蛋白含量的影响,以及在bcr/abl基因被阻断前后,Cur对P210 bcr/abl蛋白含量及其诱导的下游信号转导通路中信号分子的影响。 结果 1、单独反义核酸对K562细胞具有生长抑制作用,且呈量效、时效关系,作用72 h发挥较明显的抑制作用,120 h 达到坪期。2、Cur和反义核酸联合应用对K562 细胞凋亡的影响比Cur单独作用明显,其促凋亡作用呈协同作用。3、Cur与反义核酸联合应用对K562细胞生长抑制的影响比单独应用Cur或反义核酸明显,二者对K562细胞的生长抑制具有协同作用。4、Western blot结果显示,Cur可明显下调P210bcr/abl蛋白含量,并呈时效、量效关系;与反义核酸联合应用对P210bcr/abl蛋白含量的下调作用比单独应用Cur或反义核酸强,二者联合应用呈协同作用,对P210bcr/abl蛋白下游的凋亡信号—NF-КB也呈明显的协同下调作用。结论 Cur与bcr/abl反义核酸联合应用可协同抑制K562细胞bcr/abl mRNA,下调P210bcr/abl蛋白及其下游凋亡信号NF-КB,对K562细胞的增殖抑制和诱导凋亡具有协同作用。Cur可能通过多靶点产生抗CML的作用。

全文目录


中文摘要  3-4
英文摘要  4-6
前 言  6-8
第一部分 姜黄素与bcr/abl反义核酸联用对K562细胞增殖与凋亡的影响  8-18
  1 材料与方法  8-10
    1.1 药品与试剂  8
    1.2 细胞株与培养条件  8-9
    1.3 台盼蓝排染法观察药物对K562细胞增殖的影响  9
    1.4 AO/EB荧光染色法观察药物对K562细胞凋亡的影响  9
    1.5 MTT法观察药物对K562细胞增殖的影响  9-10
    1.6 数据处理  10
  2 结果  10-17
    2.1 bcr/abl反义核酸对K562细胞增殖的抑制作用  10-11
    2.2 姜黄素与bcr/abl反义核酸联用对K562细胞凋亡的影响  11-14
    2.3 姜黄素与bcr/abl反义核酸联用对K562细胞增殖的影响  14-17
  3 讨论  17-18
第二部分 姜黄素与bcr/abl反义核酸联用对K562细胞P210bcr/abl蛋白及相关信号分子的影响  18-26
  1 材料与方法  18-20
    1.1 药品与试剂  18-19
    1.2 细胞株与培养条件  19
    1.3 仪器  19
    1.4 方法  19-20
  2 结果  20-24
    2.1 姜黄素对K562细胞P210bcr/abl蛋白含量的影响  20-22
    2.2 姜黄素与bcr/abl反义核酸联用对P210bcr/abl蛋白及其下游信号分子的影响  22-24
  3 讨论  24-26
结 论  26-27
参考文献  27-30
英文缩略词表  30-31
综 述  31-38
参考文献  38-41
致 谢  41

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中图分类: > 医药、卫生 > 肿瘤学 > 造血器及淋巴系肿瘤 > 白血病
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