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稀土壳聚糖对鲫鱼非特异性免疫、肌肉品质及肠道微生物区系的影响

作　者: 汪明
导　师: 刘军
学　校: 武汉工业学院
专　业: 动物营养与饲料科学
关键词: 鲫鱼 非特异性免疫 肌肉品质 DNA提取 肠道微生物区系
分类号: S963.1
类　型: 硕士论文
年　份: 2010年
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内容摘要


本论文研究在日粮中添加稀土壳聚糖螯合盐(rare earth-chitosan chelate, RECC)对鲫鱼(Carassius auratus)非特异性免疫力、躯体生化组成以及肠道微生物的影响。试验分为1个空白对照组和3个试验组。对照组饲喂基础日粮,试验组在基础日粮中分别添加0.08%、0.16%和0.24%的RECC。每组5个重复,每个重复35尾试验鱼,鲫鱼平均初始体重约为7.83g。试验期60天。分别在开始饲喂后第20d、40d和第60d时,测定非特异性免疫指标;在试验结束时(60d),进行肌肉品质和肠道微生物多样性的研究分析。试验结果表明:1、饲喂20d后,三个RECC组血清溶菌酶、脾脏溶菌酶活性较对照组均有不同程度提高,且0.24%RECC组血清溶菌酶显著高于空白对照组(P<0.05);三个RECC组血清SOD、脾脏SOD、头肾SOD活性略有升高,但各组差异不显著(P>0.05);三个RECC组脾脏指数、头肾指数与对照组相比均上升,且0.24%RECC组脾脏指数显著高于对照组(P<0.05),0.16%RECC组、0.24%RECC组头肾指数也显著高于对照组(P<0.05)。但在第40d、60d时,各组间的溶菌酶活性、SOD活性、免疫器官指数比较接近,差异均不显著(P>0.05)。2、本研究中,三个RECC组鲫鱼肌肉中粗蛋白含量高于空白对照组或接近(P>0.05);粗脂肪含量均高于空白对照组,其中0.16%RECC组粗脂肪的含量显著高于其空白对照组、0.08%RECC组和0.24%RECC组(P<0.05)。在鲫鱼日粮中添加RECC,可提高或显著提高肌肉中肌苷和肌苷酸的含量,降低肌肉中胆固醇含量。其中0.16%RECC组肌苷含量显著高于空白对照组(P<0.05),三个RECC组胆固醇含量均较空白对照组有不同程度下降(P>0.05)。3、尝试提取鲫鱼肠道菌群总DNA,为研究鱼类肠道菌群结构提供依据。以鲫鱼肠道内容物为样本,使用PBS多次洗涤,离心样品,沉淀菌体。使用试剂盒法提取肠道菌群总DNA,同时以水作为阴性对照。4组样品的DNA提取物经1.5%琼脂糖凝胶电泳检测,结果显示:各组样品总DNA25kb左右,每组样品条带明亮、清晰、整齐、无降解现象,提取效果较好;而阴性对照组未出现条带。表明所提取DNA样品溶液清亮,可用于后续试验研究。通过设计的细菌通用引物,以提取得到的细菌总DNA作为模板,对其16S rDNA基因进行PCR扩增,所得PCR扩增产物图谱显示清晰,条带整齐,片段长度为450左右,与预期片段大小一致,且没有非特异条带和引物二聚体。该片段的大小、浓度均符合SSCP检测的要求,可以用于后续分析。4、经过SSCP电泳后,图谱中总共出现39个条带,空白对照组、0.08%RECC组、0.16%RECC组、0.24%RECC组条带数目分别为20、22、26、21。其中条带6、条带12、条带24、条带28、条带29为各处理组的共有条带,但这些共有条带在各组中的灰度大小不一致;并且各组都具有数目不等的特有条带。0.08%RECC组、0.16%RECC组和0.24%RECC组Shannon-Wiener指数(H′)分别为4.19、4.39和4.36,均高于空白对照组(3.65)。空白组和0.08%RECC组、0.08%RECC组和0.24%RECC组βc指数较高,其它各组之间βc指数较低。空白对照组和0.08%RECC组、0.08%RECC组和0.24%RECC组相似性较低,分别为0.43和0.42,相似性指数在0.5以下。而其它各组间相似性指数较大,均大于0.5。

全文目录


摘要  4-6
ABSTRACT  6-10
第一章 文献综述  10-25
  1.1 稀土壳聚糖的研究进展  10-17
  1.2 鱼类免疫系统与非特异性免疫系统  17-19
  1.3 鱼类肠道微生物的研究现状  19-23
  1.4 研究的目的及内容  23-25
第二章 实验研究  25-58
  实验一 稀土壳聚糖对鲫鱼非特异性免疫力的影响  25-36
    1.1 材料与方法  25-28
    1.2 结果与分析  28-33
    1.3 讨论  33-35
    1.4 小结  35-36
  实验二 稀土壳聚糖对鲫鱼肌肉品质的影响  36-43
    2.1 材料与方法  36-39
    2.2 结果与分析  39-41
    2.3 讨论  41-42
    2.4 小结  42-43
  实验三 鲫鱼肠道微生物总DNA 的提取  43-50
    3.1 材料与方法  43-47
    3.2 结果  47-48
    3.3 讨论  48-49
    3.4 小结  49-50
  实验四 稀土壳聚糖对鲫鱼肠道微生物区系的影响  50-58
    4.1 材料与方法  50-51
    4.2 样品处理与检测  51-53
    4.3 结果与分析  53-56
    4.4 讨论  56-57
    4.5 小结  57-58
第三章 结论与建议  58-60
  3.1 结论  58
  3.2 创新点  58-59
  3.3 有待进一步解决的问题  59-60
参考文献  60-72
致谢  72-73
攻读学位期间研究成果  73

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中图分类: > 农业科学 > 水产、渔业 > 水产养殖技术 > 水产动物饵料及其营养 > 饵料基础科学
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