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浮萍多糖的提取分离及其初步药效学研究

作　者: 王阳
导　师: 王伯初
学　校: 重庆大学
专　业: 药物化学
关键词: 浮萍多糖提取分离总糖含量非特异性免疫
分类号: R284
类　型: 硕士论文
年　份: 2004年
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内容摘要

本文以国家药品食品监督管理局(SFDA)颁布的《药品注册管理办法》的相关要求为基本标准,探索了常见天然药物浮萍的有效部位浮萍多糖的提取分离工艺,使浮萍多糖的含量达到了SFDA的申报要求,并进行了初步药效学研究以证明浮萍多糖具有免疫调节活性,具体研究内容如下:(1)通过煎煮、超滤、脱蛋白、乙醇沉淀等步骤对浮萍中免疫活性成分浮萍多糖进行了提取分离,尤其是探索了超滤法分离浮萍多糖的工艺。超滤法分离条件温和,不会引起多糖的降解,而且设备简单,操作方便,没有相的转移。三氯乙酸脱蛋白反应条件控制较严格,但除去游离蛋白质的效率比较高。乙醇沉淀6次可明显提高硫酸-苯酚法检测提取物样品的吸光度,还可以起到一定的脱色作用。经过上述步骤得到浅褐色粉末,纯度53.5%,蛋白质含量1.2%,收率0.08%(见表2.2)。(2)采用分光光度法,分别经苯酚-硫酸和蒽酮-硫酸显色,测定浮萍多糖提取物中的总糖含量,并通过线性和范围、精密度、稳定性和准确度等分析效能指标对该方法进行评价,为浮萍多糖提取物质量控制标准的建立提供有意义的参考。实验结果表明,苯酚-硫酸法和蒽酮-硫酸法简单快速,显色稳定,精密度高,准确度较好,可以作为浮萍多糖总糖含量测定的有效方法。(3)进行了环磷酰胺致免疫力低下KM小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验,证明浮萍多糖能够改善免疫抑制小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能,起到免疫增强作用(见表4.1);以小鼠碳粒廓清实验研究浮萍多糖提取物对小鼠单核吞噬细胞系统功能的影响,实验证明浮萍多糖对健康小鼠的单核吞噬细胞系统功能有明显的改善作用(见表4.2)。以上两个实验证明浮萍多糖对机体的非特异性免疫功能有显著的增强作用。综上所述,本文建立了一种简单、快速、有效的浮萍多糖提取分离方法,目标是使浮萍多糖提取物中有效部位的含量达到SFDA规定的新药申报的标准,同时探讨了浮萍多糖质量控制中总糖含量的测定方法和对该方法进行了评价,并且通过初步药效学试验研究浮萍多糖的免疫调节活性,为浮萍多糖的药用研究开发提供技术支持和理论依据。

浮萍多糖的提取分离及其初步药效学研究

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